高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

１３２

生堡艘擅塞盍垫！呈生！旦筮丝鲞筮！翅￡照也』Ｑ磐堂：堕！型塑垫１２ｔ！！！：翌ｚ盟！：２

．临床研究．

高迁移率族蛋白１在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

刘勇

谢丛良邱元正

田勇泉

张欣黄东海周小娟

谭平清余长云

柒琳李波肖健云

【摘要】目的检测高迁移率族蛋白１（ＨＭＧＢＩ）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）组织中的表

采用免疫组织化学技术检测

达，并探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系。方法

ＨＭＧＢＩ蛋白在９３例喉鳞癌和１５例癌旁黏膜组织中的表达，并分析其表达水平与临床病理特征和预后的关系。结果ＨＭＧＢｌ蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率（８７．１％）显著高于癌旁黏膜中的阳性率

（４６．７％，Ｐ＝ｏ．００１），且其表达水平与喉鳞癌的Ｔ分期（ｒ＝１０．８７８，Ｐ＝０．００４）、临床分期（∥＝２１．１１５，Ｐ＜０．０１）、转移（Ｘ２＝２８．２９８，Ｐ＜０．０１）及复发（，＝１４．９２３，Ｐ＝０．００１）密切相关。Ｋａｐｌａｎ

Ｍｅｉｅｒ生存分析显示，ＨＭＧＢＩ高表达组、中表达组和低表达组患者的５年无瘤生存率分别为２７．８％、４３．９％和９１．７％，５年总牛存率分别为３８．９％、６８．３％和９１．７％，差异均有统计学意义（Ｘ２＝１３．８１５，Ｐ＝０．００１；Ｘ２＝１１．９１２，Ｐ＝０．００３）。单因素及多因素Ｃｏｘ比例风险回归模型分析显示，ＨＭＧＢｌ蛋白表达水平和淋巴结转移情况为喉鳞癌患者预后的独赢影响凶素。结论ＨＭＧＢｌ蛋白在喉鳞癌组织中表达显著升高，且其高表达与喉鳞癌患者的预后密切相关。ＨＭＧＢＩ可能在喉鳞癌的发生、发展中有重要作用，有可能成为评估喉鳞癌患者预后的莺要分子标志物。

【主题词】喉肿瘤；肿瘤，鳞状细胞；ＨＭＧＢｌ蛋白；肿瘤转移；预后

ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＨＭＧＢｌｐｒｏｔｅｉｎｉｎｌａｒｙｎｇｅａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａａｎｄｉｔｓｃｌｉｎｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｕＵ

Ｙｏｎｇ’，Ｘ论Ｃｏｎｇ ｌｉａｎｇ。ＱＩＵＹｕａｎ ｚｈｅｎｇ，ＴｌＡＮＸｉａｏ－ｊｎａｎ，烈，ｖ凡愕一ｑｉｎｇ，ＹＵＣｈａｎｇ－ｙｕｎ，Ｑｔ

Ｙｏｎｇ－ｑｕａｎ，ＺＨＡＮＧＸｉｎ，ＨＵＡＮＧＤｏｎｇ—ｈａｉ，ｚＨｏＵＬｉｎ，１２

Ｂｏ，ＸＩＡＯ

Ｊｉａｎ－ｙｕｎ．‘Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ

Ｏｔｏｒｈｉｎｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｙ，Ｘｍｎｇｙａ舶印删，Ｃｅｎｔｒａｌ

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ

Ｓｏｕｔｈ

Ｕｎｉｖｅｒｓ毋，Ｃｈａｎｇｓｈａ

ＨＭＧＢＩ

Ｈｕｎａｎ４１０ＤＤ８，Ｃｈｉｎａ

ａｕｔｈｏｒ：ＱｔＵ

Ｙｕａｎ－ｚｈｅｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｘｙｑｙｚ＠ｍｅｄｍａｉｌ．ｃｏｒｎ．ｃｎ，

Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅ

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ

ｐｒｏｔｅｉｎｉｎ

ｔｉｓｓｕｅ

ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ

ＩＡｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ

ｏｆ

ｌａｒｙｎｇｅａｌｓｑｕａｍｏｕｓｅｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＬＳＣＣ）ａｎｄａｄｊａｃｅｎｔｎｏｒｍａｌＨＭＧＢＩｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

ｃａｓｅｓ

ｍｕｃ伪ａ．ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｏｆ

ｗｉｔｈｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｅｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｉｎＬＳＣＣ．ＭｅｔｈｏｄｓＮｉｎｔｙ－ｔｈｒｅｅ

