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医学分子生物学(MedicalMolecularBiology)

上传者:刘宪
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上传时间:2015-04-21
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医学分子生物学(MedicalMolecularBiology)



+ +
4 dNTP + + + +
ddNTP ddATP ddGTP ddCTP ddTTP
Klenow + + + +
Buffer ion + + + +
4

CTAGGGA
CTAGGGACTCA
CTAGGGACTCATCA
CTAGGGACTCATCAGTG
5` 3`
3`
3`
3`
5`
5`
5`
dATP dGTP
dCTP dTTP
ddATP
GATCCCTGAGTAGTCAC
CTAG-OH
3` 5`
5`
3`
A
Klenow

A
A
A CTAGGGA
3`
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3`
CTAGGGACTCATCA
CTAGGGACTCATCAGTG
marker A
A

CTAGG
CTAGGG
CTAGGGACTCATCAG
CTAGGGACTCATCAGTG
5` 3`
3`
3`
3`
5`
5`
5`
dATP dGTP
dCTP dTTP
ddGTP
GATCCCTGAGTAGTCAC
CTAG-OH
3`
5`
5`
3`
G
Klenow

G
G
G
CTAGG
3`
CTAGGG
3`
CTAGGGACTCATCAG
CTAGGGACTCATCAGTG
marker G
G
G

CTAGGGAC
CTAGGGACTC
CTAGGGACTCATC
CTAGGGACTCATCAGTG
5` 3`
3`
3`
3`
5`
5`
5`
dATP dGTP
dCTP dTTP
ddCTP
GATCCCTGAGTAGTCAC
CTAG-OH
3`
5`
5`
3`
C
Klenow

C
C
C CTAGGGAC
3` CTAGGGACTC
3`
CTAGGGACTCATC
CTAGGGACTCATCAGTG
marker C
C

CTAGGGACT
CTAGGGACTCAT
CTAGGGACTCATCAGT
CTAGGGACTCATCAGTG
5` 3`
3`
3`
3`
5`
5`
5`
dATP dGTP
dCTP dTTP
ddTTP
GATCCCTGAGTAGTCAC
CTAG-OH
3`
5`
5`
3`
T
Klenow

T
T
T CTAGGGACT
3`
CTAGGGACTCAT
3`
CTAGGGACTCATCAGT
CTAGGGACTCATCAGTG
marker T
T

T
T
T
C
C
C
G
G
G
G
A
A
A
4
5
6
7
8
9
10
11
12
14
15
16
17
marker T A G C

GATCCCTGAGTAGTCAC
3`
5`
5` 3` CTAGGGACTCATCAGTG

DNA
1
1 M13
2 pUC
2
15~30bp

DNA
DNA
DNA

4
[
35
S]-dATP
5 DNA
1 Klenow
2 sequenase)
2.0
3 TaqDNA

DNA
1
DNA
DNA

1 2 3 4 5
1 2
2 3
2 3 4
3 4 5

2
+
5` 3`
1

2 Ⅲ

SⅠ

3
T4DNA

4

3
4

Maxam-Gilbert

Maxam Gilbert
Maxam Gilbert 1977
DNA
1
DNA 3` 5`
2 DNA

G
G+A
C+T
C
G
G A
C T
C

4
DNA
4
DNA
DNA

3
4
DNA
5`-GATCACTACGT-3`
5`- GATCACTACGT-3`

5`- GATCACTACG
5`- G
G
G
5`- GATCACTACGT-3`
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
G
G
marker

5`- GATCACTACG
5`- GATCACTA
5`- GATCA
5`- GA
5`- G
G+A
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
5`- GATCACTACGT-3`
G+A
G+A
G+A
G+A
G+A
G
+
A
marker

5`- GATCACTACGT
5`- GATCACTAC
5`- GATCACT
5`- GATCAC
5`- GATC
5`- GAT
C+T
5`- GATCACTACGT-3`
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
C+T
C+T
C+T
C+T
C+T
C+T
C
+
T
marker

5`- GATCACTAC
5`- GATCAC
5`- GATC
C
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
5`- GATCACTACGT-3`
C
C
C
C marker

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
C
+
T
G
G
+
A
C
G
A
T
C
A
C
T
A
C
G
T
marker
5`- GATCACTACGT-3`

Maxam Gilbert
1
DNA
2 G+C DNA
3 5` 3`
DNA

DNA
1 PCR
2
3
DNA

Nucleic acid
hybridization



1
2
3
4
5
6


DNA
denaturation
1

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