鸡卵黄抗眼镜王蛇毒抗体IgY的理化特性

上传者：李赤红
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鸡卵黄抗眼镜王蛇毒抗体IgY的理化特性

２００３年第１５卷第４期蛇志Ｊ（）ＵＲＮＡＬ０ＦｓＮＡＫＥ

鸡卵黄抗眼镜王蛇毒抗体ＩｇＹ的理化特性。

王薇１，余清声２，王桂平１

（１．广州医学院，广东广州

５１０１８２；２．广州蛇毒研究所，广东广州

５１

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［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］

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［摘要］目的研制抗眼镜王蛇毒鸡卵黄抗体并研究该抗体的理化特性。方法拟用减毒后的眼镜王

蛇毒免疫母鸡后．从卵黄中制备抗眼镜王蛇毒抗体ＩｇＹ。采用间接ＥＬＩＳＡ法对此抗体的理化特性进行研究。结果Ｅ１。１ｓＡ显示免疫后１２天开始出现特异性抗体，且抗体滴度莲渐升高．约在免疫后６０天左右．最高可达ｌ：１００。ｏＯ，此最高滴度可维持３（）天，以后滴度逐渐降低．至免疫后ｌｏｏ～ｌｌｏ天滴度仍可维持在最高滴度的一半（１：５００００）。此抗体在ｌｏ～６５＋Ｃ温度范围内括性保持稳定；在ｐＨ为ｌ～ｌ２范围内．抗体活性稳定｝此抗体经胰蛋白酶处理ｌｈ内，活性下降不明显，但１ｈ以后活性迅速下降。

结论

从卵

黄中制备抗眼镜王蛇毒抗体ＩｇＹ，是可行的，稳定的。［关键词］

眼镜王蛇毒；鸡卵黄免疫球蛋白ＩｇＹ；酶联免疫吸附测定（ＥＬＩｓＡ）；理化特性

［文献标识码］Ａ

［文章编号］１００１—５６３９（２００３）０４一ｏ００５一【：４

［中图分类号］Ｒ９９６．３

早在６０年代，科学家们就发现母鸡受免疫刺激后产生免疫反应，在输卵管内卵黄成熟期，血液中ＩｇＧ可被选择性地转移到卵黄中，称为鸡卵黄

ＩｇＹ（Ｙｏｌｋ

链和２２～３０ｋＤａ的轻链口】，它的结构与ＩｇＧ相似，具有典型的免疫球蛋白的空间构象，可与抗原结合，但其Ｆｃ段的氨基酸组成与ＩｇＧ相差很大．不与人类风湿因子结合．并且不激活补体。”，因而应

用于体内后很少引起过敏反应。

Ｉｍｎｌｕｎ９１０ｈｕｌ【ｎ），它是卵黄中唯一的免

疫球蛋白类“Ｊ。１９Ｙ抗体是一７ｓ免疫球蛋白，分子

量约为１８０ｋＤ，含两个亚单位，即６７～７０ｋＤａ的重

眼镜王蛇（ｏ却巾＾ｎｇｚｕ＾洲删＾，Ｏｈ）是世界上

＋广州市科委基金资助项目（项目编号：２００２儿一ｃ０１７１）。

５

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２（）（１３年第ｌ５卷第．１期蛇志ｊＯＩＪＲＮＡＬＯＦＳＮＡＫＥｖｏｌ＿ｌｓＮｏ４，２∞３

网５

ＩｇＹ对胰蛋白酶的敏感性

３讨论

眼镜王蛇是一种剧毒蛇，在国内主要分布于南方各省，对人类健康危害极大，但迄今为止尚无相应的抗蛇毒抗体，给临床抢救此类毒蛇中毒病人带来困难。此类蛇伤患者主要在边远山区，中毒后很短时间内就可以导致死亡，故此类治疗用抗体必须在基层医疗单位组织存放，而这些基层单位条件相对来说比较简陋，因此，要求蛇毒抗体有很好的理化特性，便于存放。经典的马血清制备繁琐，成本高，运输不方便，因此，我们希望通过另一途径制备出稳定性较好的蛇毒抗体。鸡卵黄作为人们生活必需的食品，其来源丰富、简单，很少有人对鸡蛋过敏，并且ＩｇＹ作为一种抗体的制备，有其优越性：（】）蛋黄中的抗体量达到高滴度，不再加强免疫，也可持续很长时间，从而免除了周期性的加强免疫和试血的麻烦。（２）鸡与哺乳动物有着明显的生物学差别，鸡病原体往往对哺乳动物无致病性，因而鸡卵黄抗体明显优于哺乳动物如马、羊制备的血清制剂。（３）其来源充分，费用不高，收集方

便…”１。

我们的试验发现，用眼镜王蛇原毒免疫的母鸡后，产生的蛇毒抗体具有较好的热稳定性，能耐受

６５

ｃ条件下作用３０ｍｉｎ；在ｐＨ值为４～ｌ２的活性

保持良好，无明显变化。说明此类抗体适合于常温搁置。此类抗体经胰蛋白酶处理１ｈ内活性有所降低，但不明显，但经１１１以后，活性很快消失。意味着如果此类抗体作为『ｊ服药使用，可能要经过一定处理，免除其进人体内后受酶的破坏。我们的实

８

验研究将提供一种新的方法制备蛇毒抗体．并将为其它蛇种和生物毒素的鸡卵黄抗体的研制提供技

术平台。

［参考文献］

［１］

Ｌｏｅｋｅｎ

ＭＲ，ＲｏｔｈＴＪ