翻新时间:2023-07-23
肇庆特色黄皮果挥发油成分及清除羟自由基能力
黄皮,为芸香科黄皮属植物,主要产于广东、广西、海南、云南、福建等地。黄皮具有较高的药用价值,其根、茎、叶、果实、果皮均可入药,具有消除胸腹胀满、生津、止渴、顺气、镇咳等功效。其中果实不仅香甜可口,性温味辛,具有丰富的营养价值,且能行气消食,润肺生津等,很受人们青睐。近年来,又有研究说明产地和环境气候的不同,各地的黄皮挥发油亦有不同,我们对肇庆特色黄皮果实挥发油成分进行提取和分析,有利于更好探究其药理作用,而探究挥发油对羟自由基清除率的影响则可初步了解其抗氧化性能,对肇庆黄皮在药用方面的开发和利用有重要意义。
1 材料、试剂与仪器
2 实验方法
2.1 挥发油的提取
称取100g新鲜黄皮果,加蒸馏水捣成匀浆,用挥发油提取器进行提取,提取6h后,油水经高速冷冻离心机离心分离初步除水后,再加入少许无水硫酸钠除水后经0.45um滤膜过滤器过滤后得到无色透明的挥发油。
2.2 挥发油成分分析条件
2.2.1 色谱条件
色谱柱RTX-5MS石英毛细管柱(30m*0.25mm*
0.25um);升温程序为60℃,停留5min,再以4℃/min升温至250℃,保留7min;载气为氦气,柱流量为1.5ml/min,进样量1ul,分流比为10:1。
2.2.2 质谱条件
离子源EI源,离子源温度230℃,电子能量70eV,接口温度为230℃,溶剂延迟4min,扫描范围30~600amu。
2.3 羟自由基清除能力研究
2.3.1 各浓度的挥发油溶液的制备
2.3.2 其他溶液的配制
2.3.3 挥发油的羟自由基清除率的测定
用移液枪取9mmol/L硫酸亚铁溶液 1mL、9mmol/L水杨酸-乙醇溶液1mL,不同浓度的样
品溶液1mL,最后加8.8mmol/L过氧化氢1mL启动反应,37℃反应30min;以蒸馏水为参比,在510nm下测定各浓度的吸光度。考虑到样品本身的吸光值,以9mmol/L硫酸亚铁溶液1mL、9mmol/L水杨酸-乙醇溶液1mL,不同浓度的样品溶液1mL和1mL蒸馏水作为样品的本底吸收值,重复做三次,以平均值为测定结果。按下式计算・OH清除率:
A0―空白对照液的吸光度;
Ax―加入样品溶液后的吸光度;
Ax0―不加显色剂H2O2 ,样品溶液本底的吸光度。
3 实验结果
3.1 挥发油得率
采用水蒸气蒸馏法提取肇庆特色黄皮果所得得率为0.4%。
3.2 成分分析
3.3 挥发油对羟自由基清除率的影响
4 分析与讨论
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