香榧假种皮醇提物抑制植物病原菌活性及乳油制备初步研究

关键词：香榧（Torreya grandis Merrilli）假种皮;乙醇提取物;乳油制剂;抑菌活性;植物病原菌

Antifungal Activities of Ethanol Extracts from Torreya grandis Merrilli Aril and Preparation of Emulsifiable Concentrates

LIU Bin-bin，LI Ying，FAN Jia-qi，WANG Guo-fu，SUN Xiao-hong

（Yuanpei College，Shaoxing University，Shaoxing 312000，Zhejiang，China）

Key words： Torreya grandis Merrilli aril; alcohol extract; emulsifiable concentrates; antifungal activity; phytopathogens

香榧假种皮富含多种活性物质，如黄酮类、二萜类、木脂素类化合物，还有醇、醛、烯、酚等植物芳香物质，某些物质还具有很强的抑菌活性，如木脂素类化合物、烯类化合物等。胡刘岩等[3]研究发现香榧壳挥发油含有大量的柠檬烯、蒎烯等具有抑菌作用的活性成分，这可能是其具有抑菌生物活性的原因。然而关于香榧假种皮提取物抑菌活性的研究报道较为鲜见。

植物病害是农业生产的大敌，而目前防治植物病害的主要手段为施用化学杀菌剂。由于化学农药有潜在危害，研制开发与推广应用安全、高效的生物农药已成为现代农药的主流。从植物中寻找抗菌活性物质是目前开发无公害农药的重要途径之一。本研究在测定香榧假种皮乙醇提取物抗菌活性的基础上，尝试将其制备成环保型乳油，旨在为创制和发展新型植物源农药提供参考。 1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 植物样品 香榧假种皮收集自浙江省绍兴市稽东镇香榧基地，经绍兴文理学院元培学院金自学教授鉴定为Torreya grandis Merrilli 的假种皮，置于阴凉通风处自然阴干。

菌落直径=菌落测量直径-菌饼直径;菌丝生长抑制率=（对照菌落直径-处理菌落直径）/对照菌落直径×100%。

2）乳化剂筛选。弃用农乳系列，选择毒性相对较低的乳化剂。以醇提物浸膏280 mg，以溶剂筛选确定的溶剂2 mL为基础，进行乳化剂筛选。观察所配制剂的外观，以能形成均相透明、乳化性能好的乳化剂入选。

4）乳油分散性检测。将装有500 mL标准硬水的大烧杯置于25 ℃的恒温水浴中，温度平衡后用移液管吸取l mL乳油，离液面1 cm滴下，观察分散性。如能迅速地自动分散，水体变为乳白色透明状，则认为其扩散完全，判定乳油分散性合格。

2 结果与分析

2.1 醇提物对植物病原菌的抑制作用

2.2 醇提物乳油配方筛选结果

2.3 醇提物乳油对植物病原菌的抑制作用

长期以来，香榧假种皮作为废物丢弃，既浪费了资源，又造成了环境的污染。已有研究表明，香榧假种皮富含多种活性成分，具有抑菌以及杀虫生物活性[7，8]。对香榧假种皮采用70%乙醇回流提取活性成分，得到乙醇浸膏，制成不同浓度的溶液，并对其抑菌活性进行了测试。结果表明，不同浓度的醇提物对各供试菌菌丝生长的抑制活性普遍较高，其中对黄瓜枯萎病菌菌丝生长抑制效果最佳，各浓度抑制率均在62%以上。可见，香榧假种皮醇提物抑菌谱较广，且活性较强，具有较好的开发应用前景。同时也证实香榧假种皮含有抑菌活性化合物，具体成分和作用机理有待深入研究。

乳油是农药传统基本剂型之一，与其他农药剂型相比，乳油有效成分含量较高、贮存稳定性好、工艺简单，至今依然是国内和发展中国家主要使用的农药剂型。但由于有机溶剂用量大，容易污染环境，使用率有所下降。选择使用环境友好、生物降解性好、低刺激、高效率的绿色表面活性剂应用于乳油生产，有助于降低助剂对环境、农产品安全的潜在威胁[9]。本研究对香榧假种皮醇提物浸膏分别通过溶剂和乳化剂的筛选、乳油稳定性和分散性的测定，确定最佳配方，制备乳油对其抑菌活性进行测试。结果表明，香榧假种皮醇提物乳油在一定浓度（10 mg/mL）下，对5种供试植物病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用， 且菌丝生长抑制率均高于醇提物。可见， 相同提取物含量的乳油抑菌效果更好。这与田秀玲[10]报道的蛇床子乳油比提取液药效高的结论相符。在开发新型植物源杀菌剂方面，香榧假种皮醇提物具有较大的潜力， 可对其进行深入研究。

参考文献：

[2] 孟鸿飞，金国龙，翁仲源.诸暨市香榧古树资源调查[J].浙江林学院学报，2003，20（2）：134-136.

[3] 胡刘岩，戴妙妙，张S彬.香榧壳挥发油的提取工艺及抗菌性研究[J].食品工业，2011（9）：74-76.

[6] ROMAGNOLI C， BRUNI R， ANDREOTTI E， et al. Chemical characterization and antifungal activity of essential oil of capitula from wild Indian Tagetes patulal[J]. Protoplasma，2005，225：57-65.

[7] 王 鸿，郭 涛，应国清.榧属植物活性成分与药理作用研究进展[J].中草药，2007，38（11）：1747-1750.

[9] 裴 琛，沈德隆，杜 廷.浅谈对传统农药制剂乳油的改进研究[J].浙江化工，2010，41（3）：11-15.