高热量高蛋白饮食诱导GK大鼠糖尿病肾病模型的建立

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高热量高蛋白饮食诱导GK大鼠糖尿病肾病模型的建立

２０１２年４月

第２２卷第４期中国比较医学杂志ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＣＯＭＰＡＲＡＴＩＶＥＡｐｒｉｌ，２０１２ＭＥＤＩＣＩＮＥＶ０１．２２Ｎｏ．４

高热量高蛋白饮食诱导ＧＫ大鼠糖尿病

肾病模型的建立

徐孝平１’２，寿旗扬２，陈方明２，周卫民２，蔡月琴２，陈民利２

（１．浙江大学动物科学学院，杭州３１００２９；２．浙江中医药大学动物实验研究中心，杭州３１００５３）

【摘要】目的运用高热量高蛋白饮食诱导ＧＫ大鼠２型糖尿病肾病模型的建立，并探讨其可能的作用机制。方法２８周龄ＧＫ大鼠２４只，随机分成对照组、模型组，每组各１２只，模型组给予高热量高蛋白饮食，对照组给予正常饮食，共８周。于第０、４、８周观察２４ｈ尿微量白蛋白、２４ｈ尿蛋白、尿肌酐、尿微量白蛋白／尿肌酐比值水平；于第０、８周观察牢腹血糖和血清肌酐、尿素氮、总胆同醇、甘油三脂、一氧化氮水平；实验结束时取双肾称重并计算肾肥大指数，取肾组织观察病理形态学变化，检测肾组织钠钾ＡＴＰ酶活性。结果

２４与对照组比，模型组大鼠ｈ尿微量白蛋白、２４ｈ尿蛋白、尿微量白蛋９３／尿肌酐比值、空腹血糖、总胆同醇、甘油三脂、一氧化氮、肾肥大指数水平和肾组织钠钾ＡＴＰ酶活性显著提高，模型维肾小球体积增大，系膜基质增生，基底膜增厚明显。结论运用高热量高蛋白饮食诱导ＧＫ大鼠可成功建立２型糖旅病肾病模型。血糖血脂的上升是糖尿病肾病形成的重要因素，同时钠钾ＡＴＰ酶活性增强进一步损伤肾小管功能，一氧化氮升高促使肾小球高灌注、高滤过，也是加速ＧＫ大鼠肾病形成的原因。

【关键词ｌ２型糖尿病肾病；ＧＫ大鼠；高热量高蛋白饮食

【文献标识码】Ａ【中图分类号】Ｒ３３【文章编号】１６７１－７８５６（２０１２）０４－００５３－０５

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１．７８５６．２０１２．０４．０１３

ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆａＧＫＲａｔＭｏｄｅｌｏｆＤｉａｂｅｔｉｃＮｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ

ＩｎｄｕｃｅｄｂｙＨｉｇｈ－ＣａｌｏｒｉｅａｎｄＨｉｇｈ－ＰｒｏｔｅｉｎＤｉｅｔ

Ｑｉ．ｙａｎｇｚ，ＣＨＥＮＷｅｉ－ｍｉｎ２，ＣＡＩＹｕｅ－ｑｉｎ９２，ＣＨＥＮＭｉｎ－ｌｉ２ＸＵＸｉａｏ—ｐｉｎ９１?２，ＳＨＯＵＦａｎｇ—ｒｕｉｎ９２，ＺＨＯＵ

（１．ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００２９，Ｃｈｉｎａ；

２．ＺｈｅｊｉａｎｇＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００５３）

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ

ｔｏＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａＧＫｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｍｐａｔｈｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｉｇｈ—ｃａｌｏｒｉｅａｎｄｒａｔｓｗｅｒｅｈｉｇｈ－ｐｒｏｔｅｉｎｄｉｅｔ，ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｉｔｓｐｏｓｓｉｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｏｎ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｔｏｔａｌｏｆ２４２８一ｗｅｅｋｏｌｄＧＫ

ｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐａｎｄｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，１２ｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｎｏｒｍａｌｇｉｖｅｎｎｏｒｍａｌｄｉｅｔｗｈｉｌｅｔｈｅ

ｗｅｒｅｍｏｄｅｌｒａｔｓｗｅｒｅ

ａｔｆｅｄａｈｉｇｈ—ｃａｌｏｒｉｅａｎｄｈｉｇｈ—ｐｒｏｔｅｉｎｄｉｅｔｆｏｒ８ｗｅｅｋｓ．２４ｈ－Ｕ?ＡＬＢ，２４ｗｅｒｅｈ－Ｕ－ＴＰ，Ｕｅｒ，Ｕ—ＡＬＢ／Ｕｃｒｒａｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｗｅｅｋ０。４，ａｎｄ８．ＦＢＧ，Ｓｃｒ，ＢＵＮ，ＴＣ，ＴＧ，ＮＯ

ｔｗｏｍｅａｓｕｒｅｄａｔｗｅｅｋ４ａｎｄ８．Ｔｈｅｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ８ｗｅｅｋｓｌａｔｅｒ，ａｎｄｔｈｅ

ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｋｉｄｎｅｙｓｏｆｅａｃｈｒａｔｗｅｒｅｔａｋｅｎａｎｄｗｅｉｇｈｅｄｔｏｃａｌｃｕｌａｔｅｔｈｅｋｉｄｎｅｙｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｉｎｄｅｘ．ＴｈｅｒｅｎａｌｗａｓｗｅｒｅｅｘａｍｉｎｏｄａｎｄｔｈｅＮａ＋Ｋ’－ＡＴＰａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｒｅｎａｌｔｉｓｓｕｅｄｅｔｅｃｔｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅ２４ｈ－Ｕ－［基金项目】浙江省科技厅实验动物计划项目（编号：２００９Ｆ８００２１）。

［作者简介Ｊ徐孝平（１９７８一），男，实验师．研究方向：实验动物与比较医学。Ｅ－ｍａｉｌ：”，ｐＯＯＯｌ＠１２６．ｃｏｒｎ。［通讯作者】陈民利（１９６３一），女，教授，研究方向：实验动物与比较医学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｉｎｌｉｅｈｅｎＯ！＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｃｎ。

中国比较医学杂志２０１２年４月第２２卷第４期ＣｈｉｎＪＣｏｍｐＭｅｄ．Ａｐｒｉｌ２０１２。Ｖ０１．２２．Ｎｏ．４

ＡＬＢ。２４ｈ－Ｕ?ＴＰ。Ｕ?ＡＬＢ／Ｕｃｒ，ＦＢＧ，ＴＣ，ＴＧ，ＮＯ，ｋｉｄｎｅｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｍａｔｒｉｘ

ｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｒａｔｓ．Ｔｈｅｙｓｈｏｗｅｄ

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ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｉｎｄｅｘａｎｄＮａ＋Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ

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ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙｉｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙⅡｈｉｇｈ?ｃａｌｏｒｉｅａｎｄｈｉｇｈ—ｐｒｏｔｅｉｎｄｉｅｔ．Ｔｈｅｒｉｓｅｉｎｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｓｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ

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ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ｂｅｓｉｄｅｓ。ｉｎｃｒｅａｓｅｄａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＮａ’Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅｆｕｒｔｈｅｒｄａｍａｇｅｓｔｈｅ

ｌｅａｄｓ

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ＩＯ

ｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｒｅｎａｌｔｕｂｕｌｅｓ．ＴｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｄＮＯａｃｃｅｌｅｒａｔｅｔｈｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙｉｎＧＫ

ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｈｙｐｅｒｐｅｒｆｕｓｉｏｎ

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ｗｏｒｄｓ】Ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ；ＧＫｒａｔｓ；Ｈｉｇｈ—ｃａｌｏｒｉｅａｎｄｈｉｇｈ?ｐｒｏｔｅｉｎｄｉｅｔｓ