ｃａｇｅｓ

ｏｆ

ｏｆＬＳＣＣａｎｄ１５

ａｄｊｃｅｎｔ

ｏｎ

ｍｕｃｏｓａｌ

ＩｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇＷａＳｐｅｒｆｏｒｍｅｄ

ｐｒｏｔｅｉｎ

ｓｔｕｄｙ．

ｐａｒａｆｆｉｎ－ｅｍｂｅｄｄｅｄｔｉｓｓｕｅｓｐｅｃｉｍｅｎｓｔｏｅｘａｍｉｎｅｔｈｅＨＭＧＢｌ

ｔｉｓｓｕｅ

ｓａｍｐｌｅｓ

ｗｅｒｅｉｎｃｌｕｄｅｄｉｎｔｈｉｓ

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｔｈｅｄａｔａｗｅｒｅｆｕｔｈｅｒｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｌｌｅｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆｔｈｅ

Ｔｈｅ

ｐｏｓｉｔｉｖｅ

ｒａｔｅｓ

ＬＳＣＣｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ

ｏｆＨＭＧＢｌ

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＬＳＣＣｓｐｅｃｉｍｅｎｓＷａｇ８７．１％，

ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｂｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅａｄｊｅｅｎｔｎｏｒｍａｌｍｕｃｏＢａｓａｍｐｌｅｓ（４６．７％，Ｐ＝０．００１），ａｎｄｉｔｓｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｉｏｎＷａＳｃｌｏｓｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＴｓｔａｇｅ（ｚ２＝１０．８７８，Ｐ＝０．００４），ｃｌｉｎｉｃａｌｓｔａｇｅ（疋２＝２１．１１５，

Ｐ＜０．０１），ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ（ｘ２＝２８．２９８，Ｐ＜ｏ．０１）ａｎｄｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ（ｒ＝１４．９２３，Ｐ＝ｏ．００１）ｉｎ

ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈ

Ｕ汇Ｃ．ＰａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＨＭＧＢｌｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｈａｄｂｏｔｈｐｏｏｒｅｒｄｉｓｅａｓｅ—ｆｒｅｅｓｕｒｖｉｖａｌａｎｄｐｏｏｒｅｒｏｖｅｒａｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｅｏｍｐａ陀ｄｗｉｔｈｔｈａｔｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｌｏｗＨＭＧＢＩｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ（Ｘ２＝１３．８１５，Ｘ２＝ｌＩ．９１２；ＢｏｔｈＰ＜０．０１）．ＵｎｉｖａｒｉａｔｅａｎｄｍｕｈｉｖａｒｉａｔｅＣｏｘｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｅｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔＨＭＧＢＩｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓａｌｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ

ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｆａｃｔｏｒｆｏｒ

ｐｒｏｔｅｉｎ

ｐａｔｉｅｎｔｓ

ｗｉｔｈＬＳＣＣ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓＴｈｅ

ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｔｈａｔＨＭＧＢｌ

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉ１１ＬＳＣＣｔｉｓｓｕｅｓ．ａｎｄＨＭＧＢｌｐｒｏｔｅｉｎｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉＳ

ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈａｐｏｏｒｅｒｐｒｏｇｎｏｓｉｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＬＳＣＣ．ＴｈｅｓｅｒｅｓｅｔｓｓｕｇｇｅｓｔｔｈａｔＨＭＧＢＩｍａｙｐｌａｙａ

ＩＸ）Ｉ：１０．３７６０／ｅｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３－３７６６．２０１２．０２．０１１

基金项目：国家自然科学基金（８１１７２５５８、８１０７１７５７、３０９０１６６４、３０８７２８５２）；高等学校博士学科点专项科研基金（２０１００１６２１１００３６、２００９０１６２１１００６５）；２０１０年湖南省研究生学位论文创新基金（ＣＸ２０１０８０５３）

作者单位：４１０００８长沙，中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科（刘勇、谢丛良、邱元正、田勇泉、张欣、黄东海、谭平清、余长云、柒琳、肖健云），病理科（李波）；长沙市第．一医院耳鼻咽喉科（周小娟）

通信作者：邱无正，Ｅｎｍｉｌ：ｘｙｑｙｚ＠ｍｅｄｍａｉｌ．ｃｏｌａ．ｃｎ

生堡旦生瘦盘查！Ｑ！！生！旦筮丝鲞箍；翅垦！遮』Ｑ堡丛：＆垒坐盟垫！！：！丛：丝ｔ盥！：！

ｃｒｉｔｉｃａｌｒｏｌｅｉｎｔｈｅｉｎｉｔｉａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆＬＳＣＣ，ｉｍｐｌｉｃａｔｉｎｇＨＭＧＢｌｍａｙｂｅｃｏｍｅｔｈｅｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｇｎｏｓｉｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＩ．ＳＣＣ．

