鱼塘污染灭螺剂氯硝柳胺的快速化学鉴别

中国卫生检验杂志２００７年８月第１７卷第８期ｃｈｌｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅａｌｔｈ

Ｌａｂｏｍ唧钕ｈｎｍｏ盯．Ａｕｇ

２００７；Ｖｏ｜１７

Ｎｏ８

【化学测定方法ｌ

鱼塘污染灭螺剂氯硝柳胺的快速化学鉴别

垒良正，曾丽军，裘淑华，余新图

（浙江省金华市疾病预防控制中心，浙江金华３２１０００）

【摘要】、目的：建立鱼塘被灭螺剂氯硝柳胺污染的快速化学鉴别方法。方法：被污染水中氯硝柳胺经甲基异丁基酮提取．浓缩后．加ＮａＯＨ水解，产物５一氯水杨酸和２一氯，４一硝基苯胺分别用ＦｅＣＩ，和偶氯色素法显色定性。结果：该法可在２ｈ内鉴别污染水体中的氧硝柳胺。检出１１０斗ｇ５０％可湿性氯硝柳胺乙醇铵盐。结论：该方法快速简单、定性准确、无需贵重仪器和特殊试剂，适宜于基层实验室应对突发性鱼塘氯硝柳胺亍亏染的鉴别检测。【关键词】鱼塘污染；灭螺刺；氯硝柳胺；快速化学鉴剐［中图分类号】Ｒｌｌ５

【文献标识码】Ａ

［文章编号】１００４—８６８５（２００７）明一１４４０—０２

Ｔｈｅｆｌｅｅｔｎｅｓｓｃｈｅｍｉｓｔｒｙｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｉｎｇｍｅｔｈｏｄｔｈａｔｔｈｅｆｉｓｈｐｏｎｄｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｂｙｓｐｉｒａｌｓｈｅｌｌａｇｅｎｔｎｉｃｌｏｓａｍｉｄｅ

ｆｉｎＬｉａｎｇ－ｚｈｅｎｇ，Ｃａｏ厶乒ｎ，ａＨＳｈｕ－ｈｕａ，ＹｕＸｉｎ－ｔｕ

（Ｊｍｈｕａ

ＣｅｎｔｒｅｆｏｒＤ／ｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄ

Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｊｉｎｈｕａ３２１０００，Ｃｈｉｎａ）

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ

ａｇｅｎｔ

ｂｕｉｌｄ

ａ

ｆｌｅｅｔｎｅｓｓｃｈｅｍｉｓｔｒｙｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｉｎｇｍｅｔｈｏｄｔｈａｔｔｈｅｆｉｓｈｐｏｎｄ

ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｂｙｎｉｃｌｏｓａｍｉｄｅｐｉｃｋｉｎｇｕｐ

Ｗ，Ｏｌ目ｂｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ

ｂｙ哪ｒａｌ

ｓｈｅｌｌ

ｎｉｃｌｏｓａｒｎｉｄｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｗａｔｅｒ

ｂｙｔｈｅＭｅｔｈｙｌｌｓｏ—ｂｕｔｙｌ

Ｋｅｔｏｎｅ，ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｎｇ，

ａｄｄｓｔｈｅＮａＯＨｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ．ｔｈｅｏｕｔｃｏｍｅ５一Ｃｈｌｏｒｏｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄａｎｄ２一ｃｈｌｏｍ一４一ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｎｅｃｏｌｏｒａｔｉｏｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｗｉｔｈ

ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓｔｈｅｎａｔｍｅ

Ｆｅｑ

ａｎｄ“ｏ

ｐｉｇｍｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｍａｙｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｔｈｅｎｉｅｌｏ目ａｍｉｄｅｉｎｗａｔｅｒｗｉｔｈｉｎ２ｈｏｕｒｓ，ａｎｄｄｅｔｅｃｔ

ｎａｔｕｒｅ

１１０ｔｔｇｎｉｅｌｏｓａｍｉｄｅｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅＳａｌｔ

５０％ＷＰ．Ｃｏｎｄｍｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｆｌｅｅｔｎｅｓｓ，ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅ

