免疫实验四
一 小鼠抗绵羊红细胞抗体的制备及检测
【实验原理】免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。具有灵敏度高、特异性强、快速反应的特点，是免疫学技术中应用最为广泛的方法之一。酶联免疫技术以酶作为标记物，与相应的抗原或者抗体结合后，通过底物的颜色反应作为抗原抗体的定量定性检测，即酶联免疫吸附实验（ELISA）。其中间接法适用于抗体的检测。
【实验步骤】
1.脱纤维防凝处理的绵羊血，配制20%和40%的SRBC悬液给小鼠免疫，腹股沟皮下注射，每周一次，连续3周，每次0.1ml。
2.第四周时，摘眼球取血，收集小鼠血于EP管，静置半小时。2000转离心10min，取血清。
3.取出包被好抗原的酶标板（4孔/组），甩干孔内液体。以洗涤液（200μL/孔）洗涤3次，2min/次。
4.编号各孔1~4，分别加入空白、阴性、阳性、待测液各100μL，置于37℃湿盒内30min。
5.甩干孔内液体，以洗涤液（200μL/孔）洗涤3次，2min/次，孔加入酶标羊抗鼠二抗100μL/孔，置于37℃湿盒内30min。
6.甩干孔内液体，以洗涤液（200μL/孔）洗涤3次，2min/次，加入底物溶液100μL/孔，避光显色，观察。
【实验结果】
内容需要下载文档才能查看
图片左组为20%组，右组为40%组，所加液体分别为空白、阴性、阳性、待测血清。其中显色的3、4号为阳性，1、2号为阴性。
【实验分析】
实验结果显示，待测小鼠血清结果为阳性，表示小鼠血清中含有抗绵阳红细胞抗原的抗体。 结果显示两组的3号添加阳性液的管内二者颜色深浅不同，可能是由于洗涤过程中由于4号管液体溅出至第一组3号管所致。
二 豚鼠过敏实验
【实验原理】超敏反应是指已致敏的机体再次接触相同变应原时，所引起的自身组织损伤和生理功能紊乱。其中I型超敏反应又称为速发型超敏反应或者变态反应，引起超敏反应的抗原称之为变应原。
变应原首次进入机体时，刺激浆细胞产生IgE，IgE的Fc段与肥大细胞或噬碱性粒细胞表面的FcεR结合，使得IgE吸附于细胞的表面。当相同的变应原再次进入致敏机体时，即可与吸附于细胞上的IgE结合，引起一系列反应，使这些细胞释放祖胺等生物活性物质，引起I型超敏反应的发生。
【实验步骤】
1.在实验开始前两周，给豚鼠皮下注射1ml稀释的蛋清。
2.固定好豚鼠，找到心尖搏动处，消毒后心内注射1ml稀释蛋清。放开豚鼠，观察反应情况。
【实验现象】预期现象：在注射后数分钟内，豚鼠会出现一系列症状，表现为兴奋不安、躁
动、鼻翼煽动、抓鼻，呼吸急促、毛发耸立、四肢痉挛、跳跃甚至死亡。
实际现象：豚鼠有轻微躁动反应，呼吸急促，但表现不明显。
【实验分析】超敏反应不明显，可能是由于发敏注射时注射剂量过小，不足以引发明显的超敏反应。
或者是由于注射时未注射到心内，导致超敏反应不明显。
应有的现象为在注射后数分钟内，豚鼠会出现一系列症状，表现为兴奋不安、躁动、鼻翼煽动、抓鼻，呼吸急促、毛发耸立、四肢痉挛、跳跃甚至死亡。但是小鼠并未死亡，原因可能是并未注射入心脏中，或者注射剂量不足。
左边为20%的实验组，右边为40%的实验组，1~4里分别加的是空白、阴性、阳性、待测血清。其中显色的3、4号为阳性，1、2号为阴性。
结果分析：根据4个管的颜色可知，待测小鼠血清为阳性，说明小鼠血清中含有抗绵阳红细胞抗原的抗体。但是左边3号颜色比右边深，可能是在实验过程中操作不当所致。
下载文档
热门试卷
- 2016年四川省内江市中考化学试卷
- 广西钦州市高新区2017届高三11月月考政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高一上学期期中考试政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高二上学期期中考试政治试卷
- 辽宁省铁岭市协作体2017届高三上学期第三次联考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2017届高三11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 山东省滨州市三校2017届第一学期阶段测试初三英语试题
- 四川省成都七中2017届高三一诊模拟考试文科综合试卷
- 2017届普通高等学校招生全国统一考试模拟试题（附答案）
- 重庆市永川中学高2017级上期12月月考语文试题
- 江西宜春三中2017届高三第一学期第二次月考文科综合试题
- 内蒙古赤峰二中2017届高三上学期第三次月考英语试题
- 2017年六年级（上）数学期末考试卷
- 2017人教版小学英语三年级上期末笔试题
- 江苏省常州西藏民族中学2016-2017学年九年级思想品德第一学期第二次阶段测试试卷
- 重庆市九龙坡区七校2016－2017学年上期八年级素质测查（二）语文学科试题卷
- 江苏省无锡市钱桥中学2016年12月八年级语文阶段性测试卷
- 江苏省无锡市钱桥中学2016-2017学年七年级英语12月阶段检测试卷
- 山东省邹城市第八中学2016-2017学年八年级12月物理第4章试题（无答案）
- 【人教版】河北省2015-2016学年度九年级上期末语文试题卷（附答案）
- 四川省简阳市阳安中学2016年12月高二月考英语试卷
- 四川省成都龙泉中学高三上学期2016年12月月考试题文科综合能力测试
- 安徽省滁州中学2016—2017学年度第一学期12月月考高三英语试卷
- 山东省武城县第二中学2016.12高一年级上学期第二次月考历史试题（必修一第四、五单元）
