不同质量浓度顺铂对宫颈癌+Hela+细胞增殖能力的影响

ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌ

Ｖｏｌ畅３０Ｎｏ畅７Ｊｕｌｙ２０１４（ＳｅｒｉａｌＮｏ畅

１７７）

　　６０１

ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｃｉｓｐｌａｔｉｎｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆＨｅｌａｃｅｌｌ

不同质量浓度顺铂对宫颈癌Ｈｅｌａ细胞增殖能力的

影响

陈秀慧，曲军英

（福建医科大学附属第一医院妇产科，福州　３５００００）

ＣＨＥＮＸｉｕ－ｈｕｉ，ＱＵＪｕｎ－ｙｉｎｇ

（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓａｎｄＧｙｎｅｃｏｌ－

ｏｇｙ，ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＦｕｊｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ３５００００，Ｃｈｉｎａ）

收稿日期：２０１４－０４－１７修回日期：２０１４－０５－０８

基金项目：福建省卫生厅青年基金资助项目

（２００８－２－２５）

作者简介：陈秀慧（１９７３－），女，主治医师，主

要从事妇科肿瘤研究

通信作者：陈秀慧

ＭＰＥ－：１３７０５９７０８３３

ｍａｉｌ：ｘｉｕｈｕｉ＿ｃｈ＠１２６畅ｃｏｍ

摘要：目的　观察不同质量浓度顺铂对宫颈癌Ｈｅｌａ细胞增殖能力的影响。方法　选择人宫颈癌Ｈｅｌａ细胞进行体外培养，分别用质量浓度为０，０畅０１，０畅１０，１畅００，１０畅００ｍｇ?Ｌ－１

的顺伯对呈现对数生长期的Ｈｅｌａ细胞进行处理，处理后

分别于１２，２４，４８，７２ｈ测定细胞增殖能力。结果　不同质量浓度的顺铂对Ｈｅｌａ细胞增殖能力均有抑制作用，高质量浓度顺铂组对Ｈｅｌａ细胞抑制率明显高于低质量浓度组（Ｐ＜０畅０５）。不同质量浓度组中，随顺铂作用时间的延迟，细胞增殖抑制率显著增加（Ｐ＜０畅０５）。结论　顺铂对宫颈癌Ｈｅｌａ增殖能具有抑制作用，且随质量浓度的增高，抑制能力增强。关键词：宫颈癌；Ｈｅｌａ细胞；顺铂；增殖能力ＤＯＩ：１０畅１３６９９／ｊ畅ｃｎｋｉ畅１００１－６８２１畅２０１４畅０７畅０１３中图分类号：Ｒ９７９畅１；Ｒ９３７畅３３　　　文献标志码：Ａ文章编号：１００１－６８２１（２０１４）０７－０６０１－０２

Ａｂｓｔｒａｃｔｃｉｓｐｌａｔｉｎ：ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｏｎＯｂｊｅｃｔｉｖｅｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ

ｗａｓｃｕｌｔｕｒｅｄａｂｉｌｉｔｙｉｎｏｆＨｅｌａｖｉｔｒｏａｎｄｃｅｌｌ畅ｔｒｅａｔｅｄＭｅｔｈｏｄｓｗｉｔｈ　０，０畅Ｃｅｒｖｉｃａｌ０畅１０，１畅００，１０畅ｌｉｎｅ００Ｈｅｌａｍｇ?Ｌ

－１

０１，ＲｅｓｕｌｔｓＡｆｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｏｆ１２，２４，４８ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｈｃｉｓｐｌａｔｉｎａｎｄｏｆｔｈｅｉｎｃｉｓｐｌａｔｉｎｃｅｌｌｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｓｔａｇｅｏｆｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｒａｔｅｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃｗａｓｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｄｐｈａｓｅＨｅｌａｃｅｌｌ

畅畅

ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｔｉｏｎ畅ＴｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＨｅｌａｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａ－Ｔｈｅｗｅｒｅｆｏｒｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｒａｔｅｔｈａｎｗａｓｔｈａｔｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｌｏｗｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗｉｔｈｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０畅０５）．ｃｅｒｖｉｃａｌｃｉｓｐｌａｔｉｏｎｃａｎｃｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｅｌｌ，畅ａｎｄＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｅｄ　Ｃｉｓｐｌａｔｉｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｃａｎｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｐｅｒｉｏｄｏｆｔｉｍｅｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ

ｏｆａｂｉｌｉｔｙＫｅｙｗｏｒｄｓｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ：ｃｅｒｖｉｃａｌ畅

ｃａｎｃｅｒ；Ｈｅｌａｃｅｌｌ；ｃｉｓｐｌａｔｉｎ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ

子宫颈癌是临床上妇科常见恶性肿瘤，近年来随着人类乳头

瘤病毒（ＨＰＶ）感染率的增加，宫颈癌的发病率呈现上升和年轻化趋势

［１－２］

。早期宫颈癌多以手术治疗，晚期患者多用手术联合放

化疗等治疗方案。化疗多以含铂方案为主，但部分患者肿瘤细胞呈现顺铂耐药错误

［３－４］

。本研究用宫颈癌Ｈｅｌａ细胞株为研

究对象，用不同质量浓度的顺铂进行处理，观察处理后不同时间Ｈｅｌａ细胞增殖能力的变化，从而探讨顺铂抑制Ｈｅｌａ细胞增殖的机制。

　６０２

中国临床药理学杂志　

第３０卷　第７期　２０１４年７月（总第１７７期）　　　　

材料与方法

１　材料

细胞株　子宫颈癌Ｈｅｌａ细胞株，购自中科院上海生命科学院细胞资源中心。

药品　顺铂，规格：每支１０ｍｇ，批号：８０６０２７ＣＦ，齐鲁制药有限公司生产。

仪器２ＥＬｘ　８００细胞株培养

酶标分析仪　ＣＫＸ３１，倒置显微镜美国Ｂｉｏ－Ｔｅｋ，奥林巴斯公司产品公司产品。；取出于－８０℃保存的Ｈｅｌａ细胞，迅速投入３７℃水浴中，１ｍｉｎ融化；培养基缓慢稀释至原体积的１０倍以上；低速离心１０ｍｉｎ，吸去上清，加入新鲜的培养基，培养刚复苏的细胞；细胞完全贴壁６ｈ后，吸去含３有冻存液的培养基　Ｈｅｌａ细胞增殖抑制率检测

，并换成完全培养基。

［５］

取对数生长期ＨｅＬａ细胞，用０畅２５％胰蛋白酶和０畅０２％ＥＤＴＡ消化，制成单细胞悬液，准确计数，以

５×１０４

个／ｍＬ的细胞密度接种于９６孔板，０畅ｐＬ０１，０畅，培养１０２４，１畅ｈ，００，１０畅大部分细胞贴壁后００ｍｇ?Ｌ－１

的顺铂分别处理细，按质量浓度为每孔１０００，

胞。分别于药物作用后１２，２４，４８，７２ｈ，吸取原含药物的培养基，换为培养基１００ｐＬ和ＣＣＫ－８１０ｐＬ的混合液作用１～２ｈ，用酶标议（波长４５０ｎｍ）测定吸光度（Ａ）值。测３次，取平均值。重复５次取平均值。细胞生长抑制率＝１－（Ａ实验组－Ａ空白组）／（Ａ对照组－４Ａ空白组　统计学处理

）。

用ＳＴＡＴＡ１１畅０软件完成，计量资料用ｍｅａｎ±ＳＤ表示，组间比较用单因素方差分析，计数资料用相对数表示，组间比较用Ｃｈｉ－ｓｑｕａｒｅ分析。

结　　果

１　Ｈｅｌａ２多角形Ｈｅｌａ细胞培养及传代结果

　不同质量浓度顺铂对，３细胞～４ｄＤＭＥＭ即可传代一次培养基中程贴壁生长Ｈｅｌａ。

，大多为细胞抑制率影响

不同质量浓度的顺铂对Ｈｅｌａ细胞增殖能力均有抑制作用，高质量浓度顺铂组Ｈｅｌａ细胞抑制率明显高于低质量浓度组（Ｐ＜０畅０５）。不同质量浓度组中随顺铂作用时间的延迟，细胞增殖抑制率显著增加（Ｐ＜０畅０５），见表１。

表１　不同时间点及质量浓度顺铂对Ｈｅｌａ细胞抑制率影响

ＴａｂｌｅＴｉｍｅ１　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅｐｏｉｎｔａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｃｉｓｐｌａｔｉｎｏｎ－１

