鸡内金与鸭内金的电泳法鉴别

上传者：刘火林
|
上传时间：2015-04-21
|
密次下载

鸡内金与鸭内金的电泳法鉴别

时珍国医国药"##$年第$"卷第2期

##$fgH,$"cg,2HOC‘Oa‘bcJbKOdOcbZcKJZeb/OZJbKOdZ/bCbZ/d‘"

鸡内金与鸭内金的电泳法鉴别

沈琴华

江苏省常州市药品检验所)

"$-##-*

摘要!目的!建立鸡内金与鸭内金的鉴别方法.方法!采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法+比较二者电泳图谱.结果!二者的电泳图谱有

明显差异+易于区别.结论!实验谱带清晰+重现性好+可作为鉴别鸡内金和鸭内金的可靠方法.

关键词!聚丙烯酰胺凝胶电泳’鸡内金’鸭内金’鉴别

中图分类号!文献标识码!文章编号!"0",&$##0%#0#&)"##$*#2%#&$"%#$/1

鸡内金为常用中药+其来源为雉科动物家鸡的干燥沙囊内壁.具消积滞3健脾胃等功效+临床用于消食积胀满3呕吐反胃3泻痢疳积等证.临床用量较大+常因货源缺而用鸭的沙囊内壁混充鸡内金的情况+二者性状相似+较难区别.本文采用了聚丙烯酰胺凝胶电泳法对二者进行了电泳分析+以达到识别鸡内金的目的.

!实验材料!"!药材经生物学鉴定的雉科动物家鸡4566789:;<8=>?781@AB

CDE和鸭科动物鸭FG589:;<8=>5?H,的干燥沙囊内壁.!"#仪器电泳仪+国产IJKLMNO

型精密稳流稳压电泳仪+附圆盘电泳槽+玻璃管为$$#PPQ&PP’0#M"型离心机+上海手术器械厂.

!"$试药丙烯酰胺)化学纯*+

临海化学厂’四甲基乙二胺+上海前进试剂厂’过硫酸铵)分析纯*+宜兴第二化学试剂厂’甘氨酸+湖州生物化学厂’亚甲基双丙烯酰胺+常州生物化学厂提供’蔗糖+广州化学试剂厂’考马斯亮兰/"&#+北京化工厂进口分装’其它试剂均为分析纯.

#实验方法

#"!供试品的制备称取鸡内金与鸭内金各$R+

加入生理盐水2PS+研磨成匀浆状+然后转移至离心管中+以T###@UPAE离心$#PAE+取上清液+加$U"体积丙酮+以T###@UPAE离心$#PAE+上清液置冰箱中备用.

#"#聚丙烯酰胺凝胶管的制备按文献V

方法制备分离胶3浓缩胶3聚合完成后用滤纸小心吸干水层备用.

#"$加样%电泳用微量注射器吸取上述供试液各-#XS

+注入到已制备好的样品槽中+各槽分别加入少量T#Y的蔗糖溶液+将电泳槽前后两槽注满电极缓冲液+向前槽缓冲液中加入两滴溴酚蓝示踪指示剂.接通电源+电泳开始时+电流控制在$#PZ+样品进入分离胶面时+电流加大到"#PZ+待示踪指示剂行至距末端$[P时+停止电泳+整个电泳过程需要-\左右.

#"&固定与染色电泳完毕+按文献方法取出胶条+浸入含有"#Y甲醇和]Y醋酸的#,$Y的考马斯亮蓝水溶液中+

染色$\左收稿日期!"##$%#$%#&’修订日期!"##$%#"%$(

作者简介!沈琴华)$(&$%*+女)汉族*+浙江萧山人+现任江苏省常州市药品检验所副主任药师+

主要从事药品生物测定工作,&$"

右+再用"#Y甲醇和]Y的醋酸水溶液脱色+

至背景清晰后取出.#"’谱带区域划分将电泳谱带根据染色深浅分为三级.色深明显而集中的为一级带’色浅但较明显的为二级带’色浅但仍可分辨者为三级带.电泳谱依据迁移率的大小+划分为Z+1两区./^值小于或等于#,T的为Z区+大于#,T的为1区.$结果与讨论

实验结果表明+鸡内金与鸭内金的电泳图谱有明显差异)见图$*.鸡内金共有0条谱带+主要谱带集中在Z区)T条一级带+$条三级带*+1区为-条谱带)"条二级带+$条三级带*.鸭内金共有&条谱带+而主要谱带集中在1区+均为一级带+Z区具有"条三级带.因此+根据其主要谱带分布的区域以及谱带的数目+可以很容易将鸡内金与鸭内金区别开来.

内容需要下载文档才能查看

区

$图,鸡内金",鸭内金$凝胶电泳图谱

本实验谱带清晰+重现性好+结果可以保存+可作为鉴别鸡内金与鸭内金的可靠方法.

参考文献!

V$W中国科学院上海药物研究所,

中草药有效成分提取与分离+第"版VJW

,上海!上海科学技术出版社+$(0-!$#-,