西洋参对_相酶和抗氧化途径的不同诱导作用_马腾
上传者:陈远明|上传时间:2015-04-28|密次下载
西洋参对_相酶和抗氧化途径的不同诱导作用_马腾
现代药物与临床 ModernPharmacyandClinic 2009年第24卷第5期
白灵菇新鲜子实体匀浆化后浸泡,上清液滤过,透析。粗提物经CM-Sepharose柱、DEAE-Sepha-rose柱、Sephacry1S-200柱分离,多种缓冲液等洗脱,得到溶血蛋白部位。按照Lowry等描述的方法,用结晶的牛血清白蛋白(BSA)测定nebrodeoly-sin的量。采用凝胶滤过和SDS-PAGE,分析nebro-deolysin及其相对分子质量。按照Tomita等描述的方法进行溶血试验;用MTT试验测定nebrodeoly-sin对肺癌Lu-04、乳腺癌Bre-04、肝癌HepG2、L929、HeLa等5种肿瘤细胞增殖的抑制作用;用相差显微镜观察以nebrodeolysin处理后,肿瘤细胞的形态学改变;以电泳法分析L929细胞;通过测定试药对病毒的致细胞病变(CPE)的抑制作用,观察ne-brodeolysin的抗病毒作用。结果显示,nebrodeoly-sin的相对分子质量为217@104。该溶血蛋白具很强的溶血活性,在25e、30min内,011Lg/mL的该品就可以引起50%兔血细胞溶解。在25e下,将兔血细胞暴露给011或013Lg/mL的该蛋白30min,分别约有50%、90%的细胞内钾离子外渗。MTT试验显示,上述5种不同的肿瘤细胞经011、1、5、10、20、40、60Lg/mL该蛋白处理24h后,40Lg/mL时的细胞生长抑制率达50%以上。荧光显微镜观察可见,在该蛋白作用下,L929细胞、HeLa细胞出现典型的凋亡形态学改变,如核仁致密黄染、染色质固缩、核碎片化及细胞核体积缩小等,而另外3种细胞未观察到凋亡改变。琼脂糖凝胶电泳分析显示,用该蛋白处理L929细胞24h后,细胞DNA出现明显的凋亡条带,而作用12h该现象并不明显,表明其诱导L929细胞凋亡呈时间相关。抗病毒实验结果显示,nebrodeolysin在亚毒性浓度无CPE抑制作用,仅对HIV-1(ÓB)复制有抑制作用,EC50为214pmol/L。Nebrodeolysin对HEL细胞、Vero细胞的细胞毒浓度为317@10
-4
-3
315
补充和替代治疗。西洋参PanaxquinquefloliumL1与人参为同属植物,其活性成分人参皂苷的量高
于人参。西洋参提取物(AG)可诱导Ò相代谢酶-醌还原酶的活性,并且具有体外抗氧化活性,其对Ò相代谢酶的诱导可引起其与叠氮胸苷(ZDV)、阿巴卡韦等的药代动力学相互作用,从而降低这类药物的血浆浓度、增加治疗失败的风险和耐药性。研究了服用西洋参产品是否影响叠氮胸苷及其葡糖苷酸(GZDV)在体内的清除率,并采用2个氧化应激标记物检测西洋参是否具有抗氧化作用。
10名健康受试者参加了此项开放标签、单序列、2期的临床试验。参试者的药代动力学血样的采集分2个阶段:控制饮食12d,采集血样,期末单次量口服ZDV300mg/kg;尔后服用AG胶囊(每日服用2粒,每粒约含西洋参干燥提取物HT1001100mg)+控制饮食12d,AG给药2周。在最后一次服用AG胶囊后2h,再次服用ZDV,于每次服用ZDV后0125、015、0175、1、115、2、215、3、4、5、6、8h采集血样,用HPLC测血浆中ZDV的浓度。收集服用AG胶囊前、给药期间0~4h、给药后4~8h的尿液样品,分析ZDV的代谢情况。结果显示,HPLC法测得AG中人参总皂苷的质量分数约8148%,未发现与AG或ZDV相关的副反应。与单独服用ZDV相比,加服AG12d后,血浆中ZDV浓度无明显改变;AG对ZDV及GZDV清除的形式[服用AG前后的比值为1117,90%置信区间为0195~1145]、总清除率(服用AG前后的比值为0197,90%置信区间为0182~1114)以及血浆中ZDV的AUC0-8(服用AG前后的比值为1103;90%置信区间为0187~1121)无明显影响;仅尿液中GZDV的回收率在服用AG后提高了21%。于服用ZDV后0、2、8h采集血样,用GC-MS与负化学电离联用法分析给予AG后,对氧化应激标记物F2-异前列烷的影响;采用GC-MS测定尿样中的8-羟基-脱氧鸟苷(8-OHdG)。结果表明AG可减少这些氧化应激标记物(给药前后F2-异前列烷的比值为0179;90%置信区间为0172~0186;8-OHdG的这2个参数分别为0174,0159~0192)。以上结果表明服用西洋参提取物2周后,ZDV的药代动力学参数未发生明显改变,只减少氧化应激标记物。
(马 腾摘 姚庆强校)
Lmol/L,对HeLa
细胞的为714@10Lmol/L。以上实验表明,从白灵菇中分离的新的溶血蛋白nebrodeolysin具强的细胞毒活性,能够诱导肿瘤细胞凋亡和抗HIV-1。
(高 洋摘)
西洋参对Ò相酶和抗氧化途径的不同诱导作用1英2/LeeLS,MJClinPharmacol1-2008,48(5)1-599~609
HIV感染者中约有34%的患者接受人参作为
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