邻苯二甲酸_2_乙基已基_酯对小鼠脏器损伤作用
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邻苯二甲酸_2_乙基已基_酯对小鼠脏器损伤作用
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中国公共卫生2006年5月第22卷第5期 ChinJPublicHealthMay2006Vol.22No.5文章编号:100120580(2006)0520589203 中图分类号:R994 文献标识码:A
589
【论 著】
邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯对小鼠脏器损伤作用3
厉曙光1,2,赵文红2,金泰 1
摘 要:目的 了解邻苯二甲酸酯(2-乙基已基)(DEHP)对小鼠各组织器官造成的损伤。方法 将昆明种小鼠
进行60d喂养实验后随机分为5组,DEHP浓度为250,500,1000,2000μg/ml等4个剂量组,称量体重和各脏器湿重并计算脏器系数。结果 较高剂量组小鼠在染毒10d后,体重停止增长且有体重减轻的现象(P<0105,P<0101),雌鼠接触DEHP60d之后,各染毒剂量组小鼠其心脏/体、肺/体系数与对照组相比都增加(P<0105,P<0101);肝脏/体、肾脏/体系数除250μg/ml剂量组外与对照组相比均有增长的趋势(P<0105,P<0101)。雄鼠接触DEHP60d后,各染毒剂量组小鼠其心脏/体、肝脏/体、肺/体系数与对照组相比均增加P<0105,P<0/体系数则显著减少(P<0105,P<0105)。结论 DEHP染毒60d关键词:邻苯二甲酸酯(2-乙基己基)(DEHP);小鼠;EffectsofDi-2-in I,O,JINTaiyu.SchoolofPublicHealth,FudanUouttheonKunmingmicevisceramadebydi-2-ethylhexylphalate(DEHP).Methods dividedinto5groupsinrandomizationafter60daysfeedandtheconcentrationgroupsofDEHPwere,500,1000,2000μg/mlrespectively.Toquantifytheavoirdupoisandwetweightofapieceviscerainmice,thencountthecoefficientofviscera.Results Therewasceaseandloseweightinthehigherdosagegroupofmiceafterexposure10days(P<0105,P<0101).Thecoeffcientofheart/bodyandlung/bodyincreasedinfemalecomparedwiththecontrolexposuretoDEHPafter60days(P<0105,P<0101);thecoefficientofliver/bodyinallgroupsexcept250μg/mlconcentrationincreasedcomparedwiththecontrol(P<0105,P<0101).Thecoefficientofspermary/bodyinmalegroupsreducedsignificantly(P<0105,P<0101)comparedwiththecontrolexposuretoDEHPafter60day,buttheresultsinoth2ergroupswerereversed(P<0105,P<0101).Conclusion ThevisceraofmiceweredamagedafterDEHP-poisoned60days.
Keywords:di-2-ethylhexylphalate(DEHP);mice;coefficientofviscera
酞酸酯类化合物(Phthalatic2acidesters,PAEs)作为增塑剂广泛用于食品包装材料、容器、医疗用品及人造革等方面,其中用量最大的邻苯二甲酸酯(2-乙基己基)(Ei2Ehtylexyl
Phthalate,DEHP)的应用最为广泛,其销售量占PAEs总量的40%
〔1〕
周后随机分成4组;用浓度为2%乳脂剂蔗糖脂肪酸酯将
DEHP充分溶解至250,500,1000,2000μg/ml等4个剂量组,另设蔗糖脂肪酸酯对照组。采用饮水摄入法,各组给予含不同浓度DEHP的2%的蔗糖脂肪酸酯溶液。连续染毒60
d,每5d称重1次,60d后处死,称量各脏器湿重,计算脏器系
。由于塑料制品中的DEHP并未聚合到聚氯乙烯高
分子的碳链上,且随着时间的推移,可不断逸出至大气、土壤和水域中造成环境污染,从而对人体健康造成危害。目前有关DEHP及其代谢产物对生物体造成有害影响的研究多见于生殖毒性,但对DEHP的亚慢性毒作用报道较少。本研究对昆明种小鼠进行60d喂养实验,以观察DEHP对小鼠各组织器官造成的损伤,进而为DEHP的安全性评价,制定其在各种食品及生物材料中的卫生标准提供依据。
