高锰酸钾对虎斑乌贼胚胎和幼体的毒性研究

第３２卷第１期２０１１年１月１日

水产养殖

ＪｏｕｒａａｌｏｆＡｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ

Ｖ０１．３２，Ｎｏ．１

Ｊａｎ．Ｉ。２０１ｌ

ｄｏｉ：１０．３９６９６．ｉｓｓｎ．１００４－２０９１．２０１１．０１．００４

赢撬酸锲鹦虑斑乌蛹篚睚胎和幼体鹊毒牲研

谭永胜，刘建勇，徐彬晓

（广东海洋大学。广东湛江５２４０２５）

摘要：采用静水试验法研究了高锰酸钾对虎斑乌贼胚胎和幼体的毒性作用。试验结果表明：高锰酸钾对虎斑乌贼胚胎

２４

ｈ和４８ｈ半致死浓度（ＬＣ。）分别为６４．１５０、５０．４３３ｍｇ／Ｌ，安全浓度为９．３５１３ｍｓ／Ｌ。高锰酸钾对虎斑乌贼幼体的２４ｈ、４８ｈ半

致死浓度（ＬＣ。）分别为０．５３４３、０．４８９７芳：幼体期＞胚胎期。

ｍ玑，安全浓度为０．１２３４

Ｈｌｇ／Ｌ。虎斑乌贼在胚胎期与幼体期对高锰酸钾的敏感性强度

关键词：高锰酸钾；虎斑乌贼；毒性作用；半致死浓度；安全浓度中图分类号：Ｑ１７５

文献标识码：Ａ

文章编号：１００４—２０９１１２０１１）０１－００１２－０４

虎斑乌贼（Ｓｅｐｉａｐｈａｒａｏｎｉｓ）隶属软体动物门（Ｍｏｌｌｕｓｃａ）、乌贼目（Ｓｅｐｉｏｉｄｅａ）、乌贼科（Ｓｅｐｉｉｄａｅ）。

用，并确定其安全浓度，为虎斑乌贼人工育苗过程中的疾病防治提供参考数据。

分布于印度太平洋的热带海域，自近岸至水深１００

ｍ的水域中均有发现ＩＬ２１。虎斑乌贼个体大、肉细嫩、味道鲜美、营养丰富，是一种经济价值很高的近岸

ｌ材料和方法

１．１试验材料

虎斑乌贼受精卵采自湛江海域，受精卵采用塑

底拖经济渔获物。由于其具有饵料转换率高、适合

高密度养殖、抗病力强、生长快等优点，是一种极具发展养殖前景的经济头足类１３１。国外早在１９７８年已

料袋充氧运达广东海洋大学无脊椎动物增养殖实

验室，经屁微镜观察，受精卵处于原肠期。将受精卵用过滤海水反复冲洗后。分别放人容积为１００Ｌ的塑料水桶内进行充气孵化。孵化及幼体培育所用海．水均经过砂滤，水温（２６－１－２）℃，盐度２８±ｌ。每天换水２次，孵化期间不投饵，初孵幼体投喂卤虫无节

开始对虎斑乌贼繁育和养殖技术进行研究，对虎斑

乌贼规模化养殖、室内多代养殖条件下的生物学特征及养殖生态进行了详细的记录【３．４Ｉ。近年来，我国为了恢复和开发利用头足类资源．对乌贼属的繁育和养殖技术研究逐渐增多。主要集中在金乌贼（＆

幼体。

高锰酸钾（分析纯）为汕头市光华化学厂生产。１．２试验方法

ｅ￥ｃ比，ｌｔｎ

Ｈｏｆｌｅ）和曼氏无针乌贼（ｓｍａｉｎｄｒｏｎｉ）等

常见种类。如：魏邦福ｌ蹲探索研究了金乌贼增殖与

保护技术；尹飞等１６Ｉ研究了温度、盐度、ＰＨ值的变

化对曼氏无针乌贼幼体成活率和活力的影响；郝振

斑乌贼受精卵毒性试验在２Ｌ的小白桶内迸

行。根据预实验的结果，按等对数间距法设置了５

个试验浓度，分别为３５．００，４９．９３，４７．７５，５５．７２和

６５．００

林等吩绍了金乌贼的生物学特性及增殖技术。相

比而言，目前国内对虎斑乌贼养殖技术方面的研究较少。

化学消毒剂用于水体消毒，以控制和预防水产经济动物的疾病，广泛应用于育苗和养殖生产中。虎斑乌贼胚胎发育、育苗及人工养殖过程中，细菌性疾病时有发生，定期使用消毒剂类药物对育苗水体、幼体等消毒是预防疾病的有效方法。本文首次研究了高锰酸钾对虎斑乌贼胚胎和幼体的毒性作