糖尿病肾病（ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）是糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ，ＤＭ）常见的微血管并发症，是由于ＤＭ引起的肾小球基底膜增厚，系膜扩张以及胞外基质增生，导致肾小球的高滤过和蛋白尿…。２０１０版《中国２型糖尿病指南》指出目前我国２０岁以上的成人ＤＭ的患病率在９．７％，而２型ＤＭ约占到９５％，２００１年国内住院患者同顾分析显示２型ＤＭ并发ＤＮ的患病率为３４．７％，因此对２型ＤＮ的发病研究成为目前的热点之一。目前国内外研究建立的２型ＤＮ模型主要是应用小剂量链脲佐菌素（ＳＴＺ）加高脂饮食诱导，存在着造模时间长，模型稳定性不足等问题。ＧＫ大鼠是１９７５年由Ｇｏｔｏ等人选育的与人类２型ＤＭ近似的自发性非肥胖２型糖尿病鼠种【２Ｊ，目前已有一些针对ＧＫ大鼠肾脏改变的研究，但还存在着发病时间晚、症状不够明显的问题。３。ｊ。研究表明，由胰岛素代谢障碍而致长期高血糖是ＤＮ发生的最关键原因¨１，饮食蛋白过高是糖尿病肾病的危险因素¨１，脂代谢紊乱亦是ＤＭ和ＤＮ发生的一项独立的危险因素…。本实验通过给予ＧＫ大鼠高热量高蛋白饮食，诱发ＧＫ大鼠形成高血脂高血糖，高蛋白尿，以期加快ＧＫ大鼠形成２型ＤＮ模型，并探讨其可能的作用机制。１材料和方法１．１实验动物

清洁级雄性ＧＫ大鼠２８只，２８周龄，由上海斯莱克实验动物有限公司提供［ＳＣＸＫ（沪）２００７—

０００５］，饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心

屏障动物实验设施［￥ＹＸＫ（浙）２００８—Ｏｌｌ５］，室温（２３±２）℃，相对湿度６０％一７０％。１．２试剂

尿微量白蛋白（Ｕ．ＡＬＢ）检测试剂盒、尿蛋白（Ｕ．ＴＰ）检测试剂盒、肌酐（Ｃｒ）检测试剂盒、尿素氮（ＢＵＮ）检测试剂盒、血糖（ＧＬＵ）检测试剂盒、总胆固醇（ＴＣ）检测试剂盒、甘油－－Ｊｌ旨（ＴＧ）检测试剂盒

由上海申能．德赛诊断技术有限公司提供：钠钾ＡＴＰ酶（Ｎａ＋Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ）检测试剂盒、一氧化氮（ＮＯ）检测试剂盒由南京建成生物工程研究所有限公司提供。

１．３实验仪器

７

０２０全自动生化分析仪（日本日立）。ＢＴ．８１５Ａ

半自动生化分析仪（上海三科仪器有限公司），ＡＧ２０４电子分析天平（瑞士Ｍｅｔｔｌｅｒ），ＨＭ３３５Ｅ型轮转切片（德国Ｍｉｃｒｏｍ），染色机（德国Ｌｅｉｅａ），ＡＰ２８０组织包埋机（德国Ｍｉｃｒｏｍ），脱水机（德国Ｍｉｃｒｏｍ），显微镜（德国Ｚｅｉｓｓ）。１．４实验方法

１．４．１实验分组及２型ＤＮ模型的建立：动物随机分成模型组、对照组，每组各１２只。模型组给予高热量高蛋白饲料（饲料组成：基础饲料５９．７５％，酪蛋白１９％，猪油１０％，蔗糖１０％，胆困醇ｌ％，３号胆盐０．２５％，蛋白质：脂肪：碳水化合物热量比为２８．３：２８．３：４４．３）；对照组给予基础饲料（蛋白质：脂肪：碳水化合物热量比为２４．６：１２．５：６２．９），由浙江省医学科学院配制提供，共饲养８周。根据Ｍｏｇｅｎｓｅｎ一１对ＤＮ的分期标准判定ＧＫ大鼠糖尿病肾病的发生。