1 材料与方法
111 试剂和仪器 DEHP;蔗糖脂肪酸酯(食品级);无水乙
数。脏器系数的计算公式为:
×100%
体重
113 病理组织学观察 取各剂量组雌、雄小鼠各2只,将小
脏器系数(%)=
鼠脱颈致死,立即解剖,取出内脏,将小鼠的心脏、肝脏、肾脏及雄鼠睾丸上的血液用滤纸吸干,用手术刀将其切成1cm×
1cm×012cm的组织块,分别放入盛有10%甲醛溶液的清洁
瓶内,参照文献〔2〕将组织洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋和切片。
114 统计分析 采用SAS软件的方差分析(Dunettt检验
醇;甲醛;二甲苯;石蜡;苏木素-伊红;磷酸二氢钠(NaH2PO4
?H2O);磷酸氢二钠(Na2HPO4)等。YL3回转式切片机(上海仪表厂);ZMD-2自动磨刀机(上海医疗器械四厂);B-80型制冰机(上海安亭科学仪器厂);OlympusPM-10ADS自动纤维照相仪。
112 实验方法 4周龄昆明种小鼠100只(复旦大学医学院
法)进行统计处理。
2 结 果
211 DEHP对小鼠外观行为的影响 对照组小鼠在实验过
程中未出现异常表现,DEHP染毒组小鼠则有异常现象。较高剂量组小鼠接触DEHP20d,中剂量组小鼠接触DEHP30d以后,出现不同程度的行动迟缓,皮毛疏松无光泽,且在雄性中、高剂量组有7只(35%)小鼠在尾部和腹部出现严重的淤血块,有的布满整个尾部及大部分腹部。
212 DEHP对小鼠体重的影响(表1,表2) 由表1可见,雌性
实验动物中心,清洁级),雌、雄各半,体重(20±3)g。饲养1
3基金项目:国家自然科学基金(30271123) 作者单位:11复旦大学公共卫生学院,上海200032;21同济大学医学院 作者简介:厉曙光(1955-),男,浙江绍兴人,教授,硕士,主要从事
食品毒理学研究。
小鼠在接触1000和2000μg/ml的DEHP10d,接触500μg/ml
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590中国公共卫生2006年5月第22卷第5期 ChinJPublicHealthMay2006Vol.22No.5
表1 DEHP染毒对雌性小鼠体重的影响(??x±s,n=10)
μ组别(g/ml)对照
DEHP250
50010002000
0d2117±11182211±0192114±1132112±1162117±111
10d2515±1122616±1162418±1132211±01933
20d2813±2112814±2102615±1132514±01933
30d3114±1163015±2152810±115
3
40d3311±1163117±1173114±1113011±11433
50d3515±1183415±1173210±118
3
60d3813±1133712±2123316±11732910±1153333
2615±11733
2815±11933
注:3P<0105,33P<0101
表2 DEHP对雄性小鼠体重的影响(??x±s,n=10)
μ组别(g/ml)对照
DEHP250
50010002000
0d2213±1102214±0192113±1132213±1112214±113
10d2616±1142612±1172517±0192519±1163
20d3215±1183210±1183014±1173018±210330d3419±1133315±118331123212±13
40d3911±1143612±2123513617633
50d4213±1111119143333
3716±114
60d4419±1134111±11733517±118333415±2113333
注:3P<0105,33P<0101
的DEHP30d后,组小鼠比较,105)个较高剂量组小鼠在染毒40d,;
250μg/ml剂量组小鼠体重与对照组相比差异无统计学意义。
214 DEHP对小鼠各脏器组织形态学的影响 镜下观察小
鼠各组织切片可发现,阴性对照组小鼠的心、肝、肾、睾丸组织细胞正常。而DEHP染毒组小鼠各组织细胞都受到不同程度的损伤,较高染毒组各组织细胞受到损伤则更明显。肝细胞明显广泛浊肿,肝细胞水样变性,细胞内水分增多,胞体肿大,胞浆比较清亮;肝中央静脉扩张充血,有炎细胞侵润,轻度细胞坏死现象(细胞核消失)。在淤血周围个别细胞出现空泡,脂肪变性。
DEHP对肾脏的影响250μg/ml剂量组无明显变化;500
由表2可见,2000μg/ml组小鼠在接触DEHP10d,1000μg/ml组在接触DEHP第15d,500μg/ml组在接触DEHP第
30d后,其体重增长有减缓的趋势,与对照组小鼠比较,差异
有统计学意义(P<0105);2000,1000及500μg/ml3个剂量
组小鼠在实验后期都出现体重减轻的趋势;250μg/m剂量组小鼠体重与对照组相比差异无统计学意义。213 DEHP对小鼠脏器系数的影响(表3,表4) 由表3可见,雌性小鼠接触DEHP60d之后,各染毒剂量组小鼠其心脏