ｍｇ／Ｌ，同时设一个对照组，试验组和对照组各

设２个重复组。采用随机抽样的方法在每个小白桶中放３０粒处于十字期（红珠期）受精卵。试验在室内进行，试验期间不充氧气，２４ｈ全换水１次并重新添加相应浓度的高锰酸钾溶液。

虎斑乌贼幼体毒性试验在２Ｌ的玻璃水槽内进行。根据预实验的结果，实验组按等对数间距设置了９个试验浓度：０．１０，０．１３６，０．１８６，０．２５４，０．３４６ｍｓ／Ｌ，０．４７２，０．６４４，０．８７９和１．２ｍｇ／Ｌ。同时设一个对

资助项目：广东海洋大学自然科学基金项目（０５１２１２４）

作者简介：谭永胜（１９８５一），男，在读研究生，从事水产养殖研究．Ｅ－ｍａｉｌ：３７０５７６１０３＠ｑｑ．ｃｏｒｎ通讯作者：刘建勇（１９７０－）。博士，副教授．Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｊｙ７０＠１２６．ＣＯＳ

第１期

谭永胜，等高锰酸钾对虎斑乌贼胚胎和幼体的毒性研究

１３

照组，试验组和对照组各设２个重复组。采用随机抽样的方法每个玻璃水槽放ｌＯ条乌贼幼体。试验期间不投喂饵料，２４ｈ全换水１次并添加相应浓度的高锰酸钾溶液，每２ｈ观察并记录死亡个体数目和幼体的活动状况。如果发现死亡个体，及时挑出，以防止水质恶化。

１．３虎斑乌贼受精卵和幼体死亡标准

在显微镜下观察处于红珠期的虎斑乌贼胚胎的死亡情况，以受精卵胎体头部贴于细胞膜，心脏

据对照组成活率情况进行校正：

Ｙ＝（Ｐ’一Ｃ）／Ｐ’×ｌ（）０％

式中：Ｙ为校正死亡率；Ｐ’为对照组个体存活率；Ｃ为试验组个体存活率。

安全浓度（ＳＣ）的计算公式为：

ＳＣ＝４８ｈＬＣ∞×０．３／（２４ｈＬＣ５ｆ）／４８ｈＬＣ帅）３

式中：２４ｈＬＣ叭４８

ｈ

ＬＣ∞分别表示虎斑乌贼胚胎或

幼体的２４ｈ、４８ｈ的半致死浓度。

２试验结果

２．１虎斑乌贼受精卵（红珠期）及幼体对高锰酸钾的中毒反应

虎斑乌贼受精卵及幼体在不同浓度高锰酸钾情况下，２４

ｈ、４８

无跳动迹象作为死亡标准。

虎斑乌贼幼体，以体色变白，人工刺激无反应，将其捞起来放人正常海水里２～３ｒａｉｎ无法恢复活力，且对外界刺激无反应为死亡标准。１．４半致死浓度和安全浓度的计算

ｈ经效正的死亡率见表１、表２。

从表ｌ可以看ｍ，试验２４ｈ时虎斑乌贼受精卵死亡率随高锰酸钾浓度的升高而升高，浓度为６５．０

ｈ、４８

试验结果取重复组平均值，各试验组死亡率根

表１高锰酸钾对虎斑乌贼受精卵２４ｈ死亡率

（％）

衰２高锰酸钾对虎斑乌贼幼体２４

ｈ、４８

ｈ死亡率ｌ％）

结束时，低浓度组的受精卵形态特征与对照组基本相似．都是由几层外膜紧紧包裹。体色正常，不透明。高浓度组的受精卵卵膜均被染成黄褐色，甚至烤焦状，胚层表面松散，并有很多裂痕。

Ｏ．１０００３．３３±５．７７

从表２可以看出，２４ｈ内当高锰酸钾浓度低于０．Ｉｍｇ／Ｌ时，未有幼体死亡．高锰酸钾浓度高于

０．１３６

０．１３６６．６７＋５．７７６．６７±５．７７

ｍｇ／Ｌ时，开始有幼体死亡，且死亡率随高锰

Ｏ．１８６６．６７±５．７７１０．００：ｔ－Ｏ．００

０２弘

Ｏ３稻

Ｏ４佗

嫩岱竹岱＂拍儆奶嫩岱＂

¨

酸钾浓度的提高而升高。在４８ｈ内，当高锰酸钾浓度提高到１．２ｍｇ／Ｌ时，幼体全部死亡。试验过程中，低浓度组的幼体活动状态与对照组基本相似，多潜伏于玻璃水槽底部。而高浓度组下的幼体，在