ａ

ｖａｌｕａｂｌｅｍａｒｋｅｒｆｏｒ

【Ｓｕｂｊｅｃｔｗｏｒｄｓ】Ｌａｒｙｎｇｅａｌ

ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；

Ｎｅｏｐｌａｓｍｓ，ｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌ；ＨＭＧＢｌ

ｐｒｏｔｅｉｎ；

Ｎｅｏｐｌａｓｍｍｅｔａｓｔａｓｉｓ；Ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ

喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）为头颈部常见的恶性肿瘤之一，颈部淋巴结转移对其预后具有决定

性意义…。喉鳞癌患者一旦出现颈淋巴结转移，其５年生存率就下降到５０．Ｏ％；出现远处转移后，患者的５年生存率仅为２０％左右。因此，转移相关基因

的研究一直为头颈肿瘤的研究热点。高迁移率族蛋

白ｌ（ｈｉｇｈ

ｍｏｂｉｌｉｔｙｇｒｏｕｐｂｏｘ—ｌｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＭＧＢ１）在

多种人类恶性肿瘤中高表达，且与肿瘤的侵袭、转移密切相关【２】。我们曾在前期研究中成功构建了喉癌与癌旁组织的差异基因表达谱，ＨＭＧＢｌ则是其中

发现的差异表达基因＿Ｊ。本研究中，我们采用免疫组化技术检测ＨＭＧＢｌ蛋白在喉鳞癌组织中的表达

水平，同时结合临床随访资料，进一步探讨ＨＭＧＢｌ

蛋白与喉鳞癌患者临床病理特征和预后之间的相关性。

资料与方法

１．临床资料：喉癌和癌旁黏膜石蜡组织标本均由中南大学湘雅医院病理科提供。收集２００２年

１月至２００４年１１月间湘雅医院耳鼻咽喉科手术切

除的喉鳞癌标本９３例，癌旁黏膜１５例，均经病理学证实。９３例患者中，男８９例，女４例；年龄２７～踟岁，平均５８岁。全组患者均为第一次手术，术前均未接

受放、化疗等其他治疗。按１９９７年世界卫生组织（ＷＨＯ）病理分型标准，高分化６２例，中分化１７例，

低分化１４例。声门型６３例，声门上型２９例，声门下型１例。根据国际抗癌联盟（ＵＩＣＣ）ＴＮＭ（２００２）

喉癌分期标准，Ｔ１ＮＯＭ０期１５例，Ｔ２ＮＯＭ０期２６例，

Ｔ１Ｎ１

Ｍ０期ｌ例，Ｔ２Ｎ１Ｍ０期５例，Ｔ２Ｎ２Ｍ０期５例，

Ｔ３ＮＯＭ０期１９例，Ｔ３Ｎ１Ｍ０期７例，Ｔ３Ｎ１Ｍ１期ｌ例，Ｔ３Ｎ２Ｍ０期５例，Ｔ４ＮＯＭＯ期４例，Ｔ４Ｎ１Ｍ０期３例，Ｔ４Ｎ２ＭＯ期２例。Ｉ期１５例，Ⅱ期２６例，Ⅲ期３３例，Ⅳ期１９例。颈部淋巴结转移２９例，出现远处肺

转移１例。

２．免疫组织化学：所有标本均经４％中性甲醛

固定，常规石蜡包埋后４ｔｘｍ切片。采用北京中杉金桥公司ＰＶ－６００１二步法进行免疫组化检测。切片

脱蜡水化，经抗原修复后，３％去离子水阻断内源性过氧化物酶活性。滴加兔抗人ＨＭＧＢｌ多克隆抗体（美国Ａｂｅａｍ公司，１：５００稀释），４℃冰箱孵育过夜。

磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）洗涤后，滴加羊抗兔辣根过氧化物酶标ｉ２（ＨＲＰ）的ＩｇＧ多聚体，室温孵育３０

ｍｉｎ。

洗涤后二氨基联苯胺（ＤＡＢ）镜下控制显色。

３．结果判断：ＨＭＧＢｌ蛋白主要在肿瘤细胞胞核表达，以出现棕黄色染色为阳性。由２名病理科医生在完全不知患者资料的情况下，对染色结果进

行判断计分。采用７分评分制，光镜下随机观察色强度之和作为最终判定标准一】：（１）按阳性细胞

百分率：１％～２５％计为１分，２６％～５０％计为２分，染色强度：阴性为０分；淡黄色为弱阳性，计为１分；中度黄色为阳性，计为２分；棕黄色为强阳性，计为３分。将最终评分＞３分作为阳性表达。

