高迁移率族蛋白B1基因在结肠癌组织中的表达

上传者：宋萍
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上传时间：2015-04-26
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高迁移率族蛋白B1基因在结肠癌组织中的表达

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ｍＲＮＡ在胃癌组织和痛旁组织表达阳性率均高于目前现有文献”…报道（分别为７８．３３％和ｏ）。胃癌组织ＴｉａｍｌｍＲＮＡ表达量（Ｍｄ＝４．９２×１０’）显著高于癌旁组织（Ｍｄ＝Ｏ）和良性病变组织（Ｍｄ＝０），提示在胃组织小，Ｔｉａｍｌ高表达是癌特征性的表现。为排除试验污染带来的假阳性町能，本研究同时做了３个阴性对照作为质控，结果３个阴性对照均未检测到扩增曲线，证明试验结果可靠。

本试验结果还表明：胃癌组织ＴｉａｍｌｍＲＮＡ表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤原发部位无关（均尸＞Ｏ．０５）。然而，淋巴结转移组比未转移组表达量高；低分化腺癌比高、中分化腺癌表达量高；浸润达到或超过浆膜层者（”－Ｔ４）较未至浆膜层（ＴＩ一砭）的表达量高，这说明Ｔｉａｒｎｌ的表达与癌变细胞的生物学行为相关联。根据胃癌分期对患者分组，Ⅲ一Ⅳ期的表达量明显高于Ｉ一Ⅱ期，表达水平

１３：１ｌ—１８．

参考文献

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ｔｌｌｅ

Ｔｉａｍｌ

义．中国医科大学学报，２００５，３４：３３１．３３９

相差４０倍。说明Ｔｉ—ｌ与胃癌生物学行为密切相关。

综上所述，Ｔｉ一１ｍＲＮＡ在胃癌组织的表达阳

性率及表达量均明显高于癌旁组织和良性病变组织，其表达量与胃癌生物学行为密切相关，有可能成为胃癌基因治疗的新靶点。但ＴｉａＩｎｌ与胃癌微转移足否有关还有待于进一步研究证实，此外胃癌患者

Ｔｉａｍｌ

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２００５，１９：７８５０８７．

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及癌组织中的表达及意义中华病理学杂志．２０００，２９：２９４—

２９５．

（收稿Ｒ期：２∞７＿０１—２２）（本文编辑：李建睦）

ｍＲＮＡ表达水平与患者预后是否相关也有待

于进一步研究。

高迁移率族蛋白Ｂ１基因在结肠癌组织中的表达

黄玲孙书明王辉

高迁移率旗蛋白盒（ＨＭＧ）超家族可分为ＨＭＧＢ、

ＨＭＧＮ、ＨＭＧＡ

８例。其组织及其配对正常组织均来源于２００５年９月～

２００６年３月新乡市中心医院、二院手术切除标本，配对正常组织距离癌组织边缘至少３ｃｍ。病理证实，２０例管状腺癌（６例高分化、１２例中分化和２例低分化）、３例黏液腺癌（１例中分化、２例低分化）和２例乳头状腺癌（中分化）。患者

３个家族，其中高迁移率族蛋白Ｂｌ（ＨＭＧＢｌ）

参与各种重要的生物过程，包括转录、ＤＮＡ修复、ｖ（Ｄ）Ｊ重组、分化、生长发育和细胞外信号。国内外研究发现，在乳腺癌“、黑色素瘤”］、胃肠间质细胞瘤“、胰腺癌”、前列腺

癌纠和急性成髓细胞白血病¨１等肿瘤组织中ＨＭＧＢｌ呈高

表达。本研究分析了美国ＮｃＢＩ网站结肠组织基因表达系列分析（ｓＡＧＥ）数据库，获得癌症和正常组织ＨＭＧ家族基因表达情况，然后收集临床标本，对结肠组织ＨＭＧＢｌ的表达进行验证。

