大鼠脂肪间充质干细胞培养-杭州赫贝
上传者:陆忠|上传时间:2015-04-24|密次下载
大鼠脂肪间充质干细胞培养-杭州赫贝
大鼠脂肪间充质干细胞培养-杭州赫贝
内容需要下载文档才能查看
大鼠脂肪间充质干细胞原代培养及
R基因瞬转实验
赫贝公司总部地址: 杭州市文一西路1378号杭州师范大学科技园F楼7层电话:0571-28313118
大鼠脂肪间充质干细胞培养-杭州赫贝
内容需要下载文档才能查看
1材料与方法
1.1材料
DMEM-H培养基:GIBCO公司。
胎牛血清FBS:GIBCO公司。
I型胶原酶:SIGMA公司。
Opti-MEM培养基:GIBCO公司。
Lipofectamine2000TransfectionReagent:GIBCO公司。胰
酶:GIBCO公司。
100×青-链霉素(100×P.S.):GIBCO公司。
RunX2:分子室提供。其余试剂均为国产
分析纯。
1.2仪器
二氧化碳培养箱:3111型,Thermo公司。
倒置显微镜:DMIL型,Leica公司。
台式低速离心机:80-2型,上海医疗器械(集团)有限公司。
细胞培养瓶:Corning公司。
细胞培养板:Corning公司。
赫贝公司总部地址: 杭州市文一西路1378号杭州师范大学科技园F楼7层电话:0571-28313118
大鼠脂肪间充质干细胞培养-杭州赫贝
内容需要下载文档才能查看
微量加样器:Thermo公司。
赫贝公司总部地址: 杭州市文一西路1378号杭州师范大学科技园F楼7层电话:0571-28313118
大鼠脂肪间充质干细胞培养-杭州赫贝
内容需要下载文档才能查看
纯水仪:Millipore公司
1.3方法
1.3.1原代培养
无菌条件下剪取SD大鼠双侧腹股沟脂肪垫,冷PBS漂洗三遍,剪碎,加入适量 0.075%I 型胶原酶,在37℃条件下震荡消化约50min。100目筛网过滤消化悬液,用等量含有10%FBS的DMEM培养基终止消化,1500rpm,10min。弃上清,收集细胞沉淀,以10%FBS的DMEM培养基调整细胞浓度为105/ml,接种于T25培养瓶中。37℃,5%CO2,饱和湿度培养箱中培养。每3d换液一次。至贴壁细胞长满瓶底后,0.25%胰酶消化传代, 1:2接种于T25培养瓶中,记录传代次数并拍照。
1.3.2瞬转
取P3至P4代对数生长期大鼠脂肪间充质干细胞,0.25%胰酶消化,离心收集沉淀,以Opti-MEM培养基轻轻吹打混匀细胞,细胞计数,以2*105/孔的细胞量接种于6孔板,待细胞贴壁。依照Lipofectamine2000转染说明书,对R质粒进行转染操作,设两个空白对照孔。转染后6h换正常DMEM培养基,孵育48h。细胞送交分子室QPCR验证。
另取P3至P4代对数生长期大鼠脂肪间充质干细胞,接种于T25培养瓶中,重复上述转染操作。细胞送交分子室WB验证及相关蛋白检测。
赫贝公司总部地址: 杭州市文一西路1378号杭州师范大学科技园F楼7层电话:0571-28313118
大鼠脂肪间充质干细胞培养-杭州赫贝
内容需要下载文档才能查看
2实验结果
2.1细胞图片
2.1.1P1代细胞图片
2.1.2P3代细胞图片
赫贝公司总部地址: 杭州市文一西路1378号杭州师范大学科技园F楼7层电话:0571-28313118
内容需要下载文档才能查看 内容需要下载文档才能查看 内容需要下载文档才能查看 内容需要下载文档才能查看
下载文档
热门试卷
- 2016年四川省内江市中考化学试卷
- 广西钦州市高新区2017届高三11月月考政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高一上学期期中考试政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高二上学期期中考试政治试卷
- 辽宁省铁岭市协作体2017届高三上学期第三次联考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2017届高三11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 山东省滨州市三校2017届第一学期阶段测试初三英语试题
- 四川省成都七中2017届高三一诊模拟考试文科综合试卷
- 2017届普通高等学校招生全国统一考试模拟试题(附答案)
- 重庆市永川中学高2017级上期12月月考语文试题
- 江西宜春三中2017届高三第一学期第二次月考文科综合试题
- 内蒙古赤峰二中2017届高三上学期第三次月考英语试题
- 2017年六年级(上)数学期末考试卷
- 2017人教版小学英语三年级上期末笔试题
- 江苏省常州西藏民族中学2016-2017学年九年级思想品德第一学期第二次阶段测试试卷
- 重庆市九龙坡区七校2016-2017学年上期八年级素质测查(二)语文学科试题卷
- 江苏省无锡市钱桥中学2016年12月八年级语文阶段性测试卷
- 江苏省无锡市钱桥中学2016-2017学年七年级英语12月阶段检测试卷
- 山东省邹城市第八中学2016-2017学年八年级12月物理第4章试题(无答案)
- 【人教版】河北省2015-2016学年度九年级上期末语文试题卷(附答案)
- 四川省简阳市阳安中学2016年12月高二月考英语试卷
- 四川省成都龙泉中学高三上学期2016年12月月考试题文科综合能力测试