１．４．２指标观察；

１．４．２．１

动物一般状况：每日观察大鼠饮食饮水、

精神状态、活动情况、大便性状、每周测体重并记录。１．４．２．２尿液生化指标：各组于第０、４、８周上代谢笼，测定２４ｈ尿量，并取尿液离心取上清液检测Ｕ—ＡＬＢ、Ｕ．ＴＰ、Ｕ．Ｃｒ水平，并计算２４ｈＵ．ＡＬＢ、２４

ｈＵ．

ＴＰ、Ｕ－ＡＬＢ／Ｕ－Ｃｒ比值。

１．４．２．３血液生化指标：各组于第０、８周，禁食不禁水１０ｈ，取血分离血清，检测空腹血糖（ＦＢＧ）和血清肌酐（Ｓｃｒ）、ＢＵＮ、ＴＣ、ＴＧ、ＮＯ水平。ＮＯ采用硝酸还原酶法测定，使用半自动生化仪检测。

１．４．２．４肾重指数：各组大鼠称取体重，末次取血后，取双侧肾脏，去除肾包膜，称重，计算肾重指数，

中国比较医学杂志２０１２年４月第２２卷第４期ＣｈｉｎＪＣｏｍｐＭｅｄ．Ａｐｎｌ２０１２．Ｖｏｌ２２

Ｎｏ４

５５

肾重指数＝双侧肾重／体重‰。

１

与对照组相比，模型组的第０周２４ｈ－Ｕ—ＡＬＢ水平、２４

４．２．５组织病理学指标：肾组织用４％中性甲醛

ｈ—ｕ邪水平和Ｕ－ＡＬＢ／Ｕ?Ｃｒ比值差异无显著

溶液固定２４ｈ后，乙醇脱水，石蜡包埋，切片，进行ＨＥ染色和ＰＡＳ染色，光镜下观察肾组织病理学变化，根据Ｔｅｒｖａｅｒｔ等“”发布的ＤＮ病理分型标准判断ＧＫ大鼠肾脏的病变程度。１．５数据处理及统计

所有数据均采用ＳＰＳＳ

１８

性（Ｐ＞０．０５），第４、８周时各指标水平都显著升高（Ｐ＜０叭）；与第０周相比，模型组大鼠第４、８周２４

ｈ

Ｕ－ＡＬＢ水平、２４ｈ－Ｕ－ＴＰ水平和Ｕ—ＡＬＢ／Ｕ－Ｃｒ比值

ｈ－Ｕ—

显著升高（Ｐ＜００１），对照组大鼠第４、８周２４

ＡＬＢ水平显著升高（Ｐ＜０．０１），２４ｈ－Ｕ—ＴＰ水平无显

０软件进行统计，用

著差异（Ｐ＞０．０５），Ｕ—ＡＬＢ／Ｕ—Ｃｒ比值水平显著升高（第４周Ｐ＜０．０５，第８周Ｐ＜０．０１）。见图１。

２．３

均数±标准差（ｉ±ｓ）表示，组问比较采用ｆ检验，以Ｐ（０．０５作为差异显著性界值。２结果

２．１一般观察和体重变化

两组大鼠在实验过程中均未有死亡，对照组动物精神状况略优于模型组，模型组大鼠体重增长略快于对照组．但差异未有显著性（Ｐ＞０．０５）。见表１。

２．２

２４

肾肥大指数和肾组织钠钾ＡＴＰ酶活性的比较与对照组相比，模型组大鼠肾肥大指数显著升

高（Ｐ＜０．０１），模型组大鼠肾组织钠钾ＡＴＰ酶活性显著升高（Ｐ＜０．０１）。见图２。

２．４空腹血糖、一氧化氯、肾功能、血脂水平的变化

与对照组相比，模型组第０周的ＦＢＧ、ＮＯ、Ｓｃｒ，ＢＵＮ、ＴＣ、ＴＧ水平差异无显著性（Ｐ＞０．０５），第８周的ＦＢＧ、ＮＯ、ＴＣ、ＴＧ水平差异有显著性（Ｐ＜０．０１），