）

（ｈ）０畅０１０畅１０１畅００１０畅００１２０畅２１±１畅５６０畅３９±２畅０１１畅２４±２畅１２８畅２５±３畅１２倡２４１畅５８±２畅３１３畅２１±１畅３２

６畅３１±３畅２１

２４畅５８±６畅５４倡４８３畅６６±１畅０６７畅９２±１畅５２倡１１畅６８±２畅４６倡

６１畅８４±９畅３６倡

７２

８畅２１±４畅５６

１８畅６９±６畅５４倡３５畅２４±１３畅２４倡８７畅２４±２０畅１１倡

Ｍｅａｎ±ＳＤ；Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｇｒｏｕｐ０畅０１，

倡

Ｐ＜０畅０５

讨　　论

含顺铂的化疗方案是治疗子宫颈癌的常用方

案，但临床中常常发现部分宫颈癌细胞经一段时间化疗后，对顺铂等化疗药物的敏感性下降，出顺铂内在性或获得性耐药，从而导致化疗有效率下降。顺铂为细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细胞的ＤＮＡ复制过程，并损伤其细胞膜上结构，有较强的广谱抗癌作用。顺铂可与肿瘤细胞ＤＮＡ产生链内和链间交联，以及ＤＮＡ－蛋白质交联，从而阻碍ＤＮＡ修复基因如Ｐ５３等的表达，抑制细胞增

殖，促进细胞凋亡［４］

。顺铂在宫颈癌化疗中的耐药机制主要与顺铂在癌细胞中有效质量浓度下降；继发ＤＮＡ修复通路激活；以及多耐药基因激活，导致顺铂被细胞外排有关。本研究中，用人宫颈癌Ｈｅｌａ细胞株为研究对象，不同质量浓度的顺铂对Ｈｅｌａ细胞增殖能力均有抑制作用，高质量浓度顺铂组Ｈｅｌａ细胞抑制率明显高于低质量浓度组Ｈｅｌａ制能力增强增殖能具有抑制作用。本结果说明，，且随质量浓度的增高。顺铂对宫颈癌顺铂的耐药机制与其细，抑胞中药物质量浓度有关，因此，有效宫颈癌细胞中的顺铂质量浓度可能是提高宫颈癌含顺铂化疗方案有效率的重要方法。

参考文献：

［１］　ＳｉｅｇｅｌＲ，ＮａｉｓｈａｄｈａｍＤ，ＪｅｍａｌＡ．Ｃａｎｃｅｒｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ，２０１３［Ｊ］．ＣＡ

ＣａｎｃｅｒＪＣｌｉｎ，２０１３，６３：１１－３０．

［２］　黄法声．新辅助化疗在宫颈癌术前的临床应用进展［Ｊ］．医学信

息，２０１３，２６：７３１．

［３］　金镇勋，兰汝春，王菲，等．顺铂诱导人宫颈癌Ｈｅｌａ细胞凋亡与

自噬的研究［Ｊ］．吉林医药学院学报，２０１３，３４：４０１－４０４．［４］　ＷａｎｇＴＨ，ＷａｎｇＪＹ，ＧｏｎｇＸ，ｅｔａｌ．Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅｅｎｈａｎｃｅｓｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ

ｏｆｃｅｌｌｓｃｉｓｐｌａｔｉｎｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｉｎｈｕｍａｎｏｆｍｕｌｔｉｄｒｕｇｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｅｓｏｐｈａｇｅａｌ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｑｕａｍｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎｃａｒｃｉｎｏｍａＯｎｃｏｌＲｅｐｏｒｔｓ，２０１２，５：１６８１－１６８６．

ｌ［Ｊ］．

内容需要下载文档才能查看 内容需要下载文档才能查看 内容需要下载文档才能查看

不同质量浓度顺铂对宫颈癌 Hela 细胞增殖能力的影响作者：

作者单位：

刊名：

英文刊名：

年，卷(期)：陈秀慧， 曲军英， CHEN Xiu-hui， QU Jun-ying福建医科大学 附属第一医院 妇产科,福州,350000中国临床药理学杂志The Chinese Journal of Clinical Pharmacology2014(7)

本文链接：http://wendang.chazidian.com/Periodical_zglcylxzz201407013.aspx