４．随访：自手术当日起开始计算生存时间。通过门诊、电话及信访等方式进行随访。根据颈部触诊、超声、纤维喉镜、影像学诊断等检查结果及再次手术确定有无临床复发转移。以患者死亡、最后一

次随访时间（２００９年１２月１日）或失访作为随访结束点。有８９例患者获得随访，随访率为９５．７％。随

访时间为２—６０个月，中位随访时间为４７．４４个月。

５．统计学方法：采用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行

分析。计数资料均采用Ｘ２检验。Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ法计

算喉鳞癌患者的无瘤生存率和总体生存率；Ｌｏｇ

ｒａｎｋ

法比较组间生存率的差异。用多因素Ｃｏｘ比例风险回归模型分析喉鳞癌患者的性别、年龄、病理分级、肿瘤原发部位、Ｔ分期、临床分期、淋巴结有无转移及ＨＭＧＢｌ表达水平对喉鳞癌患者预后的影响。分别以Ｐ＜０．０５和Ｐ＞０．１０作为引入和剔除影响因素的筛选水平，以确定影响喉鳞癌患者预后的独立

危险因素。所有检验均为双侧检验，检验水准ｏｔ＝

０．０５。

结果

１．ＨＭＧＢｌ蛋白在喉鳞癌组织和癌旁黏膜中的

表达：ＨＭＧＢＩ蛋白阳性均呈棕黄色染色，且染色主

要定位于肿瘤细胞胞核（图１）。９３例喉鳞癌组织中，ＨＭＧＢｌ蛋白阳性表达为８１例，阳性率８７．１％；１５例癌旁黏膜组织中ＨＭＧＢｌ蛋白８例为阴性表

达，７例为阳性表达，阳性率为４６．７％。ＨＭＧＢＩ在

５个高倍镜（１０×４０）视野，以阳性细胞百分率和染

５１％一７５％计为３分；７６％一１００％计为４分；（２）按

虫堡雎瘤盘盛垫１２生！且苤翌壁星！捌笠！坚』Ｑ！！型：壁ｂ型！立垫ｌ！ｔ！些塑，ｊ！生

喉鳞癌组织与癣旁组织中的表达差异有统计学意义

（Ⅳ２＝１４．４６０，Ｐ＝Ｏ．００１）。

表１喉鳞癌患者临床病理特征与ＨＭＧＢ

表达水、Ｉ‘的相关性

黧

织中的表达情况

免疫组化ＰＶ石ＯＯｌ二步法

２

临床病理特征

ｇ虿巧可，值Ｐ值

ＨＭＧＢＩ蛋白表达水平

ｒ

ｏ

图ｉ高迁移率族蛋白１（ＨＭＧＢＩ）蛋白在喉鳞癌组织和癌旁组

ｘ

２００

ａ：

ＨＭＧＢＩ高表选（评分７分）；ｂ：ＨＭＧＢＩ中表达（评分５分）；ｃ：ＨＭＧＢＩ低表达（评分３分）；ｄ：ＨＭＧＢＩ弱表达（评分２分）

ＨＭＧＢｌ蛋白表达水平与喉鳞癌临床病理特

征之间的关系：ＨＭＧＢｌ蛋白与喉鳞癌临床病理参数之间的相关性研究结果见表１。在高Ｔ分期（Ｂ～Ｔ４期）、临床晚期（Ⅲ一Ⅳ期）、转移及复发的喉鳞癌中，ＨＭＧＢｌ蛋白表达量显著增加，差异有统计学