- 安徽省滁州中学2016—2017学年度第一学期12月月考高三英语试卷
- 山东省武城县第二中学2016.12高一年级上学期第二次月考历史试题(必修一第四、五单元)
- 福建省四地六校联考2016-2017学年上学期第三次月考高三化学试卷
- 甘肃省武威第二十三中学2016—2017学年度八年级第一学期12月月考生物试卷
网友关注
- 诗句混搭
- 古诗
- 元曲《天净沙·秋思》注音及解释整理
- 乐府诗《乐府江南》拼音及解释整理
- 敦煌飞天
- 古诗
- 幼儿学古诗
- 云南旅游
- 数电课程设计题目 (1)
- 论语节选(带拼音版)
- 野望 王绩
- “国学经典诵读”读后感
- 宋词《望江南·多少恨》拼音及解释整合
- 王开岭教育系列讲座摘录之一
- 古诗
- 蒋勋说唐诗
- 唐诗《春夜喜雨》注音及解释整合
- 唐诗《游子吟》拼音及解释整理
- 中学生厌学说谎解决办法
- 论语
- 孩子叛逆心理产生的原因有哪些
- 诗词
- 带拼音弟子规全集
- 孩子不听话时怎么办
- 宋词《江城子·乙卯正月二十日夜记梦》拼音及注释整理
- 马龙 论文纲要
- 宋词《破阵子·为陈同甫赋壮词以寄之》注音及解释
- 最相思宋词
- L1范数正则化SVM聚类算法
- 孩子离家出走家长应该采取什么措施
网友关注视频
- 第8课 对称剪纸_第一课时(二等奖)(沪书画版二年级上册)_T3784187
- 七年级英语下册 上海牛津版 Unit3
- 沪教版牛津小学英语(深圳用) 五年级下册 Unit 12
- 北师大版八年级物理下册 第六章 常见的光学仪器(二)探究凸透镜成像的规律
- 【部编】人教版语文七年级下册《逢入京使》优质课教学视频+PPT课件+教案,辽宁省
- 外研版英语三起5年级下册(14版)Module3 Unit1
- 化学九年级下册全册同步 人教版 第22集 酸和碱的中和反应(一)
- 北师大版数学 四年级下册 第三单元 第二节 小数点搬家
- 三年级英语单词记忆下册(沪教版)第一二单元复习
- 冀教版小学数学二年级下册第二单元《余数和除数的关系》
- 【获奖】科粤版初三九年级化学下册第七章7.3浓稀的表示
- 外研版英语三起6年级下册(14版)Module3 Unit1
- 冀教版小学英语四年级下册Lesson2授课视频
- 【部编】人教版语文七年级下册《老山界》优质课教学视频+PPT课件+教案,安徽省
- 七年级下册外研版英语M8U2reading
- 【部编】人教版语文七年级下册《过松源晨炊漆公店(其五)》优质课教学视频+PPT课件+教案,辽宁省
- 冀教版小学英语五年级下册lesson2教学视频(2)
- 【部编】人教版语文七年级下册《泊秦淮》优质课教学视频+PPT课件+教案,广东省
- 冀教版英语五年级下册第二课课程解读
- 【部编】人教版语文七年级下册《过松源晨炊漆公店(其五)》优质课教学视频+PPT课件+教案,江苏省
- 北师大版数学四年级下册第三单元第四节街心广场
- 外研版英语七年级下册module1unit3名词性物主代词讲解
- 8 随形想象_第一课时(二等奖)(沪教版二年级上册)_T3786594
- 《空中课堂》二年级下册 数学第一单元第1课时
- 人教版历史八年级下册第一课《中华人民共和国成立》
- 沪教版牛津小学英语(深圳用) 四年级下册 Unit 8
- 七年级英语下册 上海牛津版 Unit9
- 北师大版数学四年级下册3.4包装
- 冀教版小学数学二年级下册第二单元《有余数除法的简单应用》
- 冀教版小学数学二年级下册第二单元《有余数除法的竖式计算》
精品推荐
- 2016-2017学年高一语文人教版必修一+模块学业水平检测试题(含答案)
- 广西钦州市高新区2017届高三11月月考政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高一上学期期中考试政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高二上学期期中考试政治试卷
- 辽宁省铁岭市协作体2017届高三上学期第三次联考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2017届高三11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
分类导航
- 互联网
- 电脑基础知识
- 计算机软件及应用
- 计算机硬件及网络
- 计算机应用/办公自动化
- .NET
- 数据结构与算法
- Java
- SEO
- C/C++资料
- linux/Unix相关
- 手机开发
- UML理论/建模
- 并行计算/云计算
- 嵌入式开发
- windows相关
- 软件工程
- 管理信息系统
- 开发文档
- 图形图像
- 网络与通信
- 网络信息安全
- 电子支付
- Labview
- matlab
- 网络资源
- Python
- Delphi/Perl
- 评测
- Flash/Flex
- CSS/Script
- 计算机原理
- PHP资料
- 数据挖掘与模式识别
- Web服务
- 数据库
- Visual Basic
- 电子商务
- 服务器
- 搜索引擎优化
- 存储
- 架构
- 行业软件
- 人工智能
- 计算机辅助设计
- 多媒体
- 软件测试
- 计算机硬件与维护
- 网站策划/UE
- 网页设计/UI
- 网吧管理