ｈ屎微量白蛋白、２４ｈ尿蛋白、尿微量白蛋

Ｓｃｒ、ＢＵＮ水平差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；与第０周相比，模型组第８周的ＦＢＧ、ＮＯ、ＴＣ、ＴＧ水平差异有

白与尿肌酐比值的动态变化

垂

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０周

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８周

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８周

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时间ＩＴｉｍ

时阃ＩＴｉｎ

固１两组大鼠２４ｈ尿微量自蛋白、２４ｈ尿蛋白、尿微量白蛋白与尿肌酐比值的动态变化

Ｆｉｇ．１

Ｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｏｆ２４ｈ－Ｕ—ＡＬＢ

２４ｈ－Ｕ．ＴＰａｎｄＵ－ＡＬＢ／Ｕｅｒｉｎｔｈｅ

Ｏｌ

ｔｗｏ

ｇｒｏｕｐｓｏｆ

ｒａｔｓ

注：与对照组比较，“Ｐ＜０Ｏｌ：与第０周比较，６Ｐ＜００５，¨Ｐ＜０

Ｎｏｔｅ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，“Ｐ＜Ｏ０Ｉ；Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｗｅｅｋ０，Ｐ＜００５，６６Ｐ＜０．０１

ｔ直餮曲

圈２两组大鼠肾肥大指数和肾组织钠钾ＡＴＰ酶活性的比较

Ｆｉｇ．２

Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｋｉｄｎｅｙ

口口

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ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｉｎｄｅｘａｎｄ

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Ｎａ＋Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓｏｆ

注：与对照组比较，”Ｐ＜０们．

Ｎｏｔｅ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．“Ｐ＜０．０１

５６中固比较医学杂志２０１２年４月第２２卷第４期ＣｈｉｎＪＣｏｍｐｌ～ｌｅｄ，Ａｐｒｉｌ２０１２，Ｖ０１．２２．Ｎｏ．４

显著性（Ｐ＜０．０１），５ｅｒ、ＢＵＮ水平差异无显著性（Ｐ＞０．０５），对照组第８周的ＮＯ水平差异有显著性（Ｐ＜０．０１），其余指标水平差异均无显著性（Ｐ＞０．０５）。见表１。

２．５肾脏组织病理变化

ＨＥ染色结果显示，对照组大鼠肾脏结构清晰，肾小球未见明显增大，系膜细胞未见明显增多，模型组大鼠肾脏体积增大，肾小球囊腔狭窄，球内细胞增多，可见部分肾小管成上皮管型。ＰＡＳ染色结果显示。对照组大鼠肾小球系膜基质稍增多，基底膜增厚，模型组大鼠肾小球基底膜明显增厚，系膜区增宽，ＰＡＳ染色阳性区域成团块状。根据Ｔｅｒｖａｅｒｔ等发布的ＤＮ病理分型标准，对照组大鼠肾脏病变有９例为Ｉｌａ型、３例为ＩＩｂ型；模型组大鼠肾脏病变有２例为ＩＩａ型、９例为ｌｉｂ型、１例为ＩＩＩ型（图３，见彩插６）。３讨论

ＤＮ发病机制比较复杂．至今尚不完全清楚，除遗传因素、高血糖相关代谢紊乱以外，还与血脂异常、饮食中蛋白和脂肪摄入的数量、高血压、精神等多因素有关…１。研究２型ＤＮ需先建良好的２型ＤＭ模型，目前国内常用小剂量ＳＴＺ加高脂饮食诱导２型ＤＭ，国外２型ＤＭ研究多采用具有自发性糖尿病倾向的近交系动物，如ｄｂ／ｄｂ小鼠、ＯＬＥＴＦ大鼠、肥胖型Ｚｕｋｅｒ大鼠、ＧＫ大鼠等。小剂量ＳＴＺ加高脂饮食诱导的２型ＤＮ模型忽略了ＤＮ发病的遗传因素，还存在造模时间偏长，稳定性不足的问题；通过自发生２型ＤＭ模型引起２型ＤＮ，只考虑遗传因素在发病过程中的主导作用，这与临床并不完全相符，且成模时间也长。