ｔｏ

ｓｉｍｐｌｅｌｙ．ａｃｃｕｒａｔｅ。ｔｈｅ

ｕｎｎｅｃｅｓｓａｒｉｌｙｖａｌｕａｂｌｅｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｎｄｐｅｃｕｌｉａｒｒｅａｇｅｎｔ，ｐｒｏｐｅｒｔｈｅｇｒａｓｓ—ｒｏｏｔｓｕｎｉｔｌａｂｏｒａｔｏｒｙａｒｌＳＷｅｌ％ｂｅｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｅｄｄｓｓｈ－

ｉｎｇｆｏｒｗａｒｄｓｅｎｄｉｎｇｏｏｔｔｈｅｎａｔｕｎ！ｆｌｓｈｐｏｎｄｎｉｅｌｃｓａｍｉｄｅｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｎｇ．

［ＫｅＹｗｏｒｄｓ］Ｆｉｓｈｐｅｎｄｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ；ｓｐｉｒａ

ｓｈｅｌｌａｇｅｎｔ；Ｎｉｅｌｏｓａｍｉｄｅ；Ｆｌｅｅｔｎｅｓｓｃｈｅｍｉｓｔｒｙｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ

氯硝柳艘（Ｎｉｅｌｏｓ，ａｍｉｄｅ）。叉名灭绦灵、２７，５一Ｄｉｅｈｌｏｒｏ一４’．一ｎｉｔｒｏｓａｌｉｅｙｌａｎｉｌｉｄｅ，为一种淡黄色粉末，在乙醇、氯仿、乙醚中微溶，几乎不溶于水，是猪、牛等家莆及鱼用驱虫药，其乙醇胺盐又称贝螺杀（Ｂａｙｌｕｓｃｉｄｅ…），是目前啦界卫生组织推荐的唯一化学灭螺药物。为了增加其在水中的溶解度。提高灭螺、灭毛蚴、尾蚴的效率，我国目前使用的主要是５０％可湿性氯硝柳胺乙醇胺盐（以下简称５０％贝螺杀），结构式见图Ｉ。

ｌ材辩与方法１．Ｉ仪器和试剂１

调温电炉；６ｍｏｌ／Ｌ盐酸．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸．０．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸。

１

ｍｏＶＬ氢氧化钠，ｎ

１

ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠，丙三醇。１０晷／Ｌ三氯

化铁，１０ｇ／Ｌ亚｛ｉ｜ｌｉ酸钠，２０昏／Ｌ氨基磺酸铵，５ｓ／Ｌ盐酸萘乙二胺，甲基异丁基甲酮（简称ＭＩＢＫ）。氯化钠，５０％贝螺杀（安徽亚华医药化工有限公司）。１．２检测步骤

１．２．１

单一≤ｈ印一。ｂ仉

图１氯硝梆胺及氯硝柳胺乙醇胺盐结构式

提取、浓缩取１０００ｍｌ水样于分液漏斗中，加入２

ｍｌ

６ｍｏｌ／ＬＨＣＩ，１００ｇＮａＣｌ，５０ｍｌＭＩＢＫ，振摇提取２ｒａｉｎ，静置分

层后，弃去水层，ＭＩＢＫ层经滤纸滤人５０ｍｌ瓷蒸发皿中，于沸水浴上挥去ＭＩＢＫ。Ｉ．２．２碱性水解、中和

在蒸发皿中加入２丌ｄ

ｍｌ１ｍｏＶＬ

ｉｍｏＶＬ

由于它对鱼、贝类高毒，常有因使用不慎或不法分子投毒而引发大面积的鱼、贝中毒事件，请求我们予以检测。但目前我国尚无灭螺剂氯硝柳胺污染的标准鉴别检测方法。为此我们进行了实验。现将方法介绍如下。

