西藏玛咖对小鼠抗疲劳作用的初步研究_柳琴

中国药师

2015年第18卷第3期ChinaPharmacist2015，Vol．18No．3

确定各特征峰的相对保留时间，同时测定活性成分的含量。本研究加入芦丁参照物对各特征峰定位，确定各特征峰的相对保留时间及峰3、峰4的相对峰面积。经方法学验证、耐用性试验及15批样品试验，确定供试品特征图谱中应呈现5个其相对保留时间应在规定的±5%之内，峰3、峰4相特征峰，

0．66，对峰面积不低于0．23、能有效控制白背叶根的质量。3．2

特征图谱提取溶剂分别考察石油醚（60～90℃）、乙酸70%乙醇、乙酯、乙醇、甲醇，结果用甲醇为溶剂提取，所得供试品色谱信息较丰富，杂质较少，峰形良好。流动相考察了等度洗脱和梯度洗脱，结果梯度洗脱既缩短时间又将各成分峰有效分离。3．3

测定波长的选择，采取二极管阵列检测器检测，提取各在220～240nm波长下所得色谱峰的信息量波长下色谱图，

260～300nm波长下所得色最多，但该波长段基线噪音大，320～340nm波长下所得色谱峰的信息量谱峰的信息较少，

多，各色谱峰面积、高度适中，分离度好，各主要色谱峰最大吸收波长多在328nm，所以确定检测波长为328nm。3．4

本特征图谱检查，规定各特征峰的相对保留时间，耐用性考察5种不同品牌色谱柱在同一高效液相色谱仪中试验，

有3根色谱柱各特征峰相对保留时间的ＲSD大于规定值±5%，提示要规定色谱柱。

参

1

考文献

南京中医药大学．中药大辞典（上册）［M］．上海科学技术出版

2005．1006社，

2国家中医药管理局《中华本草》．第5册上编委会．中华本草［M］

1999．827-829海科学技术出版社，

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［J］．中药材，2002，25（3）：185-187氧化作用的实验研究

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J］．时珍国医国药，2006，17（8）：1437-1438验研究［

5徐舒，呂志平，蔡红兵，等．白背叶根抗鸭乙型肝炎病毒的实验研

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2012，43（8）：1489-1491药，

8李吉来，陈飞龙，吕志平．白背叶根挥发性成分的研究［J］．中药

2003，26（10）：723-724材，

9广西壮族自治区卫生厅．广西中药材标准［S］．第2册．1996．90-92

10中国药典［S］．2010年版．一部．130

（2014-06-20收稿2014-12-26修回）

西藏玛咖对小鼠抗疲劳作用的初步研究

柳琴

摘

1

程贝

2

（1．武汉市普仁医院药学部武汉430018；2．湖北省新华医院药学部）

要目的：探讨西藏玛咖抗疲劳作用的机制。方法：分别以西藏玛咖干粉和其醇提液喂养小鼠，通过小鼠负重游泳实

测定西藏玛咖对小鼠血乳酸浓度、血清乳酸脱氢酶（LDH）、负重小鼠游泳时间、小鼠运动后血清尿素氨水平，比较西藏玛验，

2，3组小鼠的血清LDH活力明显高咖干粉与醇提液的抗疲劳作用效果。结果：灌胃小鼠30d后，服用玛咖干粉与醇提液1，2，3组的小鼠运动后血乳于对照组（P＜0．05）；小鼠负重游泳时间也明显高于对照组（P＜0．05）。服用玛咖干粉与醇提液1，

酸浓度则明显低于对照组（P＜0．05）。结论：西藏玛咖能够提高负重后小鼠游泳的时间，降低游泳后血清尿素氨的水平和血乳酸的浓度，提示西藏玛咖干粉与醇提液具有显著的抗疲劳功效。关键词

西藏玛咖；血乳酸；乳酸脱氢酶；血清尿素氨；抗疲劳

文献标识码：A

049X（2015）03-0511-03文章编号：1008-中图分类号：Ｒ285．5

PreliminaryＲesearchonAnti-fatigueEffectofTibetMacainMice

LiuQin1，ChengBei2（1．DepartmentofPharmacy，WuhanPurenHospital，Wuhan430018，China；2．DepartmentofPharmacy，Xin-huaHospitalofHubeiProvince）

