西洋参超微粉与细粉中人参皂苷Rb_1的溶出度比较研究_翟旭峰

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西洋参超微粉与细粉中人参皂苷

Rb1的溶出度比较研究

翟旭峰,张??晨,郭晓蕾

(南方李锦记有限公司,广东广州510665)

????摘要??目的:探讨西洋参制成微粉与细粉相比体外溶出情况的变化。方法:用HPLC测定不同时间点西洋参微粉(粒径99%以上分布在0~30??m)与细粉(约180??m)中人参皂苷Rb1溶出的量,并观察西洋参微粉与细粉中人参皂苷Rb1在透析袋中的溶出情况。结果:西洋参微粉中人参皂苷Rb1溶出的速度和程度均较细粉有明显的提高(15~45min,P<0??05;45~60min,P<0??01)。结论:西洋参制成微粉后,能大大改善其有效成分的溶出速率和溶出效率。

关键词??西洋参;超微粉;细粉;人参皂苷Rb1;溶出度

中图分类号:R284??2????文献标识码:A????文章编号:1001??4454(2009)02??0290??03

ComparingtheDissolutionofRb1fromtheMicropowderandCommon

PowderofRadixPanacisQuinquefolii

ZHAIXu??feng,ZHANGChen,GUOXiao??lei

(NanfangLeeKumKeeCo??,Ltd,Guangzhou510665,China)

Abstract??Objective:TocomparethedissolutionofRb1fromthemicropowderandcommonpowderofRadixPanacisQuinquefoliiinvitro??Methods:ThecontentsofGinsenosideRb1inmicropowder(99%over0~30??m)andcommonpowder(180??m)withandwith??outthebarrierofdialyticmembraneweredeterminedatdifferenttimebyHPLC??Results:ThespeedanddegreeofdissolutionofGinsen??osideRb1inmicropowderwerebetterthanthoseincommonpowder(15~45min,P<0??05;45~60min,P<0??01)??Conclusion:ThedissolutionofeffectivecomponentsinRadixPanacisQuinquefoliicanbeimprovedbySFCT??

Keywords??RadixPanacisQuinquefoli;iMicropowder;Commonpowder;GinsenosideRb1;Dissolution

????为了使中药有效成分能最快地和最大限度地溶出,提高生物利用度,改变中药起效缓慢、作用温和的特点,使其高效快速的发挥急救药疗效,专家提出了微米中药的新概念

??1??

1??材料与仪器

1??1??药材与试剂??西洋参购自广东康美药业股份有限公司,分别制成超微粉(约30??m)和细粉(约180??m);人参皂苷Rb1对照品(批号110704??200420,中国药品生物制品检定所提供);透析袋(相对分子量为8000~12000);甲醇为分析纯,乙腈为色谱纯,水为双蒸水。

。为了验证超微粉碎技术

能提高中药有效成分的溶出速度和溶出量,笔者采用超微粉碎技术与普通粉碎技术将西洋参加工成不同粒径的粉末,研究考察了其体外溶出性能的差异。

收稿日期:2008??04??10

:(??男,,;l020??Emai:lxf_zha@inflkk??com

JournalofChineseMedicinalMaterials????第32卷第2期2009年2月??291??

1??2??仪器??Agilent高效液相色谱仪(1200型,DAD检测器,Agilent中文化学工作站);ZRS??8C型智能溶出仪(天津大学无线电厂)。2??方法与结果

??2,3??

到含量测定要求,人参皂苷Rb1的保留时间约为

57??3min。

??表1时间(min)0~2525~6060~9090~110

??流动相配比表流动相A(%)

19??2020??4040??5555??60

流动相B(%)

81??8080??6060??4545??40

2??1??样品制备

2??1??1??桨法干粉样品:分别取西洋参超微粉与细粉约1g,精密称定,投入溶出仪中,按照中国药典(2005年版二部附录XC)溶出度测定法,以500mL水为溶剂,桨法,转速为50r/min,温度为(37??0??5)??,分别于5、10、15、30、45、60min取样2mL,同时向溶出杯中补充相同温度和体积的水,滤过,取续滤液过0??45??m滤膜,取10??L用HPLC测定人参皂苷Rb1的含量。计算不同时间人参皂苷Rb1的溶出百分率。

2??1??2??转篮法干粉样品:分别取西洋参超微粉与细粉约1g,精密称定,置入透析袋中,扎紧两端,按照中国药典(2005年版二部附录XC)溶出度测定法,以500mL水为溶剂,转篮法,转速为100r/min,温度为(37??0??5)??,分别于2、4、6、8、10、12、14、16、20、24、28、32、36h取样2mL,同时向溶出杯中补充相同温度和体积的水,滤过,取续滤液过0??45??m滤膜,取10??L用HPLC测定人参皂苷Rb1的含量。计算不同时间人参皂苷Rb1的溶出百分率。2??1??3??转篮法润湿样品:分别取西洋参超微粉与细粉约1g,精密称定,置入透析袋中,加2mL水使药物润湿,取样时间为2、4、6、8、10、12h,其余操作同??2??1??2??项。2??2??含量测定

2??2??1??色谱条件:色谱柱:AgilentTC??C18(250mm??4??6mm,5??m);流动相:以乙腈为流动相A,以0??1%磷酸溶液为流动相B,按表1中的配比进行梯度洗脱;流速:1??0mL/min;检测波长为203nm;柱温为40??;进样量:10??L。在此条件下,人参皂苷Rb1和其他组分得到良好分离,分离度Rf=3??5,达