２０．００±１０．０

３０．００：ｔ－Ｏ．００

６０．００４－１０．００

Ｏ６

舭甄

％

～州瑚

药物的刺激下，起初硅得很活泼，沿玻璃水槽壁或在水的中上层不停游动、急剧打转，甚至出现喷墨现象。经过一段时间后，活动开始减弱，游动减慢。

ｌｏｏ．００ｊ＝ｏ．００

Ｏ８为

●２

∞

；耋药＂％；耋岱＂

１００．ｏｏｘ－－ｏ．００

随着时间推移幼体中毒程度加重，相继ｍ现下沉和

ｌｏｏ．ｏｏｘ－－ｏ．００

头向下，尾朝上的症状，静卧不动或弹动．继而体能衰竭．极少活动，偶尔做挣扎活动一下，受外界刺激

ｍｇ／Ｌ时受精卵死亡率达到５７．１４％。同样，在试验

４８

ｈ后，受精卵死亡率随高锰酸钾浓度的提高而升

后反应迟钝，随中毒程度加剧，部分浓度组的体弱者较快死亡。

高，当浓度为６５．０ｍｇ／Ｌ时幼体死亡率达７９％。试验

１４

水产养殖

３２卷

２．２高锰酸钾对虎斑乌贼受精卵（红珠期）及幼体

的急性毒性

根据虎斑乌贼受精卵（红珠期）和幼体２４

ｈ，４８

的回归方程，通过回归方程求出ＬＣ∞，并计算安全浓度。高锰酸钾对虎斑乌贼受精卵（红珠期）和幼体

急性毒性计算结果列于表３、表４。

ｈ的死亡率观测数据，求死亡率（ｙ）与相应浓度（ｘ）

从表３、表４看出，虎斑乌贼受精卵（红珠期）和

表３高锰酸钾对虎斑乌贼受精卵（红珠期）急性毒性计算结果

幼体对高锰酸钾的耐受性有明姥的差异。红珠期的受精卵２４

５０．４３３

ｈＬＣ价４８ｈ

斌等【９】的研究结果，高锰酸钾对方斑东风螺面盘幼虫的安全浓度为０．１

１５

ＬＣ卯分别为６４．１５ｍｇ／Ｌ和

１３

ｍｇ／Ｌ。王一农等【１０】对泥螺的

ｍｇ／Ｌ，安全浓度为９．３５ｍｇ／Ｌ，而幼体２４

ｈ

试验表明，泥螺面盘幼体对高锰酸钾的安全浓度为

０．１６８

ＬＣ∞、４８ｈＬＣ卯分另Ｕ为０．５３４３ｍｇ／Ｌ和０．４８９７

ｍｇ／Ｌ，

ｍｇ／Ｌ。由本研究结果可见，虎斑乌贼幼体较受

安全浓度为０．１２３４ｍｇ／Ｌ。结果表明：虎斑乌贼受精

精卵对高锰酸钾更为敏感，这可能与乌贼胚胎外包有一层较厚的胶质膜，从而对胚胎具有较强的保护作用有关。黄英【８】等对波部东风螺的药物试验结果发现，波部东风螺面盘幼虫较处三二胶质膜内的受精卵对药物更为敏感。在本实验的幼体培育过程中，我们也发现，虎斑乌贼幼体对环境变化极敏感，当大量换水，光照突然改变时，幼体体色很容易发生明显的变化，活性降低，有时发生喷墨现象，甚至直接导致死亡。

根据本试验结果，虎斑乌贼胚胎期生存能力强，可忍受较高浓度的高锰酸钾，当有害生物（如原生动物）大量发生或水质环境较差时，可以选择在胚胎期进行短时间的高浓度药物处理。另外考虑到育苗育水体中的有机质对高锰酸钾的消耗作用，实

卵（红珠期）对高锰酸钾有较强的耐受性较强，而幼

体对高锰酸钾的耐受性较差。

３

讨论

高锰酸钾为强氧化剂，遇有机物即放出新生态

氧，其强氧化性可使细菌细胞的蛋白质变性，起到杀菌作用，因此高锰酸钾广泛用于水产动物育苗及养殖生产上。有关高锰酸钾对头足类受精卵毒性方面的研究较少，虎斑乌贼的受精卵同许多腹足类的受精卵相类似，其胚胎外有一层较厚的胶质膜，对胚胎起到保护作用。黄英１８ｌ等对波部东风螺的药物试验结果，高锰酸钾浓度达到１．５ｍｇ／Ｌ时，东风螺受精卵孵化率及孵化速度也明显降低，出现滞育及发育延缓现象，高锰酸钾浓度达到３．０ｍｇ，Ｌ时，受精卵在第３天内全部死亡。本试验结果：高锰酸钾对虎斑乌贼受精卵（红珠期）的安全浓度为９．３５１３