ＧＫ大鼠主要表现为胰岛素分泌受损，葡萄糖负荷后胰岛素释放异常，肝脏、肌肉和脂肪组织中度胰岛素抵抗等。ＧＫ大鼠的血糖随着年龄增长而升高，继而出现肾脏结构和功能的改变，肾脏组织学改变主要包括肾小球基底膜增厚，肾小球膜基质增多，肾小球增生等¨Ｊ，在长期糖尿病后，ＧＫ大鼠出现肾小球肥大，局灶性肾小球硬化，肾小管间质纤维化，炎症细胞浸润等形态学变化¨“。但目前的研究显示，ＧＫ大鼠的高血糖因素在主导糖尿病肾病发展上存在着发病时间晚，症状不够明显的问题。本实验通过运用ＧＫ大鼠，结合ＤＮ发病过程中遗传因素、长期高血糖、饮食蛋白和脂肪摄入等各种因素，以期建立更与人类疾病相似的２型ＤＮ模型。

本实验发现，８周后模型组大鼠ＦＢＧ、ＴＧ、ＴＧ水平显著高于对照组，模型组的２型糖尿病症状更加明显。临床上以２４ｈ—Ｕ—ＡＬＢ作为早期诊断Ｄｒｑ的金指标，目前的研究表明Ｕ—ＡＬＢ／Ｕ．Ｃｒ比值亦有很高的诊断价值¨…，本实验发现，模型组２４

ｈ．Ｕ．ＡＬＢ、

Ｕ－ＡＬＢ／Ｕ－Ｃｒ比值、２４ｈ—ｕ—ＴＰ亦显著高于对照组，且随着实验时间的延长而加重，ｌＶｌｏｇｅｎｓｅｎ的ＤＮ分期标准指出，尿白蛋白排泄率（ｕＡＥ）在３０～３００ｍｅ／

２４

ｈ为早期ＤＮ期，ｕＡＥ＞３００

ｍｇ／２４

ｈ为显性ＤＮ

期，按体重折算成大鼠这两期ｕＡＥ指标分别为０．２

—２ｍｇ／２４ｈ和２ｍｇ／２４

ｈ，结果表明，模型组大鼠基

本处在显性ＤＮ期。糖尿病肾脏肥大是出现最早、最明显的肾脏病理改变，而肾重指数是衡量肾脏肥大较客观的指标，模型组大鼠肾重指数明显高于对照组，病理检查显示，肾脏体积增大，肾小球囊腔狭窄，球内细胞增多，基底膜明显增厚，系膜区增宽，根据Ｔｅｒｖａｅｒｔ的ＤＮ病理分型标准，模型组大鼠肾病

表１两组大鼠体重、空腹血糖、一氧化氮、肾功能、血脂水平的变化

Ｔａｂ．１

Ｃｈａｎｇｅｓｏｆｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ，ＦＢＧ，ＮＯ，Ｓｅｔ，ＢＵ，、ＴＣ，ａｎｄＴＧｉｎｔｈｅ

