PCR实验介绍Word
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PCR实验介绍Word
*PRC验实绍介*
标*准的CRP反应体系: *10扩增 冲液 缓* 种4NTd混P物 *合 物引 * 模D板AN* aTqDNA 合聚酶* M2+g* 加 双三或蒸水至10ul
2各00mol/Lu1各010~pmol 001~2.u 2g.5u1. mm5loL
1/00lPuRC
*物 *引 酶*NTPd *模 *板Mg2+*
*温 度*时间 循*次数环
*
*异性强特CR反P应特异性的决因定为:素* * *
①*引物模与D板NA异特确的正结; ②碱合基配对原则 ③T;q aNDA聚酶合成合反应的实忠性;④基靶的特异性与因守性保。
CPR反应最大的点特 具是较大有扩增 能与极高力的敏灵,性 但人头痛的问题令是 污易染极其, 量的污微染即造成 可假性的阳产生。*污染因 *(原)标一间交叉本染污*(二 )PC试剂R污染的* 三)(CRP增产物污扩 *染四)(实室中克隆质验粒的染污
* (一)*理合分实隔室验* (二 )吸样枪* 三)(预和分装PCR试剂混 (*)四防止作人员污操,使染一用性次套手、头吸、小心管离一次性使应用。* ()设五适立的阳性当照和阴性对照 对 (六*减少)CP循R次数,只环P要R产物C到检测水平就达适而可。
止*(七 )择质量选好Epp的nedor管f以,免样本外溢及外避来
核的进酸入打,开心离管前应离心,先管将壁管盖及上的液体 甩管至部底开管动作。轻要,以防内液管体溅。
出
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