ＮａＯＨ，３滴丙三醇，棍匀，在凋温电炉上小火水解并加热至近千或正好千涸；取下放冷。加２残渣。

１．２．３重氮、得台显色

１０

ＨＣＩ中和，微热溶解

取ｏ．４ｍｌ中和后放冷的水解液于

ｍｌ试管中，加人２滴６ｍｏｌ／ＬＨＣＩ和１滴ｌＯ∥Ｌ亚硝酸钠

溶液，混匀，放置１０ｒａｉｎ，再加人３滴２０ｇ／Ｌ氪基磺酸铵溶液，

【作者简介］金良正（１９５５一），男，学士。主任技师。主要从事卫

生理化检验工作。

混匀，放置５ｒａｉｎ，除去过量的亚硝酸钠后．再加入１—２滴

５

ｓ／Ｌ盐酸萘乙二胺溶液，阳性样品呈紫红色。

中国卫生检验杂惠２００７年８月第１７卷第８期ＣｈｌｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ０ｆＨｅａｌｓｈｂ啊ｍｏ口Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ａｕ９２００７；Ｖｏｌｌ７

１．２４

Ｎｏ８

１４４１

ＦｅＣＩ，显色用ｎｌｍｏｌ／Ｌ的ＨＣＩ或ｎ１删妙Ｌ

ＮａＯｌｌ

２．５萃取荆的选择

Ｔｈｅｒｅｓａ

调水解中和液至ｐＨ４～７（玻棒沾｛使在广泛ｐＨ试纸上检查），将柬解中和液用小火蒸发至近干，加入１—２滴１０鲁，Ｌ溶液，甜性样品呈萦堇色。

１．２．５另取１０００ｒｎｌ水样同法提取、浓缩不经水解直接加

２

ＦｅＣＩ，

Ｍ．Ｓｃｈｒｅｉｅｒ等…以丙酮为萃取剂。不适用水体中

氯硝柳胺的萃取；氯硝柳胺在氯仿等与水不互溶的有机溶剂中溶解度较小，经试验以＾ＩＩＢＫ的萃敢宰较高，故选择ＭＩＢＫ为萃取溶剂；在水样中加人氯化钠以抑制乳化，促进分层，提高萃取效率。当污染水体中氯硝柳胺浓度较高时．可减少取样璺。ＭＩＢＫ放置过久，颜色会稍变黄，呵重蒸熘处理。２．６复杂水体处理

当鱼、蚌塘水样较肥或基体复杂时，ＭＩＢＫ提取液层下部可能会有少量乳化甚难以过滤，可先将Ｍ１ＢＫ提取液离心后再过滤。

ｍｌ水微热溶解残渣后，按上法进行重氮偶合显色和ＦｅＣＩ，显色。

１．２．６结果判定当水解液重氪偶合显色及ＦｅＣＩ，显色皆为阳性，未水解液显色为阴性时，判定氯硝柳胺阳性。

２结果与讨论２．１方法选择

氯硝踯胺的检测常用掖相色谱法”‘２１，也有用紫外分光光度法”１和萃取分光光度法“］，但检测的样品都是已知含有氯硝柳胺的样品，且含量较高；同肘液相法前处理复杂。有关氯硝柳胺污染水体的快速化学定性鉴别，未见报道。药典采用锌粉还原硝基后重氮偶合显色的方法鉴别氯硝柳胺”】，但该法不适宜于基体复杂的污染样品的柱河。我们选择将氯硝柳胺永解为５一燕承杨酸和２一氯，４一硝基苯胺分别显色，联合

‘

３小结

氯硝柳胺经萃取、浓缩、碱性水解为５一氯水杨酸和２一氯，４一硝基苯胺，分别经ＦｅＧｌ，和偶氮色素法显色，联合鉴别，可在２ｈ内得出结果，操作简单，定性准确、快速，无需特殊试剂，无需贵重仪器，适宜于基层实验室应对突发性鱼塘氯硝柳胺污染的检测。

【参考文献】

［ｔ］Ｔｈｅｒｅｓ，ａ

ｔｗｎ

Ｍ

判断可有效的避免假阳性。２．２水解条件

酰胺的水解条件要求较为剧烈，加丙三醇可提高水解温度并防止过热；水解时应用小火，防止溶液溅出，蒸发皿受热面积不宜太大，以防边缘先干处过热破坏水解产物。２．３显色条件