/体、肺/体系数与对照组相比都增加(P<0105,P<0101);肝
μg/ml剂量组有轻度水肿;1000及2000μg/ml剂量组则发现肾曲管肿胀,实质细胞水肿,间质充血,由于肿胀造成挤压而使结构模糊不清,内皮细胞肿胀,也有轻度至中度增生,增生的细胞压迫毛细血管,管腔变窄,肾小球血流受阻。
小鼠心肌细胞250μg/ml剂量组无明显变化;500及1
000μg/ml剂量组有较轻的细胞水肿和横纹不清;2000μg/ml
脏/体、肾脏/体系数除250μg/ml剂量组以外,其他染毒组小鼠与对照组相比都有增长的趋势(P<0105,P<0101)。
表3 DEHP染毒60d后对雌性小鼠脏器系数的影响(%,??x±s,n=10)
组别(μg/ml)对照
DEHP250
50010002000
剂量组则发现肌纤维肿胀,横纹不清,部分肌浆溶解,有淤血出现,有的发生肌纤维断裂,有细胞坏死现象。睾丸组织的变
肺脏系数
01706±0103701818±010333
心脏系数
01423±0103901524±01023301516±0103601586±0104005270026
3333
肝脏系数
31423±013831797±013241207±012041071±01294202037
333
肾脏系数
11341±012111310±011911620±012511553±01211566023
3333
化,低、中剂量组无明显病变,高剂量组则有腺管肿胀、挤压在一起,间质充血及各级精母细胞减少等现象。
3 讨 论
333333
11310±0105211380±0104912340066
实验动物在接触外来化合物过程中,有多种因素均可影响其体重的增长,如食欲变化、消化功能变化、代谢和能量消耗变化等。小鼠在接触DEHP过程中所出现的中毒症状如行动迟缓,萎靡不振,被毛疏松无光泽,特别是在1000和2
000μg/ml剂量组有35%的雄性小鼠的尾部和腹部出现严重
注:3P<0105,33P<0101
表4 DEHP染毒60d后对雄性小鼠脏器系数的影响(%,??x±s,n=10)
组别
(μ)
的淤血斑块等,这些症状都有助于探讨DEHP对动物机体的
睾丸系数
11226±0103201889±01213301867±010153311014±01033301849±0102833
心脏系数
01383±0102301507±01028301559±010193301596±010323301487±010173
肝脏系数
21784±012431751±0133341210±01213331855±01193331502±01173
肾脏系数
11303±011111647±0121311678±0123311797±01193311778±012033
肺脏系数
01562±0101101608±01021301727±010323301696±010353301743±0101533
损伤部位及程度。
结果表明,雌、雄性小鼠接触DEHP60d后,其中、高剂量组小鼠的心/体系数、肝/体系数、肾/体系数及肺/体系数增加,雄性小鼠的睾丸/体系数减小,与对照组相比差异有统计学意义(P<0105,P<0101)。且通过镜下观察,发现肝脏有明显的充血现象,肝细胞明显水肿、炎细胞侵润;肾实质细胞水肿,间质充血,肾曲管肿胀;心肌细胞肌纤维肿胀,横纹不清,部分肌浆溶解,有淤血出现,有的发生肌纤维断裂等变化;睾丸组织有腺管肿胀,间质充血等变化,提示DEHP能对小鼠的脏器造成一定程度的损伤。
DEHP可通过多种作用机制在体内多个部位上发挥作
对照
DEHP250
50010002000
注:3P<0105,33P<0101
由表4可见,雄性小鼠接触DEHP60d后,各染毒剂量组小鼠其心脏/体、肝脏/体、肾脏/体、肺/体系数与对照组相比都增加(P<0105,P<0101);而睾丸/体系数则显著减小(P
<0105,P<0101)。
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中国公共卫生2006年5月第22卷第5期 ChinJPublicHealthMay2006Vol.22No.5591
用〔3~6〕,其中某些作用机制之间可能有着紧密联系。如
DEHP诱发自由基链式反应和抑制细胞凋亡可能导致机体损
伤或引发肿瘤,这既反映出DEHP作用机制的复杂性,同时也促使研究者不断改进和完善方法,以便正确的评价DEHP的安全性。
参考文献
〔1〕 张蕴晖.邻苯二甲酸二乙基己酯对环境和生物体的危害[J].国
外医学卫生学分册,2002,29(2):73-77.〔2〕 赵振华.酞酸酯对人与环境潜在危害的研究概况[J].环境科学,
1991,10(3):64-68.
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102-107.〔4〕 DoullJ,CasttleyR,ElcombeC,etal.Acancerriskassessmentofdi
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研究[J].职业与健康,2001,17(9):9-10.
