Hela-EGFP稳转细胞株说明书
上传者:全良|上传时间:2015-04-24|密次下载
Hela-EGFP稳转细胞株说明书
Hela-EGFP细胞株是用表达EGFP的慢病毒感染Hela细胞,经嘌呤霉素筛选得到的多克隆稳转细胞株。细胞稳定表达EGFP荧光蛋白,培养时无需抗生素维持。可作为慢病毒感染实验中的对照细胞株使用。
北京英茂盛业‐产品说明书
内容需要下载文档才能查看
Hela‐EGFP细胞说明书
品名:Hela‐EGFP细胞 货号:CG002
包装:1×10^6~1×10^7 1支
细胞株类型:稳定表达EGFP荧光蛋白多克隆细胞株 细胞来源:Hela(人子宫颈癌细胞) 表达基因:EGFP 抗性:嘌呤霉素
培养基:DMEM高糖培养基+10%胎牛血清 消化液:0.25%胰蛋白酶,0.53mM EDTA 冻存液:50%胎牛血清,40%DMEM,10%DMSO 培养条件:37℃,5% CO2
产品简介:
Hela-EGFP细胞稳定表达EGFP荧光蛋白,培养时无需抗生素维持。可作为慢病毒感染实验中的对照细胞株使用。
细胞株构建方法:
慢病毒载体pLV‐EGFP‐C(货号VL3215)包装慢病毒后感染Hela细胞,用嘌呤霉素筛选得到EGFP过表达多克隆细胞株。
收到细胞的处理:
根据客户所在地及发货季节,我们可能采用干冰运输的冻存细胞或者常温运输的培养瓶细胞两种不同形式发货。收到细胞后根据细胞运输类型采用下面两种方式操作。
干冰运输细胞:
1、 37℃水浴融化细胞冻存液,间或摇动冻存管以加速融化
过程。待细胞冻存液完全融化后,用70%乙醇消毒细胞冻存管外壁。
2、 室温200g离心5分钟收集细胞。吸去上清。 3、 用1ml培养基重悬细胞。
4、 将细胞接种到6mm培养皿或25cm培养瓶中,补加5ml
培养基,37℃ 5%CO2培养。
常温运输细胞:
1、 3000g 10min室温离心收集细胞。 2、 用细胞培养基轻柔吹吸重悬细胞。
3、 接种到25cm培养瓶或60mm培养皿,补足培养基到5ml。4、 放到细胞培养箱,37℃ 5%CO2培养过夜。
5、 第二天观察细胞贴壁情况,换液去除未贴壁细胞,继续
培养。
6、 细胞生长后及时消化传代,尽早冻存1~2支。
细胞传代:
1、 传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。 2、 吸去细胞培养液。 3、 用PBS漂洗一次。
4、 加入适量胰蛋白酶,轻轻晃动细胞瓶,使胰蛋白酶均匀
覆盖细胞。吸去胰蛋白酶,将培养瓶放置在细胞培养箱中,37摄氏度消化。在倒置显微镜下观察,看到细胞分开及稍微变圆即可,过度消化可能导致细胞贴壁困难。 5、 加入5ml 细胞培养基,用吸管轻柔吹打分散细胞。 6、 按1:3到1:5接种细胞。
细胞冻存:
1、 将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶和冻存液温浴到37℃。 2、 冻存的细胞应为状态好,生长旺盛的细胞。
3、 按细胞传代方法消化细胞,用适量细胞培养液终止消化,
重悬细胞。
4、 室温200g离心10分钟收集细胞,用冻存液重悬细胞,
并调节浓度至大约1×10^6个细胞/ml。分装到细胞冻存管。
5、 将细胞冻存管放入程序降温盒,‐80℃过夜。 6、 将冻存的细胞转入液氮中。
细胞图片:
内容需要下载文档才能查看
下载文档
热门试卷
- 2016年四川省内江市中考化学试卷
- 广西钦州市高新区2017届高三11月月考政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高一上学期期中考试政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高二上学期期中考试政治试卷
- 辽宁省铁岭市协作体2017届高三上学期第三次联考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2017届高三11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 山东省滨州市三校2017届第一学期阶段测试初三英语试题
- 四川省成都七中2017届高三一诊模拟考试文科综合试卷
- 2017届普通高等学校招生全国统一考试模拟试题(附答案)
- 重庆市永川中学高2017级上期12月月考语文试题
- 江西宜春三中2017届高三第一学期第二次月考文科综合试题
- 内蒙古赤峰二中2017届高三上学期第三次月考英语试题
- 2017年六年级(上)数学期末考试卷
- 2017人教版小学英语三年级上期末笔试题
- 江苏省常州西藏民族中学2016-2017学年九年级思想品德第一学期第二次阶段测试试卷
- 重庆市九龙坡区七校2016-2017学年上期八年级素质测查(二)语文学科试题卷
- 江苏省无锡市钱桥中学2016年12月八年级语文阶段性测试卷
- 江苏省无锡市钱桥中学2016-2017学年七年级英语12月阶段检测试卷
- 山东省邹城市第八中学2016-2017学年八年级12月物理第4章试题(无答案)
- 【人教版】河北省2015-2016学年度九年级上期末语文试题卷(附答案)
- 四川省简阳市阳安中学2016年12月高二月考英语试卷
- 四川省成都龙泉中学高三上学期2016年12月月考试题文科综合能力测试
- 安徽省滁州中学2016—2017学年度第一学期12月月考高三英语试卷
- 山东省武城县第二中学2016.12高一年级上学期第二次月考历史试题(必修一第四、五单元)
- 福建省四地六校联考2016-2017学年上学期第三次月考高三化学试卷
- 甘肃省武威第二十三中学2016—2017学年度八年级第一学期12月月考生物试卷
网友关注
- 兰德公司“T项目”研究及其对我国学前教育的启示
- 广东省佛山市均安镇星槎幼儿园工程可行性研究报告-广州中撰咨询
- 《教育的力量》读后感
- 福建省小学示范图书馆评估标准
- 2011-2012学年吉林省长春外国语学校初二上学期第二次月考语文试卷答案
- 留守儿童材料目录
- 登鲁的故事
- 留守儿童家访记录6
- 端午节放假安全教育材料
- 方向与位置
- 2010-2011学年北京市海淀区高三第二学期期末练习(语文)答案
- 小学总务考核标准11
- 对“留守学生”教育问题思考
- 父母永不放弃自我成长,是孩子最好的教育!