ABSTＲACTObjective：Toexploretheanti-fatigueeffectofTibetmacainmice．Methods：Themicewererespectivelygiventhe

powderorthealcoholextractofTibetmaca．Thelacticacidconcentrationinblood，serumlactatedehydrogenase（LDH），thetimeofweightloadingswimmingandserumureaammonialevelaftertheexerciseinthemiceweredetected，andtheanti-fatigueeffectofthe

dayfeeding，theserumLDHactivityofthemicepowderandthealcoholextractofTibetmacawascompared．Ｒesults：Afterthe30-takingthepowderoralcoholextractofTibetmacawasobviouslyhigherthanthatofthemiceinthecontrolgroup（P＜0．05），thetime

ofweightloadingswimmingwassignificantlylongerthanthatinthecontrolgroup（P＜0．05），andthebloodlacticacidconcentrationaftertheexercisewasobviouslylowerthanthatinthecontrolgroup（P＜0．05）．Conclusion：Tibetmacacanimprovethetimeofweightloadingswimmingofmice，andreducethelevelofserumureaammoniaafterexerciseandbloodlacticacidconcentration，sug-gestingthepowderandalcoholextractofTibetmacahaveobviousanti-fatigueeffect．

KEYWOＲDSTibetmaca；Bloodlacticacid；Lactatedehydrogenase；Serumureaammonia；Anti-fatigue

玛咖（LepidiummeyenniiWalp．）作为一种药食两用的植

通讯作者：柳琴

Tel：18672771345

E-mail：4262467@qq．com

物，它含有多种均衡合理的营养成分及生理活性的次生代谢

511

www．zgys．org

产物，具有多种生理活性和保健治疗功能。玛咖原产自秘鲁主要分布在秘鲁比较狭小的海拔3500m以上的安第斯山区，地理生态区

［1］

研究简报

1．7

血清中乳酸与乳酸脱氢酶的测定

对小鼠连续灌胃给药30d后，与末次给药30min后，负重游泳后取出，休息15min后立即采用摘眼球取血，然后对血液乳酸与乳酸脱氢酶活性进行测定，乳酸用全血乳酸分光光度法测定，乳酸脱氢酶用试剂盒测定，酶活性单位用U·ml－1表示，试剂盒由北京中生生物工程技术有限公司提供，观察各组对小鼠血乳酸及乳酸脱氢酶的影响。1．8

血清尿素氮含量的测定

连续灌胃给药30d后，于末次给药30min后，无负重游泳90min以后，摘除眼球取血，分离血清，按照试剂盒的方法测定血清尿素氮含量。1．9

统计学方法

使用SPSS13．0统计软件进行数据分析，计数资料采用

2

±s表示，χ检验比较，计量资料以x珋组间比较采用方差分

，如今在我国西藏、云南等地被大量引种。

玛咖的根在秘鲁数千年来作为食物与药物被广泛使用，在传统上，玛咖用于提高生育力、改善性功能、抗疲劳增强体质、调节内分泌系统已经缓解女性更年期综合征等如高珊等报道秘鲁玛咖具有显著的抗疲劳作用，

［3］

［2］

。文献

进行了传

统缓解体力疲劳中药西洋参与玛咖抗疲劳的对比试验，初步证明了玛咖具有抗疲劳的作用。玛咖中抗疲劳的有效成分可玛咖酰胺、牛磺酸和苄基芥子油苷等，这能主要包括氨基酸、

些天然植物成分在抗疲劳上有明显的效果。本文通过动物实验对西藏玛咖抗疲劳的功效进行初步的验证。报道如下。11．1

材料与方法仪器

旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；水浴锅（巩义市予华仪器有限责任公司）；超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；动物送风设备（苏州市苏杭动物仪器设备厂）；电子天平（上海精密科学仪器有限公司）。1．2

试药

玛咖（西藏玛咖种植开发有限公司）经华中师范大学生命科学植物分类学教授鉴定为十字花科类植物玛咖（Lepidi-ummeyenniiWalp），批号为20130612；乙醇（国药集团化学试剂有限公司）；其他试剂均为分析纯。1．3