收稿日期:2005208228(宋艳萍编辑 蔡天德校对)
文章编号:100120580(2006)0520591201 中图分类号:R186 :李韶梅1,唐玉环2
哈尔滨市自1984年开始应用A群流脑多糖体疫苗普种
后,流行性脑脊髓膜炎(流脑)发病呈逐年下降趋势,进入20世纪90年代,发病率平均在1/10万以下,呈现出高度散发,未出现周期性流行。为了有效地控制流脑的流行,进一步做好流脑防治工作,现将哈尔滨市1996~2004年流脑流行情况分析报告如下。
材料与方法 (1)疫情资料:来源于哈尔滨市疾病预防控制中心历年法定传染病报告资料;人口资料来自哈尔滨市统计局。(2)方法:应用Excel软件进行统计分析。
结 果 (1)流行强度:1996~2004年全市累计发病285例,年平均发病率为0134/10万;死亡63例,年平均死亡率为
0107/10万,病死率22111%。1996~2004年流脑发病呈高
最小年龄为2个月,<18月龄的儿童112人,发病占
39130%,最大年龄60岁。④职业分布:1996~2004年哈尔
滨市学龄前儿童较多,占5816%;其次为学生,占1712%;第
3位为农民,占1616%。⑤流脑疫苗免疫史:调查285例流脑
病例无免疫史占56184%,有免疫史占22146%,免疫史不详占20170%。
讨 论 我市1952~1984年流脑疫情呈明显的周期性流行规律。每7~10年出现一次流行高峰。1984年我市大量使用A群流脑多糖菌苗,1985年开始全市发病率明显下降。1996~2004年流脑发病主要是以散在为主,未出现周期性流行。流脑疫苗的使用对流脑流行季节没有影响。流脑发病以学龄前儿童为主,高达6114/10万。符合流脑发病以低年龄组人群为主的特征,但流脑发病无免疫史也居多,这主要与部分地区流脑疫苗接种工作不落实,存在免疫空白有关。面临目前流脑的流行状况,为有效控制流脑的发生特提出以
下防治对策:(1)加强流脑流行菌群的监测,以病例进行采样;对健康人群进行人群抗体水平与带菌状况监测,掌握流脑菌群的变迁,对流脑疫情进行预测,以采取针对性的预防措施。(2)进一步加强流脑多糖疫苗的接种工作。我市自1984年开始使用A群流脑多糖疫苗以来,接种程序为:每年冬季统一接种一次,接种对象为1~15岁人群,满1周岁连续接种3年。然后每3年加强接种一次。由于国家没有规定的免疫程序,各地市接种程序不统一。2003年8月规定6~18月儿童基础免疫2针,间隔时间为3个月。3、6、9岁各加强一次。2岁以上儿童和成人建议接种A+C群脑膜炎多糖疫苗,严格掌握禁忌症,一旦出现疫情局部暴发,可对易感人群进行应急接种,同时加强对工地、工矿等民工流动人口集中的场所或部门的流脑防治工作。(3)开展培训与宣传教育,增强广大群众预防流脑的意识,使病人得到早发现、早报告、早诊断、早隔离治疗,并使疫点得到早处理。(4)定期对全市各重点医院进行疫情搜索及监测,防止发生漏报,出现疫情及时采取措施,控制疫情蔓延。(5)抓好降低流脑病死率的工作,具体防治按“三早一就”减少盲目转院,最大限度降低病死率。
收稿日期:2005209220
(蔡天德编校)
度散发,发病率波动在0107/10万~0199/10万,一直维持在历史最低水平,未出现周期性流行。病死率较高的为1999,
2001年,分别为35%及3313%,死亡率最高的为1997,1998
年,分别达到0117/10万,0116/10万。(2)流性特征:①地区分布:全市19个区县均有发病,年发病率居前3位的地区分别为太平区、宾县、依兰县,发病率分别为0171/10万,
0161/10万,0160/10万;年发病率后3位的地区有通河、尚
志、呼兰县,其年平均发病率分别为0105/10万,0109/10万,
0115/10万。市区累计发病93例,平均发病01341/10万;外
县发病192例,平均发病率01337/10万。市县地区发病率差
χ2=0101,P=0192)。②异无统计学意义(时间分布:哈尔滨市流脑全年均有发病,呈现明显的季节性,发病以12月份开始上升,3月份达到发病高峰,5月份开始下降,高峰期为2~
4月份,占全年发病数的64191%。③性别与年龄分布:1996
~2004年流脑病例男性140例,女性145例,男女比为0197∶
1;各年龄组发病情况显示,发病构成居前3位,0岁~,5岁
~、30岁~组,分别为6114/10万,0182/10万,0117/10万,各年龄发病以0岁~组发病率最高,成人发病呈上升趋势。
作者单位:11黑龙江省哈尔滨市疾病预防控制中心,150056;21黑
龙江省阿城市卫生监督所
作者简介:李韶梅(1970-),女,哈尔滨人,副主任医师,本科,主要从
事计划免疫工作。
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