- 福建省四地六校联考2016-2017学年上学期第三次月考高三化学试卷
- 甘肃省武威第二十三中学2016—2017学年度八年级第一学期12月月考生物试卷
网友关注
- 浅谈汉代立法的儒家化
- 普通高校毕业生灵活就业合同
- 西南大学《中国历史与文化》作业
- 中国化的马克思主义答案
- 毛概
- 刘邦&项羽 《资治通鉴》有感
- 2011年秋季党校结业考试复习大纲
- 槽点满满的民族人类学
- 【重点】古代文学-魏晋南北朝文学
- 施工员(土建)修订版答案
- 浅谈以当事人为本理念的基本内涵与实现途径
- 北京大学2015年春季行政法与行政诉讼法在线作业答案
- 金融法题目
- (三稿)浙江大学宁波理工学院学士学位授予工作细则及修改说明201404028
- 政治
- 姚史炫
- 读《国史大纲》有感
- 秦汉之际刘邦政权辨证
- 名航概论
- 读诗句猜成语_人文_三联_20141209_213737
- 大一《思想道德修养与法律基础》
- 马克思网上课程参考答案(仅供参考)
- 王坤老师详细介绍
- 毕业论文大纲
- 科学发展观与毛泽东的发展观之比较
- 广东金融学院近代史第一套试卷及答案
- 21世纪以来古印度史的研究状况
- 江西省高校本科专业综合评价试点工作
- 答题模板(哲学)
- 我的第一本哲学书 读书心得
网友关注视频
- 北师大版八年级物理下册 第六章 常见的光学仪器（二）探究凸透镜成像的规律
- 【部编】人教版语文七年级下册《老山界》优质课教学视频+PPT课件+教案，安徽省
- 河南省名校课堂七年级下册英语第一课（2020年2月10日）
- 青岛版教材五年级下册第四单元（走进军营——方向与位置）用数对确定位置（一等奖）
- 3.2 数学二年级下册第二单元 表内除法（一）整理和复习 李菲菲
- 【部编】人教版语文七年级下册《泊秦淮》优质课教学视频+PPT课件+教案，广东省
- 沪教版牛津小学英语（深圳用） 四年级下册 Unit 2
- 第五单元 民族艺术的瑰宝_15. 多姿多彩的民族服饰_第二课时(市一等奖)(岭南版六年级上册)_T129830
- 二次函数求实际问题中的最值_第一课时(特等奖)(冀教版九年级下册)_T144339
- 冀教版小学数学二年级下册第二周第2课时《我们的测量》宝丰街小学庞志荣
- 8.对剪花样_第一课时(二等奖)(冀美版二年级上册)_T515402
- 外研版英语七年级下册module3 unit2第一课时
- 小学英语单词
- 沪教版八年级下册数学练习册21.3（3）分式方程P17
- 沪教版牛津小学英语（深圳用） 五年级下册 Unit 12
- 【部编】人教版语文七年级下册《逢入京使》优质课教学视频+PPT课件+教案，安徽省
- 沪教版牛津小学英语（深圳用） 四年级下册 Unit 8
- 冀教版小学数学二年级下册第二单元《租船问题》
- 【获奖】科粤版初三九年级化学下册第七章7.3浓稀的表示
- 《小学数学二年级下册》第二单元测试题讲解
- 北师大版数学 四年级下册 第三单元 第二节 小数点搬家
- 外研版英语三起6年级下册（14版）Module3 Unit2
- 沪教版牛津小学英语（深圳用）五年级下册 Unit 1
- 【部编】人教版语文七年级下册《逢入京使》优质课教学视频+PPT课件+教案，辽宁省
- 北师大版数学四年级下册第三单元第四节街心广场
- 二年级下册数学第二课
- 第4章 幂函数、指数函数和对数函数（下）_六 指数方程和对数方程_4.7 简单的指数方程_第一课时(沪教版高一下册)_T1566237
- 沪教版八年级下册数学练习册21.4（1）无理方程P18
- 第19课 我喜欢的鸟_第一课时(二等奖)(人美杨永善版二年级下册)_T644386
- 七年级英语下册 上海牛津版 Unit9
精品推荐
- 2016-2017学年高一语文人教版必修一+模块学业水平检测试题（含答案）
- 广西钦州市高新区2017届高三11月月考政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高一上学期期中考试政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高二上学期期中考试政治试卷
- 辽宁省铁岭市协作体2017届高三上学期第三次联考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2017届高三11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
分类导航
- 互联网
- 电脑基础知识
- 计算机软件及应用
- 计算机硬件及网络
- 计算机应用/办公自动化
- .NET
- 数据结构与算法
- Java
- SEO
- C/C++资料
- linux/Unix相关
- 手机开发
- UML理论/建模
- 并行计算/云计算
- 嵌入式开发
- windows相关
- 软件工程
- 管理信息系统
- 开发文档
- 图形图像
- 网络与通信
- 网络信息安全
- 电子支付
- Labview
- matlab
- 网络资源
- Python
- Delphi/Perl
- 评测
- Flash/Flex
- CSS/Script
- 计算机原理
- PHP资料
- 数据挖掘与模式识别
- Web服务
- 数据库
- Visual Basic
- 电子商务
- 服务器
- 搜索引擎优化
- 存储
- 架构
- 行业软件
- 人工智能
- 计算机辅助设计
- 多媒体
- 软件测试
- 计算机硬件与维护
- 网站策划/UE
- 网页设计/UI
- 网吧管理