?、对象和方法

１对象：２５例结肠癌患者，年龄３４—８０岁，男１７侧，女

ｍＲＮＡ

术前均未接受放疗和化疗。

２

ｓＡＧＥ数据库分析：用Ｍｉｃｒ０８ｍＡｃｃｅｓｓ软件对从ＮｃＢＩ

１１ｌｍｎｉｈｇｏｖ／ｓＡＧＥ／）下载的２个正

网站（ｈ卸：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ

常结肠组织及６个结肠癌组织ｓＡＧＥ数据库的标签与ＮｃＢＩ已知基因数据库的标签进行比较，获取结肠组织各种基因表

达的标签（衄ｇ）数，然后对ＨＭＧ家族基因表达进行分析。

３

ＨＭ（瑁１ｍＲＮＡ的检测：（１）引物：ＨＭＧＢｌ上游引物

５’一ＡＴ＾哪ＧｃＡＡＡＡ（ｚＧＧＡｃＡＡＧ＿３’，下游引物５’－Ⅱ℃ｃＴｃｃＴＣ

作者单位：４５３００３河南省新乡医学院医学检验系

ｃＴｃｃＴｃＡＴｃｃＴ＿３’，Ｂ—Ａｃｔｉｎ上游５’一ＧＡｃＧＧＧＧＴｃＡｃｃｃＡｃＡｃＴＣ１ＢＣＣＣＡＴＣＴＡ－３’．Ｆ游５

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通讯作者：千辉。电子信箱：ｗａｎ曲ｕ】＠Ⅺ叩Ｕ－ｅｄ…ｌ

７．ＣＴＡＣＡＡＧＣＡ唧；ＣＧｃ’ｒｃＣＡＣＧＡ

主生撞壁匡堂盘查！塑！生！旦苤垫鲞盟！翅！！地』！生Ｍ叫：Ｓ！Ｐ堕翌！！！！业！：！堕！！：盟！１１℃ＧＡＧＧＧ一３’，由北京赛百盛公司合成。（２）ＰｃＲ扩增ＨＭＧＢｌ：每份样品用ＲＮｅａｓｙ

Ｍｉｎｉ

Ｋｊｔ（Ｑ－８胪“公司）提取总

ＲＮＡ，并用ＯｍｍｓｃｄｐＩＲＴⅪｔ（Ｑｉａｇｅｎ公司）逆转录成ｃＤＮＡ作为ＰｃＲ的模板。然后用ＰｃＲ扩增ＨＭＧＢｌ基因片段，以Ｂ—Ａｃｔｌｎ为内对照。ＰｃＲ条件：９５℃预变性２ｍｉｎ，９５ｔ

１

ｍＩｎ，５５℃１ｍｉ玑７２℃２ｍｉｎ，３０个循环，７２℃延伸５ｍｉⅡ。

ＰｃＲ产物用１５％琼脂糖凝胶电泳，用凝胶成像系统采集电泳陶像．Ｂａｎｄｋａｄｅｒ图像分析软件获得电泳条带灰度值，以内参Ｂ—Ａｃｔｉｎ为基准，行半定量分析。

４．统计学分析：从ｓＡＧＥ数据库中获得ＨＭＧ家族ｍＲＮＡ表达标签的数量，然后以Ｇｅｎｅｃｌｕ８ｔｅｒ和‰ｎｅ

Ｔｒｅｅｖｉｅｗ软件处理作图。电泳的灰度值用ｓＰｓｓ１１

ｏ统计软

件处理，以ｉ±ｓ表示，两均数比较采用ｔ检验。

二、结果

１．ｓＡＧＥ数据库分析：通过分析各ｓＡＧＥ数据库（每个数

据库古有１００万个标签）发现，正常结肠组织（ＧｓＭ７２８、ＧｓＭ７２９）的ＨＭＧＢｌ基因的标签数是２５９０６和３２２６２，而结肠癌组织（ＧｓＭ６８２、ＧｓＭ阿１７、ＧｓＭ７４７、ＧｓＭ７４９、ｃｓＭ７５５和ＧｓＭ７５６）ＨＭＧＢｌ基因的标签数分别是：７１３５０、４４６９ｌ、９５９８０、９９８９９、４５０７ｔ和３６６８５，显示在结肠癌中ＨＭＧＢｌ基因呈高表达（图１）。

注：图中深红色表示与正常结肠组织标签数均值比

较高于１倍；深绿色表示与正常结肠组织标茌数均

值比较低于１倍；Ｇｓｍ２９，ＧｓＭ７２８为正常结肠组

织，其他为结肠癌组织

圈１结肠组织Ｓ＾ＧＥ数据库中｝ＬⅥＧ家族基崮的表达

２

ＨＭＧＢｌ

ｍＲＮＡ的表达：正常结肠组织ｍＩＧＢｌ

ｃＤＮＡ

基因ＰｃＲ产物电泳条带的灰度值为Ｏ．９６８±ｏ．１７ｌ，而结肠

癌组织的灰度值则为１－０１０±ｏ１８７，显示结肠癌组织中

ＨＭＧＢＩ