1,25-(OH)_2D_3治疗肺纤维化的动物实验
上传者:谭毓安|上传时间:2015-05-05|密次下载
1,25-(OH)_2D_3治疗肺纤维化的动物实验
作者单位:200433 同济大学附属上海市肺科医院呼吸科(陈娴
秋、李惠萍);200065 上海市同济医院呼吸科(刘瑞麟)
通讯作者:李惠萍,电子信箱:lihuiping1958@ yahoo. com. cn
1,25 - (OH)
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D
3
治疗肺纤维化的动物实验研究
陈娴秋 刘瑞麟 李惠萍
摘 要 目的 观察1,25 - (OH)
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D
3
对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预效果。方法 将C57BL/6 雄性小鼠110
只分为对照组(n = 30),模型组(n = 40),干预组(n = 40)。对模型组及干预组小鼠用博来霉素(3. 5mg / kg)气管内滴入构建肺纤
维化模型,对照组滴入等量生理盐水。干预组小鼠每日予罗盖全0. 5μg / kg 灌胃,对照组及模型组以等体积蓖麻油灌胃。在造模
第7、14、28 天分批处死各组一定数量小鼠,取右上肺组织行苏木精 - 伊红(HE)染色观察肺组织纤维化程度并评分,除此之外,
在第28 天增加检测肺组织羟脯氨酸含量。结果 造模第7 和14 天,干预组与模型组肺纤维化评分无明显差别;第28 天,干预组
小鼠肺纤维化评分低于模型组(P < 0. 05),干预组小鼠肺组织羟脯氨酸含量低于模型组(P < 0. 05)。结论 1,25 - (OH)
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可
减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化程度。
关键词 1,25 - (OH)
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博来霉素 肺纤维化 肺纤维化病理评分 羟脯氨酸
An Animal Experiment on the Effect of 1,25 - (OH)
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in Treatment of Pulmonary Fibrosis. Chen Xianqiu,Liu Ruilin,Li Huiping. De-
partment of Respiratory Medicine,Shanghai Pulmonary Hospital,Shanghai 200433,China
Abstract Objective To evaluate the effect of 1,25 - (OH)
2
D
3
on pulmonary fibrosis induced by bleomycin in mice. Methods
One hundred and ten C57BL/6 male mice were divided into control group (n = 30),model group (n = 40)and intervention group (n =
40). The mice in model group and intervention group were injected with bleomycin (3. 5mg / kg)intratracheal to set up the model of pul-
monary fibrosis,and the control were injected with saline. Then the mice in intervention group were fed with 1,25 - (OH)
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(0. 5μg / kg)
daily. At the 7th,14th and 28th day after intratrachealed,we sacrificed a certain number of mice of each group. The inferior lobe of right
lung were collected to stain for pathological examination and compare with fibrosis pathological score. Besides,the hydroxyproline content
were meaured at the 28th day. Results At the 28th day,the pulmonary fibrosis pathology score of the mice in intervention group was low-
er than that in model group(P < 0. 05),and the hydroxyproline content of the mice in intervention group were lower than that in model
group (P < 0. 05). Conclusion 1,25 - (OH)
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3
has a protective effect on lung fibrosis induced by bleomycin.
Key words 1,25 - (OH)
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;Bleomycin;Pulmonary fibrosis;Pulmonary fibrosis pathology scores;Hydroxyproline
特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibro-
sis,IPF)是一种病因不明,组织病理学表现为普通型
间质性肺炎的弥漫性间质性肺病。目前认为,IPF 是
由不明原因造成肺泡上皮损伤及异常修复所致。目
前该疾病的治疗仍以激素为主,但易造成骨质疏松等
不良反应。1,25 - (OH)
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3
是目前治疗骨质疏松药
物之一。有文献报道,1,25 - (OH)
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3
具有抗器官
(尤其在肾脏)纤维化的作用,但尚无其对肺纤维化
的在体研究及报道
[1 ~ 4]
。本实验通过 1,25 -
(OH)
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3
干预博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型,
观察不同时期处死小鼠的肺组织病理改变及测定羟
脯酪氨酸含量从而研究1,25 - (OH)
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对小鼠肺纤
维化的影响,并推测可能的作用机制,望为 1,25 -
(OH)
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用于IPF 的临床治疗提供有力依据。
材料与方法
1. 材料:(1)仪器与试剂:1,25 - (OH)
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(骨化三醇胶
丸,25μg × 10 粒装,罗氏)、切片机(LEICA RM2235)、染色机
(LEICA AUTO STAINER XL)、注射用盐酸博来霉素粉剂(日
本化药株式会社,15 毫克/ 支)、羟脯氨酸试剂盒(南京建成生
物工程研究所)。(2)实验动物:健康8 周龄 SCF 级 C57BL/6
雄性小鼠110 只,体重18 ~ 22g,购于上海第二军医大学实验
动物中心,在无特定病原体条件下饲养,环境温度20 ± 2℃,相
对湿度50%。
2. 实验方法:(1)动物分组:将110 只小鼠随机分为对照
组(30 只),模型组(40 只),干预组(40 只)。(2)构建小鼠肺
纤维化模型:参考文献方法对模型组及干预组小鼠称重后腹
腔注射1%戊巴比妥钠(50mg / kg)溶液进行全身麻醉,将小鼠
仰卧固定,颈部正中剪毛,按常规手术切开皮肤,逐层分离颈
部组织,暴露气管,注入博来霉素溶液(按3. 5mg / kg 剂量溶于
0. 1ml 生理盐水中)后立即将小鼠直立、旋转,使博来霉素在
· 9 2 1 ·
医学研究杂志 2012 年12 月 第41 卷 第12 期
·论 著·
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