意义（均Ｐ＜Ｏ．０５）。而ＨＭＧＢｌ蛋白表达水平与患

洼：。有４例患者失访；ＨＭＧＢＩ：高迁移率族蛋白

者性别（Ｐ＝０，４８５）、年龄（Ｐ＝０．２９７）、组织学分级（Ｐ＝０．１０１）和肿瘤原发部位（Ｐ＝０．３７７）无关。

３．ＨＭＧＢｌ蛋白表达水平与喉鳞癌患者预后之

间的关系：本组患者的５年生存率为５９．６％，５年无瘤生存率为４３．８％，中位生存时间为（４８．５±１．９）个月。ＨＭＧＢＩ蛋白高表达组、中表达组和低表达组

患者的５年无瘤生存率分别为２７．８％、４３．９％与

９１．７％（∥＝１３．８１５，Ｐ＝０．００１；图２），５年总生存率分别为３８．９％、６８．３％与９１．７％（Ｘ２＝１１．９１２，Ｐ＝

０．００３；图３），生存时间分别为（４３．０±３．１）个月、（５０．９±２．９）个月和（５７．１±２．８）个月。

以患者的５年总生存率为凶变量（Ｙ），以患者性别、年龄、组织病理分级、肿瘤原发部位、Ｔ分期、

图２高迁移率族蛋白ｌ（ＨＭＧＢＩ）蛋白高、巾、低表达自Ｉ的喉鳞瘟患者的无瘤生存曲线

性别（Ｐ＝０．２１９）、组织学分级（Ｐ＝０３０１）与喉鳞

癌患者预后无关。进一步多因素Ｃｏｘ回归分析显

临床分期、淋巴结转移情况及ＨＭＧＢＩ蛋白表达水

平等为协变量（Ｘ），建立Ｃｏｘ回归模型。单因素分析结果显示，肿瘤原发部位（Ｐ＝０．００１）、Ｔ分期（ＪＤ＝

示，ＨＭＧＢＩ蛋白表达水平和淋巴结转移情况是喉鳞癌患者预后的独立影响因素（Ｐ＝０．０３６，Ｐ＝０．０２８；

表２）。

讨

论

０．０１１）、临床分期（Ｐ＜Ｏ．０１）、淋巴结有无转移（Ｐ＜０．０１）和ＨＭＧＢＩ蛋白表达情况（Ｐ＝０．００１）与喉鳞

癌患者预后显著相关；而患者年龄（Ｐ＝０．９６９）、

ＨＭＧＢｌ是一种存在于真核生物细胞内的非组

生生胜擅苤壶垫！至生！旦筮坠鲞筮！翅￡塾垫！Ｑ！型：壁！璺望盟垫！！：！亟：丝：堕！：兰

表２影响喉鳞癌患者预后的Ｃｏｘ多因素回归分析

注：ＨＭＧＢｌ：高迁移率族蛋白１

图３高迁移率族蛋白Ｉ（ＨＭＧＢｌ）高、中、低表达组的喉鳞癌患者的总生存曲线

本研究通过免疫组化技术证实，ＨＭＧＢｌ蛋白在移性喉鳞癌组织中的表达高于非转移性喉鳞癌组

织，与本研究结果一致。但本研究结果还显示，ＨＭＧＢｌ蛋白表达与喉鳞癌的Ｔ分期、临床分期和复

发密切相关；而与喉鳞癌患者的性别、年龄、组织学

分级和肿瘤原发部位等无明显相关性。

颈淋巴结转移对喉鳞癌患者预后具有决定性意义。本研究结果显示，ＨＭＧＢｌ蛋白表达与喉鳞癌患者的淋巴结转移密切相关，与ＨＭＧＢＩ蛋白在其他恶性肿瘤中的表达相一致Ｈ扣１。体内外实验证实，ＨＭＧＢＩ蛋白及其受体人晚期糖基化终末产物受体（ＲＡＧＥ）介导的信号通路能够调控肿瘤的侵袭转

移ｐＪ。ＨＭＧＢＩ蛋白作为一种核内蛋白，广泛表达

于肿瘤细胞胞核，一方面通过影响ｐ５３【ｓ】、ｐ７３【９】等

基因转录参与到肿瘤细胞生物学行为的调控；另一

方面，肿瘤细胞核内的ＨＭＧＢｌ蛋白亦可在肿瘤细胞坏死、缺氧、营养物质和生长因子缺乏等情况

下【ｌ驯，由肿瘤细胞被动释放到胞外，从而通过与其受体ＲＡＧＥ结合，并激活其下游信号通路促分裂素原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎ—ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）¨ｕ和核因子．（Ｂ（ｎｕｃｌｅａｒ

ｆａｃｔｏｒＫＢ，ＮＦ—

ＫＢ）¨２‘，亦可影响到肿瘤细胞的运动、侵袭和转移

能力。目前，关于ＨＭＧＢｌ在肿瘤侵袭转移中的具

体作用机制并不十分明确，有待于进一步深入研究。本研究结果表明，ＨＭＧＢＩ蛋白高表达组、中表达组和低表达组患者的５年无瘤生存率分别为

２７．８％．４３．９％和９１．７％（Ｐ＝０．００１），５年总生存

率分别为３８．９％、６８．３％和９１．７％（Ｐ＝０．００３），生存时间分别为（４３．０±３．１）个月、（５０．９±２．９）个月和（５７．１±２．８）个月。单因素分析结果显示，肿瘤原发部位、Ｔ分期、临床分期、淋巴结转移情况和

