细胞生物学实验指导

1




目 录

前 言··························································································································· 2
细胞生物学实验守则···································································································· 3
实验一：动物细胞的基本形态观察和细胞计数························································· 5
实验二：细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察························································· 7
实验三：聚乙二醇（PEG）介导的细胞融合····························································· 9
实验四：线粒体和液泡系的超活染色与观察··························································· 11
实验五：植物细胞微丝束的光学显微镜观察··························································· 12
实验六：叶绿体的分离与荧光观察·········································································· 14
实验七：DNA的显示——Feulgen反应····································································· 17
实验八：小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察··························································· 20
实验九：小鼠骨髓染色体标本的制备与观察··························································· 22
实验十：染色体C-带技术·························································································· 25
实验十一：细胞内化学成分的显示方法——酸性磷酸酶的显示··························· 26
实验十二：开放性实验——蚕豆 Vicia faba 根尖细胞微核监测技术··············· 28
细胞生物学实验考试大纲·························································································· 32
实验考试试题示例······································································································ 32
参考文献······················································································································ 35




湖北师范学院生物学实验教学中心 细胞生物学实验指导
2





前 言
近几年来，随着细胞生物学学科的迅猛发展，教学内容更新较快。细胞细
胞生物学被作为主干基础课列入了高等院校生命科学各专业的 教学计划中，并
且实验课单独作为一门课程开出。为了提高教学水平，反映出本学科更具科学
性、先进性和实用性的实验内容，根据教学大纲的要求和课程设置，同时根据
本校教学实验条件，在参阅中外相关文献，学习兄弟院校的教学经验和资料的
基础上，编写了本实验讲义。
本书为本校生命科学学院相关专业细胞生物学实验指导书，同时可作为其
他相关专业学生参考。书中引用了其他作者部分内容，在此致以诚挚的谢意。












湖北师范学院生物学实验教学中心 细胞生物学实验指导
3


细胞生物学实验守则

细胞生物学实验是整个细胞生物学教学的重要组成部分，既与课堂讲授的理论部分有密
切关系，又有它独特的目的和要求。
1．实验是科学理论的实践与论证，通过实验，使学生了解细胞生物学知识和理论的由来。
掌握细胞生物学的基本实验方法和技能，锻炼学生的动手能力。
2．通过实验，培养学生观察、比较、分析、综合等科学思维能力，以及独立工作的能力
和实事求是的科学作风。
4．使学生掌握书写实验报告、生物绘图、制表等方面的基本知识。

1．预习：学生在课前应认真预习实验指导以及教材有关章节，必须对该次实验的目的要
求、实验内容、基本原理和操作方法有一定的了解。
2．讲解：教师对该实验内容的安排及注意事项进行讲解，让学生有充分的时间按实验指
导的要求进行独立操作与观察。
3．独立操作与观察：除个别实验分组进行外，一般由学生个人独立进行操作和观察。在
实验中要按实验指导认真操作，仔细观察，作好记录。
4．示教：每次的实验都备有示教内容，其目的是帮助学生了解某些实验中的难点，扩大
在实验课有限时间内获得更多感性知识的机会。
5．作业：实验报告必须强调科学性，实事求是地记录、分析、综合。在实验结束时呈交。
学生应认真阅读教师批改后的实验报告，不断提高实验质量。
6．小结：实验结束后，由师生共同小结本次实验的主要收获及今后应注意的问题。

1．每次上课前，必须认真阅读实验指导，明确本次实验的目的要求、实验原理和注意事
项，熟悉实验内容、方法和步骤。
2．上实验课时必须携带实验指导、实验报告纸及绘图文具等，按规定座位入座。
3．实验前，要认真检查所用仪器、药品是否完好、齐备，如有缺损应及时向教师报告，
自己不得随意调换标本、仪器等。没有得到教师的允许，不能动用实验室其它非本次
湖北师范学院生物学实验教学中心 细胞生物学实验指导
4
实验所用的仪器设备。
4．实验时要遵守纪律。有问题时举手提问，严禁彼此谈笑喧哗，不准在实验室吃食和会
客。
5．实验时要遵守实验操作规程，严格按照教师的安排和实验指导的要求进行。使用显微
镜检查非永久片时，要特别小心。防止染料或试剂沾污镜头和镜台，不要用高级显微
镜观察非永久片。操作要正规，观察要认真仔细，及时完成实验报告。
6．要爱护仪器、标本和器材设备，注意节约实验材料、药品和水电。如有损坏器材应立
即报告，并主动登记、说明情况。凡是有化学药品的试剂和溶液瓶上，必须贴上标签，
注明名称、成份、浓度、配制日期。
7．实验结束后，应清理实验台面，所有液体废物、酸类、染料等，应倒在废物缸内，不
能倒在水槽中。认真清理好仪器、药品及其他用品，放回原处。值日生要负责清扫地
面，收拾实验用品，处理垃圾，关好水、电、门窗后再离开。




























湖北师范学院生物学实验教学中心 细胞生物学实验指导
5


实验一：动物细胞的基本形态观察和细胞计数
【课前预习】
1．细胞计数的基本原理？
2．细胞计数与细菌计数的异同点？
【目的要求】
制备不同细胞的临时制片，观察、了解细胞的基本形态；掌握细胞计数方法。
【基本原理】
细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点，在分化程度较高的细胞更为明显，这种合理性是
生物漫长进化过程所形成的。例如：具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形；具有感受刺激和传导冲动机能
的神经细胞有长短不一的树枝状突起；游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。不论细胞的形状如何，细
胞的结构一般分为三大部分：细胞膜、细胞质和细胞核。但也有例外。例如：哺乳类红细胞成熟时细胞核
消失。
细胞计数一般用血细胞计数板，按白细胞计数方法进行计数。细胞计数时，先将培养细胞或血细胞稀
释成细胞悬液，然后将细胞悬液滴入细胞计数板内，计数计数板上计数室四大格内的细胞数。根据计数室
的容积及稀释倍数，即可计算出细胞浓度。
【实验用品】
1．材料：青蛙（蟾蜍）一只或鸡一只
2．器材和仪器：显微镜、载片、盖片、吸水纸、手术器材、解剖盘、血球计数板、小平皿、牙签
3．试剂：0.85％生理盐水、1％甲苯胺兰、1％甲基兰、0.4％台盼蓝、Ringer 氏液（两栖类用）
【方法步骤】
1．青蛙或蟾蜍肝脏压片的制备与观察
剪开蟾蜍腹腔，取一小块(约 2～3mm
3
)肝放在平皿内，用 Ringer 氏液洗净，用镊子轻压将肝中的血挤
出。然后放在载片上，制片方法同脊髓压片 。染色用甲基兰，显微镜下观察。
2．人、青蛙或蟾蜍血涂片的制备与观察
取一滴蟾蜍血液，靠近一端滴在载片上．将另一载片的一端呈 45°角紧贴在血滴的前缘，均匀用力向
前推，使血液在载片上形成均匀的薄层。(图l－1)。晾干，显微镜下观察。
湖北师范学院生物学实验教学中心 细胞生物学实验指导