翻新时间:2023-08-15
系统性红斑狼疮患者Fas和CD40L表达的初步研究
作者:徐红星, 邱德华,王慧娟 ,杨晓帆,季晓辉
【关键词】 系统性红斑狼疮;Fas;CD40L
Key words:systemic lupus erythematosus; Fas; CD40L
1 资料和方法
1.3 主要试剂 晶美生物工程有限公司sFas检测试剂盒,Bender MedSystems公司sCD40L检测试剂盒,上海试剂二厂淋巴细胞分离液,GIBCO公司RPMI 1640培养液,eBioscience公司抗人FasL、抗人CD40L阻断性抗体,Caltag公司PE-CY5-抗CD
3、FITC-抗CD
4、FITC-抗CD8荧光标记抗体,eBioscience公司PE-抗CD40L、PE-抗Fas荧光标记抗体。
1.3 方法
1.3.1 sFas、sCD40L的检测 严格按说明书进行操作。结果判断:用MicroReader4酶标仪比色,得到光密度(D)值,以标准品浓度作横坐标,D值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点,通过标本的D值可在标准曲线上查出其浓度。
1.4 统计学处理 数据采用±s表示,样本均数比较采用t检验。相关性检验采用Spearman等级资料进行分析,P<0.05认为差异有显著性。
2 结 果
2.1 SLE患者与正常对照组血清sFas、sCD40L检测结果比较 SLE患者血清sFas、sCD40L水平均明显高于正常对照组(P均<0.0
1),SLE患者血清sFas、sCD40L水平活动期均高于缓解期(P<0.01或P<0.0
5)。见表1。
2.2 SLE患者血清sFas、sCD40L水平与SLEDAI积分的相关性分析及sFas、sCD40L水平之间的相关性分析 sFas、sCD40L与SLEDAI积分之间均存在正相关关系(r=0.6
8
8、r=0.253,P均<0.0
5),sFas与sCD40L水平之间未显示明显相关(r=0.201, P>0.0
5)。表1 SLE患者和正常对照组血清sFas、sCD40L水平与正常对照组比较:*P<0.05;**P<0.01
2.4 SLE患者CD4(+)及CD8(+) T细胞Fas与CD40L表达的相关性比较 SLE患者CD4(+)及CD8(+) T细胞上Fas与CD40L表达均呈正相关关系(r=0.3
1
1、r=0.517,P均<0.0
5)。
2.5 SLE患者CD4(+)及CD8(+) T细胞在抗人FasL抗体及抗人CD40L抗体阻断前后CD40L及Fas表达的比较 SLE患者T细胞培养中加入抗FasL抗体阻断后,CD4(+)和CD8(+) T细胞表面CD40L表达与阻断前比较均明显下降(P<0.0
5);加入抗CD40L抗体阻断后,CD4(+)和CD8(+) T细胞表面Fas表达与阻断前比较差异无显著性(P>0.0
5)。见表3。表3 SLE患者CD4(+)和CD8(+) T细胞在抗人CD40L抗体阻断前后CD40L、FAS 表达的比较与阻断前比较:*P<0.05
3 讨 论
SLE是一种至今病因未明的系统性自身免疫性疾病。近来研究较多的是与自身免疫性疾病关系密切的T细胞表面分子Fas和CD40L,两者在自身免疫性疾病的发生、发展过程中起着极其重要的免疫调节作用。Fas是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的细胞表面分子,其配体是FasL,Fas/FasL参与细胞凋亡过程;CD40L是CD40的配体,属TNF超家族成员,主要存在于活化的CD4(+) T细胞表面,亦少量表达于CD8(+) T细胞﹑B细胞﹑NK细胞﹑单核细胞及血小板表面。表达于B细胞或抗原提呈细胞表面的CD40分子与其配体CD40L间的相互作用构成了一组重要的共刺激信号[6-7]。
研究表明,静止的T细胞表达一定量的Fas,但对凋亡不敏感,当抗原与T细胞受体(TCR)结合后,在静止T细胞被激活而增殖的同时,也启动凋亡,导致涉及凋亡的Fas基因转录增加,Fas表达上调,SLE患者T细胞表面表达的Fas增加[8]。同时有研究表明,SLE患者外周血T、B细胞表面CD40L表达增加,且活化T细胞表达CD40L[9]。说明SLE的发生、发展与凋亡调节分子和共刺激分子的异常密切相关。
最近,Collins等[13]发现,从莱姆病关节炎关节滑液中分离获得的Vdelta1 T细胞高表达FasL,可通过Fas/FasL信号途径作用于不成熟树突细胞(DC)表面的Fas,促进DC的活化和成熟,B细胞在自身抗体持续产生中是否也起类似DC的作用值得深入研究。
迄今为止,尚未见到关于Fas/FasL可上调T细胞CD40L表达的研究报告。本研究的实验则初步提示了这种相互调节的可能。当然,这还需要进一步的深入研究加以证实。
目前SLE的发病机制尚不完全清楚,Fas、CD40L的高表达可能是SLE发病的重要原因,研究Fas及CD40L信号的相互调节可能会为探讨SLE发病机制及药物干预提供新的线索。
【参考文献】
[1] Kotzin BL. Systemic lupus erythematosas [J].Cell, 1996,85
(3):303-306.
[2] 李华,王吉波.细胞凋亡与系统性红斑狼疮[J].山东医药,2005,45
(1
6):80-81.
[6] Yazdany J, Davis J. The role of CD40 ligand in systemic lupus erythematosus [J].Lupus, 2004, 13
(5):377-380.
[7] 杨灏,贺福初,周钢桥.CD40/CD40L轴的生物学功能及其与疾病的关系研究进展[J].国际免疫学杂志,2007,30
(6):384-388.
[8] 张哲,陈勇.系统性红斑狼疮外周血T、B淋巴细胞Fas、FasL表达及凋亡的关系研究[J].中华风湿病学杂志,2005,9
(4):238-240.
[9] 李玉杰,李幼姬,叶任高,等.系统性红斑狼疮外周血单个核细胞CD40L的表达增高[J].中国病理生理杂志,2003,19
(4):514-517.
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