ＨＭＧＢＩ蛋白表达水平与喉鳞癌患者预后密切相关；

但多因素分析结果显示，ＨＭＧＢｌ蛋白表达水平和淋巴结转移情况是喉鳞癌患者预后的独立影响因素。这提示ＨＭＧＢＩ蛋白表达与喉鳞癌患者的预后呈显

著负相关，有可能成为一种评估喉鳞癌患者术后预

后的有价值的分子标志物。但值得注意的是，在传统的判定临床预后的变量中，本研究结果中只有淋巴结转移与预后有关，而Ｔ分期、临床分期、肿瘤原发部位和肿瘤病理学分级等与预后无关，这可能与患者的构成、免疫状态、术式的选择、医师的手术水平和术后有无并发症等多种综合因素有关所致。总之，结合ＨＭＧＢＩ在多种恶性肿瘤中高表达及其在肿瘤发生发展中的作用，进一步深入研究ＨＭＧＢｌ在恶性肿瘤中的作用机制，将有可能使ＨＭＧＢｌ成为今后生物治疗的一个新靶点。

志谢中南大学湘雅医院医学研究中心冯雪萍老师对本研究的悉心指导和帮助

参考文献

［１】杜强．季文樾，关超，等．手术切除治疗喉癌的预后分析．中

【２］Ｋ咖Ｎ，刁枷Ｓ，Ｕｇｒｉｎｏｖａ

华肿瘸杂志，２００６，２８：２１１－２１３．

Ｉ。ｄａ１．Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ０ｆＩ－１ＭＧＢＩｐＩ喇ｎ

ａｎｄｉｔｓｒｅｃｅｐｔｏｒ

ＲＡＧＥ

ｉｎｈｕｍａｎｍａｌｉｇｎａｎｔｔｍｌｍｃｇ．ｂｌｏｌ

ｃｅｌｌ

Ｂｉｏｃｈｅｍ。２０１０，３３７：２５１－２５８．

蛋白染色体结合蛋白，由于其在凝胶电泳中迁移速度快的特征而又被命名为高迁移率蛋白，它参与了基因转录和ＤＮＡ修复等多种生物学过程。长期以来，ＨＭＧＢｌ作为一种霞要的炎症介质或致炎细胞因子，在关节炎、肝炎等非炎症性和自身免疫性疾病中研究较多。近年来，ＨＭＧＢｌ在肿瘤中的作用亦逐渐

受到人们关注。

喉鳞癌组织中的表达较癌旁组织显著上调，且其高表达与喉鳞癌的Ｔ分期、临床分期、转移和复发密

切相关。上官翰京等【５１通过免疫组织化学技术在

２７例喉鳞癌标本和１４例声带息肉标本中检测

ＨＭＧＢｌ蛋白表达情况，结果显示，ＨＭＧＢｌ蛋白在转织，在喉鳞癌组织中的表达高于对照组声带息肉组

１３６

生堡艘瘗盘盍垫！！生！旦筮丝鲞筮！魍垦！也』Ｑ塾型：堂！翌垫１２：！！！：丝：№：兰

ｆ９］Ｓｔｒｏｓ

Ｍ，ＯｚａｋｉＴ，ＢａｃｉｋｏｖａＡ，ｅｔａ１．ＨＭＧＢｌ

ｄｏｗｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｅ

［３］马丽娟，田勇泉，肖健云，等．激光捕获显微切割及基因芯片

技术构建喉鳞状细胞癌仝基因组表达谱．中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，２００８，４３：６９６－７００．

［４］ＷｕＤ，ＤｉｎｇＹ，ＷａｎｇＳ，ｅｔａ１．１ｎｅｒｅａａｃｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｈｉ出ｍｏｂｉｌｉｔｙ

ｇｒｏｕｐｂｏｘ

ａｎｄＨＭＧＢ２ｃｅｌｌ．ｐｒｏｍｏｔｅｒ．ＪＢｉｏｌ

ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ

ｐ５３一ａｎｄ

ｐ？３一ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｓｅｑｕｅｎｃｅ—

ｓｐｅｃｉｆｉｃｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｉｏｎｆｒｏｍｔｈｅｈｕｍａｎＢａｘｇｅｎｅＣｈｅｍ，２００２，２７７：７１５７－７１６４．