- 幼儿带量食谱安排原则
- 母亲节所思
- 黄道婆
- 给父母的一份廉洁家书
- 2010年浙江省金华一中高一上学期期中考试语文卷答案
- 2017人教版七下语文一单元检测题
- 小古文诵读100篇[1]
- 幼儿园班级消毒记录表
- 东华试题分类--阅读答案
- 幼儿教育心得
- 陕西艺术幼儿园音乐活动教研心得(3.14)
- 小学古诗词归类整理
- 端午节安全教育
- 如何对待逆反孩子
- 留守儿童之家读书活动安排意见
- 2011-2012学年四川仁寿联谊学校七年级下学期半期检测政治试卷(带解析)答案
网友关注视频
- 二年级下册数学第二课
- 外研版英语七年级下册module3 unit2第一课时
- 三年级英语单词记忆下册(沪教版)第一二单元复习
- 【部编】人教版语文七年级下册《泊秦淮》优质课教学视频+PPT课件+教案,辽宁省
- 冀教版小学英语四年级下册Lesson2授课视频
- 沪教版牛津小学英语(深圳用) 四年级下册 Unit 7
- 冀教版小学数学二年级下册第二周第2课时《我们的测量》宝丰街小学庞志荣.mp4
- 【部编】人教版语文七年级下册《逢入京使》优质课教学视频+PPT课件+教案,安徽省
- 化学九年级下册全册同步 人教版 第18集 常见的酸和碱(二)
- 【部编】人教版语文七年级下册《老山界》优质课教学视频+PPT课件+教案,安徽省
- 【部编】人教版语文七年级下册《泊秦淮》优质课教学视频+PPT课件+教案,湖北省
- 飞翔英语—冀教版(三起)英语三年级下册Lesson 2 Cats and Dogs
- 河南省名校课堂七年级下册英语第一课(2020年2月10日)
- 沪教版八年级下册数学练习册21.3(2)分式方程P15
- 苏科版八年级数学下册7.2《统计图的选用》
- 沪教版牛津小学英语(深圳用) 五年级下册 Unit 10
- 沪教版牛津小学英语(深圳用) 五年级下册 Unit 7
- 苏科版数学七年级下册7.2《探索平行线的性质》
- 第4章 幂函数、指数函数和对数函数(下)_六 指数方程和对数方程_4.7 简单的指数方程_第一课时(沪教版高一下册)_T1566237
- 第五单元 民族艺术的瑰宝_15. 多姿多彩的民族服饰_第二课时(市一等奖)(岭南版六年级上册)_T129830
- 第五单元 民族艺术的瑰宝_16. 形形色色的民族乐器_第一课时(岭南版六年级上册)_T3751175
- 冀教版英语三年级下册第二课
- 沪教版八年级下册数学练习册一次函数复习题B组(P11)
- 二年级下册数学第一课
- 沪教版牛津小学英语(深圳用) 四年级下册 Unit 12
- 苏科版数学八年级下册9.2《中心对称和中心对称图形》
- 8.练习八_第一课时(特等奖)(苏教版三年级上册)_T142692
- 8.对剪花样_第一课时(二等奖)(冀美版二年级上册)_T515402
- 沪教版八年级下册数学练习册20.4(2)一次函数的应用2P8
- 【部编】人教版语文七年级下册《泊秦淮》优质课教学视频+PPT课件+教案,广东省
精品推荐
- 2016-2017学年高一语文人教版必修一+模块学业水平检测试题(含答案)
- 广西钦州市高新区2017届高三11月月考政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高一上学期期中考试政治试卷
- 浙江省湖州市2016-2017学年高二上学期期中考试政治试卷
- 辽宁省铁岭市协作体2017届高三上学期第三次联考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2017届高三11月月考政治试卷
- 广西钦州市钦州港区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
- 广西钦州市高新区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
分类导航
- 互联网
- 电脑基础知识
- 计算机软件及应用
- 计算机硬件及网络
- 计算机应用/办公自动化
- .NET
- 数据结构与算法
- Java
- SEO
- C/C++资料
- linux/Unix相关
- 手机开发
- UML理论/建模
- 并行计算/云计算
- 嵌入式开发
- windows相关
- 软件工程
- 管理信息系统
- 开发文档
- 图形图像
- 网络与通信
- 网络信息安全
- 电子支付
- Labview
- matlab
- 网络资源
- Python
- Delphi/Perl
- 评测
- Flash/Flex
- CSS/Script
- 计算机原理
- PHP资料
- 数据挖掘与模式识别
- Web服务
- 数据库
- Visual Basic
- 电子商务
- 服务器
- 搜索引擎优化
- 存储
- 架构
- 行业软件
- 人工智能
- 计算机辅助设计
- 多媒体
- 软件测试
- 计算机硬件与维护
- 网站策划/UE
- 网页设计/UI
- 网吧管理