教育资源为主的文档平台

当前位置: 查字典文档网> 所有文档分类> 高等教育> 农学> 高效液相色谱法测定留胚米和精白大米中维生素B_1含量

高效液相色谱法测定留胚米和精白大米中维生素B_1含量

上传者:陶炎焱
|
上传时间:2015-04-15
|
次下载

高效液相色谱法测定留胚米和精白大米中维生素B_1含量

高效液相色谱法测定留胚米和精白

大米中维生素B1含量

纪伟东白喜春,韩俊杰,

(黑龙江粮食职业学院,黑龙江哈尔滨150080)

要:研究采用高效液相色谱—紫外检测器来测定留胚米和精白大米中的维生素B1的方法。试

样用0.1mol/L的盐酸溶液超声波提取3次,将提取液浓缩后进行测定。测定条件:检测波长为方法回收率在90%以上,相对标准偏差(RSD)均小于5%,检出限(S/N=3)为0.012μg/ml。方法操作简便、快速、重现性好。关键词:维生素B1;留胚米;精白大米;高效液相色谱

中图分类号:TS207.3文献标识码:A文章编号:1007-7561(2014)01-0082-03

246nm,流动相为甲醇:乙酸钠(0.1mol/L)=80∶20,柱温为30℃,流速为0.9ml/min。结果表明:

StudyondeterminationofvitaminB1ingerm-retainedriceand

polishedricebyhighperformanceliquidchromatography

BAIXi-chun,HANJun-jie,JIWei-dong

(HeilongjiangGrainVocationalCollege,HarbinHeilongjiang150080)

Abstract:ThemethodtodetectvitaminB1ingerm-retainedriceandpolishedricebyHPLC-UVde-tectorwasresearched.Thesampleswereextractedby0.1mol/Lhydrochloricacidforthreetimesinultra-soniccleanser,andtheextractsolutionwasmeasuredafterbeingconcentrated.Thechromatographiccon-ditionswerethatdetectionat246nm,mobilephasewasmethanol:sodiumacetate(0.1mol/L)=80∶20,columntemperaturewas30℃,currentvelocitywas0.9mL/min.Theresultshowedthatcoefficientofre-coveryofthismethodwasabove90%,alloftheRSDwaslessthan5%,thedetectionlimit(S/N=3)was0.012μg/mL.Thismethodwasfast,easytooperatewithbetterrepeatability.

Keywords:vitaminB1;germ-retainedrice;polishedrice;highperformanceliquidchromatography维生素B1又名硫胺素。其化学名称是氯化3-[(4-氨基-2-甲基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-羟基乙基)-4-甲基-噻唑盐酸盐,分子式为C12H17ClN4OSHCl。维生素B1是人体必需维生素之一,维生素B1在体内转变成硫胺素焦磷酸(又称辅羧化酶),参与糖在体内的代谢。因此维生素B1缺

糖在组织内的氧化受到影响。它还有抑制胆乏时,

碱酯酶活性的作用,缺乏维生素B1时此酶活性过高,乙酰胆碱(神经递质之一)大量被破坏使神经传导受到影响,可造成胃肠蠕动缓慢,消化道分泌减少,食欲不振、消化不良等障碍,严重时会引起神经炎和脚气病。

维生素B1在种子的外皮和胚芽中含量较为丰富。尤其是谷类种子中含量较高。是人体维生素

收稿日期:2013-04-18

基金项目:黑龙江省教育厅高职高专课题(12525106)

1956年出生,作者简介:白喜春,男,副教授.

B1的主要来源。

稻谷在我国是种植非常广泛的粮食作物,是人

们食物的重要来源。稻谷中含有丰富的蛋白质、碳水化合物、脂肪酸、矿物质等。另外,维生素也是一类重要的营养物质。稻谷中的B族维生素含量丰B2和尼克酸较多。B族维生素富,其中维生素B1、主要存在于糊粉层中

[1]

。因此,稻谷在加工过程中

营养成分会有相当量的损失,尤其是B族维生素损

失较大,随着加工精度的加大损失越多。稻谷按加工精度的高低可以分为糙米、留胚米和精白米等,其含有B族维生素的量也有所不同。

目前维生素B1的检测方法主要有紫外分光光度法

[2]

、荧光法和高效液相色谱法(HPLC)。紫外

分光光度法检测限高,灵敏度低,适合含量高的样品,荧光法灵敏度高,但操作繁琐,高效液相色谱法(HPLC)配荧光检测器分析效果好,分析时间短,灵

是高温高压提取30min时,样品被糊化,样品液浑浊,过滤困难,操作繁琐。所以采用超声提取的方法,提取时间30min。2.2色谱条件的确定2.2.1

流动相的选择

维生素B1色谱分离所用的流动相主要有甲醇

敏度高,但仪器价格昂贵。大米中维生素B1的检测采用HPLC配紫外检测器分析还未见报道,虽然该法的灵敏度较高效液相色谱法(HPLC)配荧光检测器低,但是大米中维生素B1含量相对较多,因此本实验利用HPLC法对留胚米和精白大米中维生素B1的含量进行研究,采用紫外检测器进行检测,对检测维生素B1的条件进行优化,对大米中维生素B1的测定具有一定的参考价值。