ｌ（ＨＭＧＢＩ）ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｐｏｏｒ

ｐｍｇｕｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ．ＪＰａｔｈｏｌ，２００８，

２１６：１６７—１７５．

［１０］ＲｅｉｓｍａｎｎＭ，ＷｅｈｉＴｕａｎｎ

ｈｙｐｏｘｉａ

Ｆ，ＳｃｈｕｋｆｅｈＮ，ｅｔａ１．Ｃａｒｂｏｎｄｉｏｘｉｄｅ，

ｔｏ

ａｎｄｌｏＷｐＨＩｃａｄ

ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

ｏｆＣ－ｍｙｃａｎｄＨＭＧＢ—ｌ

ｏｎｅｏｇｅｎｅｓｉｎｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａｃｅＫｓ．Ｅｕｒ２２４－２２７．

ＪＰｅｄｉａｔｒＳｕｒｇ。２００９，１９：

ａｔ

［５］上官翰京，李志春，张晖萍。等．喉鳞状细胞瘕中ＲＡＧＥ与

ａｍｐｈｏｔｅｆｉｎ的表达．山东大学耳鼻喉眼学报，２００６，２０：２０４－

２０５．

ｆ１１］ＧｈａｖａｍｉＳ。ＲａｓｈｅｄｉＩ。ＤａｔｔｉｌｏＢＭ．ｅｔａ１．Ｓ１００Ａ８／Ａ９

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｐｒｏｍｏｔｅｓｔｕｍｏｒｃｅｌｌＭＡＰ１４９２．

ｌｏｗ

［６］郝权．杜晓琴，付欣，等．高迁移率族蛋白１及晚期糖基化终

产物受体在寓颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义．中华肿瘤杂志，２００８，３０：２９２－２９５．【７

ＴａｇｕｃｈｉＡ，Ｂｌｏｏｄａｍｐｈｏｔｅｒｉｎ

ＤＣ．ｄｅｌＴｏｒｏＧ，ｅｔ

ｔｕｎｌｏｕｒ

ｇｒｏｗｔｈｖｉａＲＡＧＥ

ｋｉｎａｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐａｔｈｗａｙ．ＪＬｅｕｋｏｃＢｉ０１．２００８，８３：１４８４—

ｔｏ

ｌｉｇａｔｉｏｎａｎｄ

［１２３ＰａｌｕｍｂｏＲ，ＧａｌｖｅｚＢＧ，ＰｕｓｔｅｒｌａＴ，ｅｔａ１．ＣｅｉｌｓｍｉｇｒａｔｉｎｇｏｆｔｉｓｓｕｅｄａｍａｇｅｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅＮＦ－ｋａｐｐａＢ

ｔｏ

ｓｉｔｅｓ

ａ１．Ｂ１０ｃｋａｄｅ

ｇｒｏｗｔｈａｎｄ

ｏｆ

ＲＡＧＥ．

ｔｈｅｄａｎｇｅｒｓｉｇｎａｌＨＭＧＢＩｒｅｑｕｉｒｅ

ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ

ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．

ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｊ

Ｃｅｌｌ

Ｂｉｏｌ，２００７。１７９：３３－４０．

Ｎａｔｕｒｅ，２０００，４０５：３５４－３６０．

［８］Ｓｔｒｏｓ

Ｍ，Ｍｕｓｅｈｋｏｖａ－Ｐｏｌａｎｓｋ６Ｅ，ＰｏｓｐｉｓｉｌｏｖｆｉＳ，ｅｔａ１．Ｈｉｇｈ—ａｆｆｉｎｉｔｙ

ｏｆ

ｔｕｍｏｒ－ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ

ｐｒｏｔｅｉｎ

ｂｉｎｄｉｎｇｐ５３

ａｎｄＨＭＧＢＩｔｏ

（收稿臼期：２０１０—１１－１６）

ｈｅｍｉｃａｔｅｒｍｔｅｄＤＮＡｌｏｏｐｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００４．４３：７２１５－７２２５．

６１例弥漫大Ｂ细胞淋巴瘤不同预后类型的Ｉ临床特征分析

王倩魏旭东

尹青松朱兴虎

张龚莉

李玉富刘艳艳杨树军

宋永平

【主题词】淋巴瘤，非霍奇金；诊断；免疫组织化学；治疗结果

【Ｓｕｂｊｅｃｔｗｏｒｄｓ】Ｌｙｍｐｈｏｍａ，ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ；Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ

弥漫大Ｂ细胞淋巴瘤（ｄｉｆｆｕｓｅ

ｌａｒｇｅＢｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ，

ｏｕｔｃｏｍｅ

一、资料与方法

１．一般资料：河南省肿瘤医院２００８年２月至２０１０年８月收治的６１例ＤＬＢＣＩ．患者中，男３５例，女２８例；中位年龄５６岁，平均年龄５３．５岁。将原发部位肿瘤活枪病理标本切片，常规ＨＥ染色和两步法免疫组化染色，标记ＣＤ２０、