ｔｗｏ

ｇｒｏｕｐｓｏｆ

ｒａｔｓ

组别

Ｇｒｏｕｐｓ

时间

Ｔｉｍｅ

体藿（ｇ）

Ｂｏｄｙ

ｗｅｉｇｈｔ

卒腹血糖ＦＢＣ（ｍｍｏｌ／Ｌ）

６．０８±Ｏ．８３

一氧化氮ＮＯ（¨，ｍｏｌ／Ｌ）

ｎ．２ｌ土１．２８

血肌酐尿素氯

总胆同醇甘油ｉ脂

Ｓｅｒ（¨，ｍｏｌ／Ｌ）ＢＵＮ（ｍｍｏｌ／Ｌ）ＴＣ（ｍｍｏｌ／Ｌ）ＴＧ（ｍｍｏｌ／Ｌ）

５９．０８士１．９３

５．６３±０．３４

２．９８土０．１７

０．６９±Ｏ．１ｌ

模型组０周

Ｍｏｄｅｌ

ｇｒｏｕｐ

３８３．２５±２４．９６

”Ｗ三ｅｋ

．４２３．０８±３２．９８

５

９．４６－Ｉ－Ｉ．６２‘吣６１９．５９±１．７３’吣△５４．１７±５．５４５．８２－Ｉ－Ｏ．５１

７．２８土１．７０’吣６１．５９±０．４９＋咄Ａ

ｗｅｃｋ８

对照组乙ｏ“‘“

０周

３８５．４２±２３．６０５．９７±０．７５１１．７０±ｌ，２４５９．００±３．２８５．５ｌ±１．０８２．９ｌ±０．２３０．７３±０．１４

８周

ｇｒｏｕｌａ

。

．４１３．５０±３０．８９

６．１３±０．８８１４．２８±１．４４６△５２．０８±５．０９６．１０±０．７０２．７５±０．２５

０．９３±０．２５

注：与对照组比较，。．Ｐ＜０．Ｏｌ；与第０周比较，６６Ｐ＜０．Ｏｌ

Ｎｏｔｅ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，’．Ｐ＜Ｏ．０ｌ；Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｗｅｅｋ０，Ｐ＜０．０５，６△尸＜Ｏ．０１

中国比较医学杂志２０１２年４月第２２卷第４期ＣｈｉｎＪＣｏｍｐＭｅｄ。Ａｐｒｉｌ２０１２。Ｖ０１．２２．Ｎｏ．４５７

病理分型基本在ｌｉｂ型，与非病理指标判断基本相符，表明模型已诱导成功。研究表明体内高血糖状态下，激活与醛糖还原酶相关的多元醇通路，造成进入肾组织细胞的葡萄糖转变为不易透过细胞膜的山梨醇和果糖，在细胞内堆积而造成细胞肿胀和破坏，并促进大分子糖化终末产物形成，造成肾小球基底膜增厚’１…，且能促使蛋白激酶Ｃ活性升高，引起细胞黏附因子在肾小球膜细胞中的表达，加速肾小球损伤，高血糖致血容量扩张，从而使肾血流量增加。造肾小球滤过率升高，促进ＤＭ向ＤＮ的转变。血脂异常导致肾脏损伤的可能机制有肾小球基底膜脂质沉积，刺激基底膜细胞增殖和细胞外间质生成，降低纤溶活性，造成肾小球毛细血管的血栓栓塞，改变血管阻力使肾小球呈高滤状态，尿白蛋白排出增加等。实验中，模型组肾功能与对照组并无差异，考虑可能和病程较短有关，还未达到ＤＮ晚期。研究表明。ＮＯ的升高导致肾小球毛细血管的高灌注、高滤过，从而增加肾的工作负荷，促使ＤＮ的恶化¨“；在ＳＴＺ诱导的ＤＭ大鼠早期，肾组织Ｎａ＋Ｋ＋．ＡＴＰａｓｅ活性明显增强，与ＤＮ的发生发展有显著的相关性¨“。本实验显示，模型组的肾组织Ｎａ＋Ｋ＋．ＡＴＰａｓｅ的活性和血清ＮＯ显著升高。进一步加剧了ＧＫ大鼠向２型ＤＮ的进展。

参考文献：

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２

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３

ＰｈｉｌｌｉｐｓＡｎ，Ｂａｂｏｏｌａｌ

Ｋ，Ｒｉｌｅｙ

Ｓ，ｅＩ

ａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ

ｏｆ