苯扎氯铵贴薄膜过滤无菌检查方法的建立及验证

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翻新时间：2023-08-05

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苯扎氯铵贴薄膜过滤无菌检查方法的建立及验证

摘要：目的：建立苯扎氯铵贴薄膜过滤无菌检查方法。并验证其准确性和可靠性。方法：按照《中国药典》2010年版二部附录XI H无菌检查法项下薄膜过滤法，取10片苯扎氯铵贴做无菌检查。结果：48h内6种阳性菌生长良好。结论：经验证，该方法准确可靠，在本文检验条件下，苯扎氯铵贴可用薄膜过滤法进行无菌检查。

关键词：苯扎氯铵贴薄膜过滤法无菌检查方法验证

1 试验材料与仪器

（4）仪器：生物安全柜，无菌检测隔离器，高压蒸汽灭菌器，电热恒温培养箱，电子天平，集菌培养器。

2 方法

2.1 菌液的制备

取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、大肠埃希菌的新鲜培养物接种至营养肉汤培养基中，34℃培养24小时，取白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基中，26℃培养24小时。上述培养物用0.9%的无菌氯化钠溶液制成小于100cfu/ml的菌悬液，备用；另将黑曲霉孢子悬液用0.9%无菌氯化钠溶液制成小于100cfu/ml，备用。

2.2 方法验证实验组

2.3 方法验证阳性对照组

不加供试品，直接用pH7.0 氯化钠-蛋白胨缓冲液，冲洗程序和冲洗量、加入阳性菌、加入培养基均与“2.2方法验证实验组”项下方法相同。与实验组在相同条件下培养，并逐日观察其结果。

2.4 供试品的无菌检查

2.5 阴性对照组

取冲洗液按薄膜过滤法过滤，冲洗后每个滤筒中加入相应培养基100ml，在相应培养条件下培养，逐日观察其结果。

3 结果与分析

3.1 无菌检查方法的验证

按照文中验证的冲洗量和冲洗方法操作，其结果显示阳性对照组和实验组培养基均在48h内变浑浊，且2组之间在培养时间方面无显著差异，表明苯扎氯铵贴在该条件下无抑菌活性或抑菌活性可以忽略不计。无菌检查方法验证情况，见表1。

3.2 供试品的无菌检查

4 讨论

苯扎氯铵贴无菌检查标准为《国家药品标准》新药转正标准第30册，其对于无菌检查取样量为7片，与现行《中国药典》2010年版标准不同，本文取样量为10贴，经验证在本文检验条件下苯扎氯铵贴可用薄膜过滤法进行无菌检查。