ＣＤ７９．ＣＤ３、ＣＤ５、ＣＩＭ５ＲＯ、Ｋｉ－６７，Ｖｉｍ，ＣＫ、ＣＤＩＯ？Ｂｃｌ－２，Ｂｃｌ－６

ＤＬＢＣＬ）具有异质性，患者预后术一，目前主要应用临床指标进行临床分期并判断预后…。但国际预后指数（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ

ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ

ｉｎｄｅｘ，ＩＰＩ）相同的患者预后仍不同，尚无一个客观

指标能将其内在生物学预后因素揭示出来。随着分子生物学技术尤其是基因芯片技术的发展，ＤＩ．ＢＣＬ基因表达谱的差异已被揭示旧１。根据基因芯片的研究结果，选取３个基因表达产物，即ＣＤｌ０、ＢＣＬ－６和ＭＵＭｌ，通过免疫组化方法把ＤＬＢＣＬ分为生发中心Ｂ细胞，ｌ！！（ｇｅｒｍｉｎａｌ

ｃｅｎｔｅｒ

和ｍｕｍ－１，必要时标记ＡＬＫ、ＥＢＶ、ＨＴＬＶ和ｃｙｃｌｉｎＤｌ等免疫标志。／＞３０％的肿瘤细胞着色判定为阳性。

２．诊断标准：按Ｈａｎｓ分类标准卜１进行分型，即ＣＤｌ０＋或ＣＤｌ０一、Ｂｃｌ－６＋、ＭＵＭＩ一者为ＧＣＢ型，其他为ｎｏｎ．ＧＣＢ型。所有患者均行腹部、颈、腋窝、腹股沟、腹膜后淋巴结彩超和胸部ＣＴ检查（若条件允许则行ＰＥＴ ｃＴ检查）和骨髓细胞学检查，按Ａｎｎ－Ａｒｂｏｒ分期系统进行临床分期。

３．疗效评价：应用２１

ｄＣＨＯＰ

Ｂ－ｃｅｌｌｌｉｋｅ，

ｃｅｎｔｅｒ

ＧＣＢ型）和非牛发中心Ｂ细胞型（ｎｏｎ—ｇｅｒｍｉｎａｌ

Ｂ ｃｅｌｌ

ｌｉｋｅ，ｎｏｎ．ＧＣＢ型），ＧＣＢ型患者的预后显著优于ｎｏｎ－ＧＣＢ型患者【３】。由于以上研究结果和结论均为国外报道，关于中围人ＤＬＢＣＩ．两种亚型的发生比例及临床特点报道尚少，我们将河南省肿瘤医院２００８年２月至２０１０年８月收治的６ｌ例ＤＬＢＣＩ．患者，根据免疫组化方法进行分型，对两种亚型的比例和临床特征进行观察，现将结果报告如下。

４－Ｒ方案化疗：利妥昔单

抗３７５ｍｇ／ｍ２，化疗开始前ｌｄ；环磷酰胺Ｏ．７５ｇ／ｍ２，第１、８天；长春地辛３ｍｇ／ｍ２，第１、８天；吡柔比星４０ｍｇ／ｍ２，第ｌ、８天；强的松６０｜ｌＩｇ，第１—１２天；根据患者病情酌情增减化疗剂量。３个周期化疗后复查胸部ＣＴ和淋巴结彩超（或ＰＥＴ—ｃｒｒ）。根据国际修订版恶性淋巴瘤疗效评价标准评价近期疗效，分为完全缓解（ＣＲ）、部分缓解（ＰＲ）、稳定（ｓＤ）和进展（ＰＤ）。

４．统计学方法：应用ＳＰＳＳ１３．０软件，比较原发部位、临床分期、累及部位、Ｂ症状、疗效在ｎｏｎ．ＧＣＢ型、ＧＣＢ犁的构

ＤＯＩ：１０．３７６０／ｅｍａ，ｊ，ｉｓｓｎ．０２５３－３７６６ ２０１２．０２．０１２

基金项目：国家自然科学基金（８１０００９２１）；河南省科技创新杰出人才计划（杰出青年）项目（０８４１００４１００１９）；河南省医学科技攻关项目计划（２００８０２０１６）

作者单位：４５０００８郑州大学附属肿瘤医院血液科河南省血液病研究所血液科

通信作者：魏旭东，Ｅｍａｉｌ：ｘｄｗｅｉ２０００＠ｙａｈｏｏ．ｔｏｍ

成比差异有无统计学意义，统计学分析采用，检验，检验水