高硼处理增强巨尾桉苗木对零上低温的适应

云南植物研究：2B"<2BB)##"，=>（2）

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高硼处理增强巨尾桉苗木对零上低温的适应!

吕成群，黄宝灵

（广西大学林学院，广西南宁!"###$）

摘要：以木本植物巨尾桉为材料，研究在#%以上低温，高硼处理对巨尾桉苗木生长以及苗木叶切片浸出液的相对电导率；超氧阴离子（&)’(）产生速率；丙二醛（*+,）含量；超氧化物歧化酶（-&+）、过氧化物酶（.&+）、过氧化氢酶（/,0）活性；苗木茎尖、根尖和叶片1,,含量的影响。实验方案是在经过有多种硼浓度和温度的预备试验的基础上选出有代表性的两种硼浓度和2种温度进行进一步的研究。培养液均调至34256，每天"#!7897’):’$光照$);。结果表明：在#<6%，高硼处理（65##7=>?）的苗木地下部干重是对照处理（)5627=>?）的@5$A<)56$倍，地上部干重是对照处理的A56#<)5$A倍，总生物量是对照处理的!5)$<)5!2倍；对照处理的相对电导率是高硼处理的$56#<)526倍，&)’(产生速率是高硼处理的)5#$<)56A倍，*+,含量是高硼处理的$52A<$5B!倍；高硼处理的-&+活性是对照处理的)5)$<)5"#倍，.&+活性是对照处理的$5A@<$5!6倍，/,0活性是对照处理的)5#6<)5#A倍；对照处理茎尖的1,,含量是高硼处理的$52@<$52"倍，根尖1,,含量是高硼处理的$5A)<$5A2倍，高硼处理叶片的1,,含量是对照处理的)5)!<)5##倍。

关键词：巨尾桉；硼；低温

中图分类号：CBA!文献标识码：,文章编号：#)!"’)@##（)##"）#2’#2B"’#@

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作者简介：吕成群（$B!@’

）男，副教授，博士，主要从事植物生理生化和分子生物学研究。

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硼是植物必需的微量元素之一。有文献报道，缺硼会导致细胞膜QR离子透性增强（王震宇等，3HH7），体内活性氧积累（王春利，6::3），S6C6和膜脂过氧化产物丙二醛含

，从而导致膜的伤害。生长素运输需要糖，而糖的量增加（刘鹏和杨玉爱，3HHH，6:::）

运输又必须有硼。硼在MGG运输中发挥作用（王春利，6::3）。含硼低的组织似乎比正常供硼组织对低温更敏感（K/!!TP"@*+8/.，3H7J；I+"!!"9B$，3HH:），硼具有提高植物抗寒性的能力（王震宇等，3HH7）。这些研究均是以农作物为材料。桉树生长快，主伐期短，;U1年即可采伐，经济效益好，是联合国粮农组织推荐的世界三大速生树种之一，也是华南地区三大主要造林树种之一（吕成群和黄宝灵，6::3）。我国种植的桉树大多从澳大利亚引种，属热带亚热带喜温树种，它们抗寒能力差，在低温下，树木非常容易受到伤害，严重影响了它在更大范围的地区栽培。本文以巨尾桉为材料，研究在低温下，硼对巨尾桉幼苗生长的影响，以探讨高硼处理增强巨尾桉苗木对零上低温的适应作用。

)

)*)材料与方法实验材料

选取根系发达、生长良好并基本一致的巨尾桉（!"#$%&’(")*+$,-.)O!2"+/’0&%%$）组培瓶苗分成两组在S"/*-/.%培养液中培养，其中一组为正常硼浓度627<8*VP，为对照处理，另一组硼浓度72::8*VP，为高硼处理。分别在:W、4W、7W、36W、3<W、6:W的培养箱（空气LC6浓度:2:J;X）内培养，每处理6:株。J:%后测定苗木地下部和地上部干重，根尖、茎尖和叶片MGG含量，叶片ICF、KCF、LG>活性，叶片C65=产生速率、丙二醛（EFG）含量和叶切片浸出液相对电导率。

培养液均调至DS<27，每天J:!8"-856$53光照36+。实验方案是在经过有多种硼浓度和温度的预备试验的基础上选出有代表性的6种硼浓度和<种温度进行进一步的研究。