际生产中高锰酸钾对虎斑乌贼受精卵和幼体的安全浓度可能会高于本实验结果。

ｍｇ／Ｌ，表明虎斑乌贼受精卵（红珠期）对高锰酸钾具

有较强的耐受性。

高锰酸钾对虎斑乌贼幼体的安全浓度为

０．１２３４

参考文献：

…１

Ｎａｂｈｉｔａｂｈａｔａ

ｍｇ／Ｌ，明显小于受精卵的安全浓度值。这一

Ｊ，ＮｉｌａｐｈａｔＰ．Ｌｉｆｅｃｙｃｌｅｏｆｃｕｌｔｕｒｅｄｐｈａｒａｏｈ

结果与许多贝类幼虫对高锰酸钾的耐药性研究结

果较为相似［ｓ－ｌｏｌ。黄英ｆｓｌ等试验结果．高锰酸钾对波部东风螺面盘幼虫的安全浓度为０．１３８ｍｇ／Ｌ。李雷

ｃｕｔＯｅｆｉｓｈ，Ｓｅｐ／ａｐｈａｒａｏｒｄｓＥｈｒｅｎｂｅｒｇ，１８３ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｅｎｔｅｒＳｐｅｃｉａｌ

１【Ｍ１．Ｐｈｕｋｅｔ

Ｍａｒｉｎｅ

Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，１９９９．１９：２５枷

【２】２ＮｏｒｍａｎＭ，ＲｅｉｄＡ．Ｐｈａｒａｏｈ＇ｓＣｕｔｔｌｅｆｉｓｈ，Ｓｅｐ／ａｐｈａｒａｏｎ／ｓ．Ａ

第１期谭永胜，等高锰酸钾对虎斑乌贼胚胎和幼体的毒性研究

１５

ＧｕｉｄｅｔＯ

Ｓｑｕｉｄ，Ｃｕｔｔｌｅｆｉｓｈ，ａｎｄＯｃｔｏｐｕｓｅｓｏｆＡｕｓｔｒａｌａｓｉａ【Ｍ】．

?Ｉ㈣［Ｊ１．湛江海洋大学学报，２００５，２５（４）：３９—４３

【７】郝振林。张秀梅，张沛东．金乌贼的生物学特性及增殖技术【Ｊ１．生态学杂志，２００７，２６（４）：６０１—６０６

『８１黄英，柯才焕，周时强．几种药物对波部东风螺早期发育的影响【Ｊ】．厦门大学学报（自然科学版），２００１，４０（３）：８２１—

８２６

ＣＳＩＲＯＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ：Ｃｏｌｌｉｎｇｗｏｏｄ．Ｖｉｃｔｏｒｉａ，２０００，２９

【３】ＭｉｎｔｕｎＪＷ，Ｗａｌｓｈ

ＬＳ，Ｌｅｅｔｒｏｐｉｃａｌ

ＰＧ，ｅｔａ１．Ｆｉｒｓｔｍｕｌｔｉ一ｃｕｔｔｌｅｆｉｓｈ

Ｓｅｐｉａｐｈａｒａｏｎｉｓ

套ｅｎｅｒａｔｉｏｎ

３９２

ｃｕｌｔｕｒｅｏｆｔｈｅ

Ｅｈｒｅｎｂｅｒｇ，１８３ｌ

０１．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ

’

Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２００１，９：３７５－

【４】ＮａｂｈｉｔａｂｈａｔａＪ．ＭａｓｓｃｕｌｔｕｒｅｏｆｅｅｐｈａｌｏｐｏｄｓｉｎＴｈａｉｌａｎｄｌＪ］．

【９】李雷斌，刘志刚．５种药物对方斑东风螺面盘幼虫的急性毒?ｔ生－ｌＪ１．广东海洋大学学报，２００８，２８：３４—３８

ｆ１０１王一农，顾小英，尤仲杰．泥螺室内人工育苗技术的初步ｔ，开ＣＬＩＪ］．海洋科学集刊，１９９７．３９：３３－４０

（收稿日期：２０１０—０７—２８）

ＷｏｒｌｄＡｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，１９９５。２６：２５—２９

【５】魏邦福，张平荣，胡

明，等．金乌贼增殖与保护技术初探

【Ｊ】．中国水产，２００４（７）：７９—８０

ｆ６ｌ尹飞，王春琳．宋微微．曼氏无针乌贼幼体生态因子耐爱

Ａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙｔｅｓｔｓｏｆｐｏｔａｓｓｉｕｍｐｅｒｍａｎｇａｎａｔｅ

