论p120ctn 亚型肺癌免疫荧光表达及意义

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翻新时间：2023-08-27

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论p120ctn 亚型肺癌免疫荧光表达及意义

作为连环素家族的新成员，在细胞黏附和信号转导中起着至关重要的作用 [1-4]。材料与方法材料例原发性肺癌及对应癌旁正常肺组织来自2003 年11 月至2004 年9 月在中国医科大学第一附属医院行外科手术切除的新鲜标本。患者术前均未接受过放化疗。标本取出后立即放入-70℃冰箱保存备用。其中男37 例，女13 例，平均年龄59 岁（32-78 岁）。按年WHO 肺肿瘤组织学分类标准[8]，鳞癌15 例，腺癌35 例；高分化12 例，中分化23 例，低分化15 例；有淋巴结转移22 例，无淋巴结转移28 例。依据国际抗癌联盟(UICC)1999 年修订的肺癌p-TNM 分期标准[9] ：Ⅰ期13 例，Ⅱ期10 例，Ⅲ期27 例。

方法冰冻组织切片和免疫荧光染色观察取新鲜肺癌和癌旁正常肺组织标本 OCT 包埋，快速冷冻后制成5μm 厚的切片，贴附于涂有多聚赖氨酸的载玻片上，冷丙酮固定10min 后晾干备用。从新鲜肺癌和癌旁正常肺组织标本中取0.125cm3 左右大小的组织块，加入500μL 裂解液中冰浴下匀浆，4℃静置24h，低温高速离心（4℃、13000 转/分、30min），收集上清。中国硕士论文网为您提供公共管理硕士论文。

用考马斯亮兰法，以牛血清蛋白作为标准进行蛋白定量，计算各样品蛋白浓度。统计分析利用 SPSS for Window 11.5 进行统计分析。p120ctn 及其亚型在正常支气管上皮和癌中表达的关系采用Wilcoxon 符号检验, p120ctn 及其亚型表达与临床病理因素的关系采用秩相关检验，P＜0.05 有统计学意义。

结果免疫荧光结果在癌旁正常肺组织中的支气管上皮细胞胞膜上强表达，呈现完整、连续的红色强荧光，而在肺癌细胞中p120ctn 的膜荧光表达明显减弱，呈现不连续或缺失，并可出现胞浆表达（图1）。对Western Blot 图像结果的分析表明，包括1 和3 亚型在内的p120ctn 总蛋白在癌旁正常肺组织中的表达明显高于肺癌组织(P＜0.001，n=

50)。p120ctn 的亚型1 和亚型3 在癌组织中的表达均有不同程度的缺失或减弱（P=0.001，n=50；P＜0.001，n=

50)。亚型1 的缺失与各临床病理因素无关,而亚型3 的表达缺失与淋巴结转移呈负相关（P=0.005，n=50，r=0.397），与其他临床病理因素无关（表1）。目前，p120ctn 在细胞黏附过程中的确切作用机制存在着很大争议[18,19]，其中原因之一就是由于p120ctn 具有多种亚型的存在，并且这些亚型的表达具有组织特异性[19-21]。由于这些剪切方式只影响到N-端和C-端，其间的犰狳重复序列并未受到干扰，因而，它可以保持完整结构从而与E-cadherin 相连[18,19]。通过这种结合方式，p120ctn 的各种亚型都可以与E-cadherin 结合，进而对E-cadherin 复合体介导的细胞黏附进行调节。但关于p120ctn 各亚型的具体生物学功能及确切作用机制至今仍不清楚。尽管在人类正常组织中，可检测到四种p120ctn 亚型[20]，但我们检测了癌旁正常肺组织后发现，只在120KD 和100KD 处检测到两条特异性的条带，对应其位置相当于p120ctn 的

1、3 两种亚型，并没有检测到明确的和4 亚型的表达。这一结果提示，p120ctn 亚型1 和亚型3 在肺组织内有较好的特异性表达。从我们的实验结果可以看出，在癌旁正常肺组织中p120ctn 主要以亚型1 和亚型3 的表达为主，在肺癌组织中这两种亚型可以出现不同程度的缺失或减弱。并且它们各自的缺失程度可能对癌细胞的恶性表型有不同的影响：亚型1 的表达缺失可能会促进癌细胞的恶性表型，而亚型3 的表达缺失很可能会抑制癌细胞的恶性表型。那么在肺癌组织中，p120ctn 浆表达是否与亚型3 的表达具有一致性呢？亚型1 和3 的表达在影响癌细胞恶性表型方面究竟怎样发挥各自的生物学功能呢？这些还需要我们去做更深层的研讨。

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