)*+超氧物歧化酶（,-.）活性测定

参照F"./+@(等（3HH1），I9+)9B-(!和L/$D)（3HHH）的方法。J8-反应液中含甲硫氨酸3J88"-VP，氯化硝基四氮唑蓝（YN>）1;!（DS127）。8"-VP，核黄素3<21!8"-VP，ZF>G:238"-VP，磷酸缓冲液;:88"-VP以抑制YN>光氧化还原;:X酶量为3个酶活单位，用[?8*53D!"#().表示酶活性。

)*/过氧化物酶（0-.）活性测定

参照G8/B"等（3HH4）的方法。J8-反应液中含磷酸缓冲液:268"-VP（DS<2:），32J;;!-S6C6，愈创

C期吕成群等：高硼处理增强巨尾桉苗木对零上低温的适应C4$木酚!"#$$!??%。以!&’(!)*+,-./0123)23+,表示酶活性。

!"#过氧化氢酶（$%&）活性测定

用曾韶西等（,44,）的方法，以,)23酶解,!?)/%5676为,个酶活力单位，用8)*+,-./0123表示酶活性。

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!")

!".(%%的提取和测定按照华东师范大学生物系植物生理教研组（,4#!）的方法。超氧阴离子（*-+,）产生速率的测定按照王爱国和罗广华（,44!）的方法测定。叶切片浸出液相对电导率的测定

叶子用蒸馏水冲洗干净，然后切成块（,9):,9)），分成甲、乙两组，分别浸于6!)%重蒸馏水中，其中乙组样品置沸水浴中,$)23。经抽真空减压，6;后用<<=+,,&型电导仪测定浸泡液中相对电导率。!"/丙二醛（01%）含量测定

参照513>.?等（,44@）的方法提取和测定A<&的含量。!"$)%提取液，@)%!"$B硫代巴比妥酸，煮沸,$)23，迅速冷却，,#!!:!离心,!)23后，测定$@’3)和C!!3)的光密度值。用标准A<&溶液作标准曲线，计算样品中A<&的含量。

实验重复@次，文中数据均为@次实验结果的平均值。

-

-"!结果与分析巨尾桉苗木生物量的变化

从图,可以看出，不同的硼浓度处理对在不同温度下巨尾桉苗木生长有明显不同的效应，苗木的地下部干重、地上部干重和总生物量在不同硼浓度处理间的差异均达到极显著水平［地下部干重DE,!"($FD!"!,（,，,#）（,，,#）E#"64，地上部干重DE,6",$FD!"!,E

（,，,#）。在",6G时，对照处理和高硼处理的苗#"64，总生物量DE,,",@FD!"!,E#"64］

木地下部干重、地上部干重和总生物量都相差不大，而在H,6G时，两种硼浓度处理间的差别明显增大，如在#G，高硼处理的地下部干重是对照的6"#,倍，’G时是@"!4倍，

，在#G，高硼处理的地上部干重是对照的6",’倍，’G时是!G时是(",’倍（图,&）

，在#G，高硼处理的总生物量是对照的6"$C倍，’G@"#(倍，!G时是’"#!倍（图,I）

时是@"CC倍，!G时是$"6,倍（图,J）。图,&、,I和,J的结果还分别表明，对照处理的苗木地下部干重、地上部干重和总生物量在H,6G时都急剧下降，而高硼处理的地下部干重、地上部干重和总生物量在6!K!G仅小幅下降。

-"-苗木叶片的浸出液相对电导率、*-+,产生速率和01%含量的的变化

从图6&可以看出，两种硼浓度处理对在不同温度下的巨尾桉叶片的浸出液相对电导率有明显的差异，经方差分析表明，差异达极显著水平［DE,@"’$FD!"!,（,，,#）。E#"64］在,6K6!G时，两种浓度处理的叶片相对电导率相差不大，在H,6G，对照叶片的浸出液相对电导率急剧上升，而高硼处理在H’G后，浸出液相对电导率才有所上升。在#G时，对照处理的浸出液相对电导率是高硼处理的6"C!倍，’G时是6"C#倍，!G时是,"#!倍。

从图6I可以看出，两种硼浓度处理的76+L产生速率在不同温度下的变化有明显的不同，经方差分析表明，两种处理间的差异达极显著水平［DE,$",@FD!"!,（,，,#）。E#"64］在",6G时，两种处理的叶片76+L产生速率差异不大，在H,6G，对照处理的76+L产生速率迅速加快，而高硼处理在H’G才略有上升，其中#G时，对照处理的76+L产生速率是

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