ｏｎ

‘

ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ

ｅｍｂｒｙｏｓ

－

ａｎｄＩａｒＶａｌ０Ｉ

１ｌｌ

ｎ

５ｅｐｍｐｉｍｒａｏｎｔｓ

一

－－

ＴａｎＹｏｎｇｓｈｅｎｇ，ＬｉｕＪｉａｎｙｏｎｇ，ＸｕＢｉｎｘｉａｏ

（Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ

Ｏｃｅａｎ

Ｕｉｎｉｖｅｍｉｔｙ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ５２４０２５，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙｔｅｓｔｓｏｆｐｏｔａｓｓｉｕｍｐｅｒｍａｎｇａｎａｔｅ

ｐｈａｒａｏｎｉｓｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ

ｏｆ

ｐｏｔａｓｓｉｕｍ

ｏｎ

ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｅｍｂｒｙｏｓａｎｄＬａｒｖａｌｏｆＳｅｐｉａ

ＬＣｓｏ，４８ｈ

ＬＣｍａｎｄｔｈｅｓａｆｅ

９．３５１３ｆｏｒ

ｍｇ／Ｌ，

ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅ

ｆｏｒｔｈｅ

ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅ２４ｈ

ｗｅｒｅ

ｐｅｒｍａｎｇａｎａｔｅ

ＬＣｍａｎｄ０．１２３４

ｅｍｂｒｙｏ

６４．１５０

ｍｇ／Ｌ，５０．４３３

ｍｒＣＬ

ａｎｄ

ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ２４ｈ０．５３４３

ＬＣｍ，４８ｈｍｓ／Ｌ

ｗａｓ

ｓａｆｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｐｏｔａｓｓｉｕｍ

ｐｅｒｍａｎｇａｎａｔｅ

ｌａｒｖａｅｗｅｒｅ

ｔｏ

ｍｇＣＬ，０．４８９７

ａｎｄ

ｍｇ／Ｌ。ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｓｅｎｓｉｂｉｌｉｔｙｏｆｌａｒｖａｌｏｆＳｅｐｉａｐｈａｒａｏｎｉｓ

ｐｏｔａｓｓｉｕｍ

Ｋｅｙ

ｐｅｒｍａｎｇａｎａｔｅ

ｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｅｍｂｒｙｏｓ．ｐｅｒｍａｎｇａｎａｔｅ；Ｓｅｐｉａ

ｐｈａｒａｏｎｉｓ；ａｃｕｔｅ

ｔｏｘｉｃｉｔｙ；ｍｅｄｉｕｍ

ｌｅｔｈａｌ

ｗｏｒｄｓ：ｐｏｔａｓｓｉｕｍ

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；ｓａｆｅ

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ

团藻基因组测序完成

单细胞生物怎么能演变为多细胞生物乃至人类这样高度复杂的生物，一直是生物研究的重要课题。一个由德国、美国、加拿大和日本科研人员组成的研究小组选择从团藻入手，因为团藻的细胞种类十分简单。此外，团藻还有一个单细胞近亲一莱茵衣藻（基因组测序已在２００７年完成）。

２０１０年７月９日（Ｓｃｉｅｎｃｅ））发表的最新研究报告中，研究小组发现团藻的基因组有大约１．４亿个碱基对，包含大约１．４５万个基因，比人类基因总数仅少不到一半。参与这项研究的比勒费尔德大学专家说，研究小组在比较团藻和莱茵衣藻基因组时意外发现，尽管这两种生物的复杂程度和生命吏存在很大差异。二者的基因组却有相似的蛋白编码潜能。与莱茵衣藻相比，专家在团藻细胞内只发现了很少该生物特有的基因。科研人员由此推断，从单细胞生物演变为多细胞生物并非必需大幅提高基因的数目，在这种演变中，基因如何以及何时编码合成特定的蛋白才具有决定意义。

德国专家认为。在单细胞生物向多细胞生物演变的分子机理研究方面，团藻基因组测序是了解这一分子机理的重要一步。长期而言，研究简单生物的分子机理有助于更好地理解人类等复杂生物的进化史。

（ｗＷＷ．ｂｌｏｏｎ．ｈｅｔ）