２一氯，４一硝基苯胺重氮化时温度不可过高，需有一定的酸度，氨基磺酸铵去除亚硝酸钠要完全，以防假阳性；５一氯水杨酸加ＦｃＣＩ，显色前的酸度以中性或略偏酸为宜，随着ｐＨ值的下降，显色由紫堇色经绿色至黄色变化。２．４检测灵敏度

５０％贝螺杀的灭螺浓度为２ｍ∥Ｌ或２∥ｍ２面积；其对自鲢、草鱼等家鱼的安全浓度为０．０３—０．０４ｍ∥ｔ饰），对斑马鱼的Ｌｃ∞为０＾１４ｍｇ／Ｌ＂１；以寅用的５０％贝螺杀配成不同浓

Ｓｃｈｒｅｉｃｒ。ＶｃｒｄｃｌＫ１）ａｗ§ｏｎ，Ｙｅｏｎｇｃｈｏｉ．ｅｔｄ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａ－

ｄｎｉｅｌｍ蛐ａｆｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅ＃ｉｎｎａｉｎｔｍｗ

ｔｒｏｕｔ（ｏｎｅｏｒｈｙｎｅｈ岫ｍｙｋｉ蚰】

ｔｉｓ６ｕｅ

ａｎｄｃｈａｎｎｄ

ｃａｔｆｉｓｈ（ｉｃｔａｉｎｒｕｓｐｕｎｃｌａｔｕｓ）ｆｉｌｌｅｔｂｙｈｉｇＩＩ—ｔｋａｏｆ－

ｏｌａｌｌｃｅｌｉｑｕｉｄｅｉｎｔｍｍｔｏｇｒａＰｈｙＣｌ］．Ｊ２２Ｊ２—２２１５．

Ａ痂ｃＦｃ，１ｄＣｈｅｍ，２０００．４８（６）：

［２］扬俊柱，朱传明．５０％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂的高教液相

色谱测定［Ｊ】．农药科学与管理，２００６．２５（７）：１２—１５．

［３Ｊ刘掳华，罗秉荣．工尚位，等．用化学｛击测定氯硝柳胺古量“］大

理学院学报．２００４．３（５）：４８—４９．

［４］嵇正平．姜友富，扛世新，等．萃取光度法测定水中氯硝柳胺吉量

的研毙［Ｊ】．中国血暇虫特防治杂志，２００５，１７（６）：４３０—４３２．【５】国家药典委员会．中华人民共和国药典【晡］．第２部．北京：化学

工业出舨牡，２０００．９２２—９２３．

ｒ６】中华人民共和国卫生部疾病控制司．血Ｊ陉虫病研究资料ｉ［编

（１９９６—２０００年）［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社．２００ｌ１８９．［７３翼伟萍。黄轶昕．强鬈系粉剂急性鱼毒宴验观察Ｉ】］．中国血暇虫

度的溶滚试验，可捡出１１０螨５０％贝螺杀，当所取水样为

１０００

ｍｌ时，最低检测浓度约为０，１１Ｉｎｇ／Ｌ．方法灵敏度符合氰

病砖治杂志，２瞄，１６（Ｉ）：６３—６４．

（收稿日期：２００７—０３—２８）

硝柳胺污染的检测要求。

（上接第１４２７页）

寰２准确度试孽绪果

３小结

本法能准确有效地分离、定性、定量不同类型产品中的洛伐它汀，减小了使用方法不当而带来的误差、干扰，保证了监测力度，为监控该类保健食品的质量提供了可行的检测方法。

［参考文献】

【１】王光皿．保健食品功效成分檀嚣方法［Ｍ］．北京：中国轻工业出

２’７线性范围和最小捡出限

洛伐它汀标准液浓度在２ｒ０～３００．０彬ｍｌ时，与峰面积

呈良好线蛙关系，相关系数为ｏ．９９９５，检出瞑为ｏ－２皿∥

１００ｇ。

版社．２００２．４６—４９Ｊ

［２］国家药典委员会＋中华人民共和国药典２０Ｄｏ年版第一部［Ｍ］．

北京：北京化学出版社，ｏｏ毗

ｆ收稿ｔ３期：２００７—０４一田）