动物

ICＲ小鼠，体质量20g左右，湖北防疫中心提供，许可证0003。所有动物均无病原菌，号：SCXK（鄂）2008-自由饮食。1．4

玛咖醇提物的制备

取10g粉碎的玛咖粉末，用150ml70%的乙醇水溶液在60℃条件下磁力搅拌，回流水浴20min，然后再超声提取5min。抽滤，收集滤液。重复以上步骤再提取一次。合并于50℃下减压旋转蒸发至近干，然后用10ml两次的滤液，

水溶解。制备好玛咖醇提取物之后放置于4℃冰箱备用。1．5

动物分组和给药方法

小鼠经过初步的游泳训练，挑选60只游泳能力相近的小鼠随机分为5组，每组12只。标记分别作为对照组、玛咖2，3。待小鼠适应饲养环境3d之后，玛咖醇提组1，干粉组、

每天上午9～10时灌胃给药，对照组喂普通饲料，自由饮水；

－1

玛咖干粉组喂食玛咖干粉的混合饲料，含玛咖2g·kg，剂

析。P＜0．05为差异有统计学意义。22．1

结果

玛咖干粉与玛咖醇提物对实验小鼠游泳时间的影响1，2，3组都与对照组比较，玛咖干粉组与玛咖醇提物，能够显著增加小鼠的游泳时间，差异有统计学意义（P＜0．05）。各玛咖醇提组与干粉组相比，差异均无统计学意义（P＞0．05）。见表1。2．2

西藏玛咖对实验小鼠血清乳酸及乳酸脱氢酶活性的测实验前，各组实验小鼠的血清乳酸浓度、血清乳酸脱氢酶活力比较，差异无统计学意义（P＞0．05）。与实验前比2，3组血清乳酸浓度较，实验后玛咖干粉组与玛咖醇提物1，明显降低，血清乳酸脱氢酶活力明显提高，差异均有统计学实验后玛咖干粉组与玛咖意义（P＜0．05）。与对照组比较，

2，3组血清乳酸浓度明显降低，醇提物1，血清乳酸脱氢酶活2，3力明显提高（P＜0．05）；而玛咖干粉组与玛咖醇提物1，组两两比较，差异均无统计学意义（P＞0．05）。见表2。

表1

±s）西藏玛咖对实验小鼠游泳时间的影响（x珋

n

1212121212

（min）

8．4±1．412．9±2．1a12．1±2．1a13．1±2．6a13．9±2．9a

对照组玛咖干粉组玛咖醇提组1玛咖醇提组2玛咖醇提组3

定结果

a

P＜0．05。注：与对照组比较，

表2

分组对照组

玛咖干粉组玛咖醇提组1玛咖醇提组230．05。

±s）小鼠血乳酸浓度的变化（x珋

U·ml－1）实验后

431±57609±51ab585±34ab592±38ab601±43ab

10，20倍运算，不足补给普通饲量根据成人食用剂量的5，

2，3灌胃玛咖醇提物0．2ml，自由饮水；玛咖醇提组1，浓料，

2，3g·kg－1，度分别为1，喂食普通饲料，自由饮水。连续灌胃给药30d后进行功能评价。1．6

小鼠游泳能力测定实验

连续给药30d，最后1d小鼠喂食灌胃30min后，进行负重游泳实验

［4］

LDH活力（血乳酸浓度（mmol·L－1）

实验前实验后实验前11．42±0．3711．32±0．31420±54

ab

11．03±0．329．28±0．42423±5310．95±0．289．29±0．52ab427±5610．98±0．299．21±0．41ab429±5811．18±0．31ab431±59

abP＜0．05；与对照组实验后比较，P＜注：与同组实验前比较，

。小鼠负重（6%体重质量铁皮），放入水温

25℃±1℃、水深30cm自制的水槽中游泳，记录小鼠从入水至运动疲劳时的游泳时间（注：游泳疲劳指小鼠沉入水中10s不能浮起的状态［5］）。

2．3西藏玛咖对小鼠运动后血清尿素氮水平的影响2，3组的血清尿素氮水平明玛咖干粉组与玛咖醇提1，

显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）。各玛咖醇提

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