????表2样品重量(g)0??10120??10360??15080??15410??2072

样品中人参皂苷

Rb1的量(mg)

2??77292??83864??13194??22235??6773

加入人参皂苷Rb1的量(mg)

3??003??002??002??001??00

2??2??2??对照品溶液的制备:精密称取人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇制成每1mL含人参皂苷Rb10??08mg的溶液,摇匀,即得80??g/mL的对照品溶液。

2??2??3??线性关系考察:精密吸取上述对照品溶液4、8、12、16、20??L分别注入HPLC,以峰面积(Y)为纵坐标,人参皂苷Rb1量(X)为横坐标,绘制标准曲线,计算的回归方程为:Y=247??1X+3??56,r=0??9999,实验结果表明:人参皂苷Rb1在(0??32~1??60)??g范围内呈良好的线性关系。

2??2??4??精密度试验:分别精密吸取上述对照品各10??L,重复进样5次,结果人参皂苷Rb1的RSD为1??86%。

2??2??5??稳定性试验:分别精密吸取同一份供试品溶液10??L,于0、3、6、9、12、15h连续进样5次,以峰面积计算日内(每隔3h进样)精密度,RSD为2??28%;于第1、2、3、4、5d连续进样5次,以峰面积计算日间(每隔1d进样)精密度,RSD为2??06%。结果表明:供试品溶液在日内及日间稳定性良好。2??2??6??回收率试验:采用加样回收率法,精密称取已知含量的西洋参细粉5份,置50mL量瓶中,分别精密加入人参皂苷Rb1对照品,加水适量,超声30min,加水至刻度,滤过,取续滤液过0??45??m滤膜,在上述色谱条件下进行HPLC分析,计算回收率,其结果见表2。

测得人参皂苷Rb1的量(mg)

5??72075??81226??06356??21756??6636

回收率(%)98??2699??1296??5899??7698??63

98??47

1??22

平均回收率

(%)

RSD(%)

??人参皂苷Rb1回收率试验

2??3??人参皂苷Rb1溶出结果??西洋参中人参皂苷Rb1的含量测定结果为2??74%,人参皂苷Rb1溶出

2??3??1??由图1可知,西洋参超微粉和细粉直接加

入溶出杯时人参皂苷Rb1溶出率分析:(1)15~45,

??292

??JournalofChineseMedicinalMaterials????第32卷第2期2009年2月

上比较分析差异显著(P<0??05);(2)45~60min,超微粉与细粉两者的累积溶出率从统计学意义上比较分析差异非常显著(P<0??01)

。

度的影响差异不明显。

2??3??3??由图3可知,西洋参超微粉和细粉润湿样品以半透膜为屏障时人参皂苷Rb1溶出率分析:2~14h,超微粉与细粉两者的累积溶出率从统计学意义上比较分析无明显差异(P>0??05),说明两种润湿粉末在有半透膜介质存在时对人参皂苷Rb1溶出度的影响差异不明显。3??讨论

3??1??与普通的机械粉碎方法相比,超微粉碎技术制备生产的西洋参粒径细且分布均匀。本实验中使用的超微粉粒径(长度和直径)99%以上分布在0~30??m,其中直径78%以上分布在5~15??m,长径比80%以上在1~2区间,粒度分布非常均匀。测定溶出度时,溶出仪的转速常用50、100r/min,考虑到转速太快可能是影响药物溶出的一个主要因素,而本实验主要考察的是粒径对有效成分溶出的影响,故选用较低的转速。体外溶出实验中,超微粉的溶出速度和溶出量均较细粉明显提高,说明超微粉碎技术工艺制备的药材粉末由于粒径小、比表面积增大,有效成分溶解性得到了有效的改善。3??2??本实验中采用半透膜作为屏障,目的是想为超微粉碎技术工艺制备的药物在体外溶出实验寻找

图1??干粉样品直接加入溶出杯时人参

皂苷Rb1溶出曲线(n=6,??x??s)

图2??干粉样品以半透膜为屏障时人参

皂苷Rb1溶出曲线(n=6,??x??s)

一种评价的方法和指标。300目以上的药材粉破壁

率很高,用电子显微镜观察很难看到完整的细胞,基本上是细胞碎片,从本实验中可以看出5~10??m时,细胞破壁率大于95%,可使某些存在于胞质或细胞器中的成分直接暴露出来,而不必经过细胞壁(膜)释放,从而使有效成分的溶出更快而完全。实验中使用半透膜,与未用半透膜相比,人参皂苷Rb1的溶出时间明显延长,而且超微粉与细粉从半透膜中溶出的速度和程度无明显差异。

图3??润湿样品以半透膜为屏障时人参

皂苷Rb1溶出曲线(n=6,??x??s)

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2??3??2??由图2可知,西洋参超微粉和细粉干粉样品以半透膜为屏障时人参皂苷Rb1溶出率分析:2

~38h,超微粉与细粉两者的累积溶出率从统计学意义上比较分析无明显差异(P>0??05),说明两种干粉末在有半透膜介质存在时对人参皂苷Rb1溶出

??中药材??杂志为自然科学核心期刊。