板栗花中β―半乳糖苷酶活性的研究

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翻新时间：2023-02-22

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板栗花中β―半乳糖苷酶活性的研究

摘要：以12种板栗花为试验材料，采用磷酸缓冲溶液提取β-半乳糖苷酶并用分光光度计测定其活性，并测定了“燕胜”品种板栗花中的β-半乳糖苷酶的性质。探知所有品种的板栗花的β-半乳糖苷酶活性在采花后的前9天都呈现先减小后增大的趋势。燕胜板栗花中的β-半乳糖苷酶活性最适温度为40℃，最适pH值为5。

关键词：板栗花 β-半乳糖苷酶活性性质

板栗花（Chinese chestnut flowers）为壳斗科（Fagceae）

1 材料与仪器

2 试验方法

2.3 β-半乳糖苷酶活性的测定取5mmol/L的ONPG溶液2ml置于试管中，并在30℃水浴锅中预热3分钟；然后向试管中加入1ml粗酶液，迅速立即计时，在30℃下反应10min；在上述条件下，A每变化0.001个单位所需的酶量定义为1个酶活力单位。

酶活力（U）=A×1000，式中A：反应前后测定的吸光率之差。

3 结果与分析

3.1 不同板栗花品种中β-半乳糖苷酶在不同储存期间的活性本次试验分别在采花后第1、3、5、7、9天对各品种板栗花进行样品处理和酶活性测定，五次试验结果列入表1。

3.3 板栗花中β-半乳糖苷酶的性质研究

3.3.1 β-半乳糖苷酶的最适温度以燕胜品种的板栗花为样品，为探知其β-半乳糖苷酶的最适反应温度，在pH=5，底物浓度C=5mmol/L时，β-半乳糖苷酶活性随处理温度的变化，具体结果如图1。

图1 β-半乳糖苷酶的活性随处理温度的变化

从图2可以看出，燕胜板栗花中β-半乳糖苷酶的活性随处理温度的变化而变化，在20℃～40℃间它先随处理温度的升高而缓慢增大，在40℃时达到最大，酶活性接近700U，可见适当的提高温度有利于增大β-半乳糖苷酶活性；由此推知，β-半乳糖苷酶的最适温度是40℃。

3.3.2 β-半乳糖苷酶的最适 pH在处理温度T=55℃，底物浓度C=5mmol/L时，β-半乳糖苷酶活性随pH值的变化情况如图2。

由图2可知，β-半乳糖苷酶活性先随pH的增大而增大，在pH=5时达到最大，酶活性数值在600～700U间；之后再随pH的增大而减小，在pH=8时酶活性最小，其数值在400～500U间。由此可知，β-半乳糖苷酶的最适pH为5。

4 结论

4.1 不同品种的板栗花在同时期所测得的酶活性显著不同，同一品种的板栗花在不同时期所测得的酶活性也有明显差异。酶活性变化最大的是“燕龙”，变化最小的是“大青杆”。

5 讨论与展望

β-半乳糖苷酶广泛存在于各种动物、植物及微生物中。对该酶的最初应用是利用其水解乳糖的性质来降低乳制品的乳糖含量。随着生物技术的发展，可获取具有一定优良特性、更高酶活的β-半乳糖苷酶，并对编码该酶的基因结构的深入了解，进一步探讨其反应、作用机制，使得β-半乳糖苷酶不仅在食品工业中的用途越来越广泛，而且在生物技术领域如基因工程、酶工程、蛋白质工程方面都发挥着重要作用，并广泛应用于化学、医药等领域。

参考文献：

[2]王家玉.板栗增雌花减雄花的技术措施[J].林业科技开发，1995，（1）：48-49.

[4]张树政.酶制剂工业[J].北京：科学出版社，1989.156-158.

[7]Ross G S，Redgwell R J，Macrae E A. Kiwi fruit β-galactosidase：Isolation and activity against specific fruit cell wall poly saccharides [J].Planta，1993，189：499-506.