[3]

-水、其甲醇-PIC试剂、甲醇-乙酸钠溶液等,中应用甲醇-水为流动相不能将样品中维生素B1

1

1.1

材料与方法

材料、试剂与仪器精白大米、留胚米:从黑龙江各产地取样,都是

很好分离,其他两种流动相均能很好地分离样品中

维生素B1,另外对但是采用PIC试剂的成本较高,色谱柱的损伤较大,故采用甲醇-乙酸钠溶液作为流动相,甲醇-乙酸钠溶液作为流动相不仅分离效果好,而且试验成本也较低。

对甲醇-乙酸钠溶液作为流动相的条件进行了25∶75、优化,分别选择甲醇-乙酸钠溶液20∶80、

30∶70、35∶65、40∶60五个比例,对标准使用液进行了测定,当流动相中甲醇和乙酸钠溶液的比例为25:75,维生素B1有良好的分离效果。故采用甲醇和乙酸钠溶液的比例为25∶75作为流动相。2.2.2流速

0.8、0.9、1.0、1.1mL/min四个流速梯选择0.7、

度,以甲醇和乙酸钠溶液的比例为25∶75作流动相对维生素B1标准工作液和样品进行测定。实验结果表明:随着流动相的流速增加,维生素B1色谱峰变窄,出峰时间缩短。但是样品中维生素B1色谱峰不能有效分开,而流速太小,色谱峰拖尾严重,也不能达到分离效果。因此,流动相流速选择为0.9mL/min。2.2.3

柱温

25、30、35、40℃五个柱温梯度,选择20、对维生

当年产的新米,经锤式旋风磨粉碎,过80目筛,装瓶

备用。

维生素B1标准品:上海源叶生物科技有限公司。维生素B1标准储备液浓度为500μg/ml;标准工作液浓度为0.5μg/mL。

甲醇为色谱级;水为重蒸馏水;乙酸钠为分析纯。LC-20AT液相色谱(双元泵、配SPD—20A检测器):日本岛津公司;H1850R高速离心机:湖南湘仪实验室仪器开发有限公司;SBL—15DT超声波清洗器:宁波新芝生物科技股份有限公司;RE—52AA旋转蒸发仪:上海亚荣生化仪器厂。1.2方法1.2.1

样品前处理

称取过80目筛的大米粉试样10g于50mL具塞三角瓶中,准确加入20mL混合试剂(0.1mol/L

的盐酸:甲醇,体积比为20:80),将试样放入超声清洗器中提取30min,提取后将试样倒入离心管中离心5min(10000r/min),然后将上清液倒入烧杯中,将沉淀物再加相同的提取剂在相同的条件下重复提取,共提取三次。将三次的提取液合并,用旋转蒸发仪浓缩,定容至1mL,过滤,进样分析。1.3色谱工作条件

5μm)C18色色谱柱为Diamonsil(150×4.6mm,

谱柱;紫外检测器,检测波长:246nm;进样量为10μL。

流动相:甲醇:乙酸钠(0.1mol/L)=80∶20,柱温:30℃。流速:0.9mL/min。以保留时间定性,色谱峰面积定量。

素B1标准工作液进行色谱测定。实验结果表明:在

不同柱温条件下对维生素B1的分离无明显的影响。选用柱温为30℃。

在上述条件下得出的标准品的色谱图如下

内容需要下载文档才能查看

2

2.1

结果与分析

提取方法选择对超声、振荡及高温高压三种样品提取方法进

图1

维生素B1标准色谱图

行比较,取同一种样品,分别在三种提取方法下提取10、20、30min,每个条件下重复三次,通过计算回收率来确定效果。实验结果表明,采用超声和高温高压法提取,回收率均在98%以上,可满足大米中维生素B1检测要求。而震荡提取法在87%左右。但

2.3加标回收实验

取同一品种大米样品,每份称取5.0g左右,样

品中分别加入浓度为0.5μg/mL标准工作液2.5、5、10mL,做低、中、高浓度三个水平的加标回收实

质量安全

验,以不加标做空白。按“1.2.1”条件的进行样品前处理,进样测定。方法回收率结果见表1。

表1

添加量

/(μg/g)0.250.501.00

回收率实验(n=6)

检出值/(μg/g)0.63±0.030.89±0.031.37±0.05

回收率/%94.0296.7496.48

粮油食品科技第22卷2014年第1期

白大米中维生素B1含量较高,经过富集后进行检测也可以达到检测的目的。通过检测发现,留胚米和精白大米中维生素B1含量相差近三倍,其原因是维

加工精生素B1主要在集中在大米的胚芽和种皮中,度越高,维生素B1的损失越大,因此留胚米营养价

值要高于精白米

内容需要下载文档才能查看

本底值/(μg/g)0.420.420.42

方法的回收率实验反映了测定方法的准确性。从实验结果可见,三个水平的回收率均在90%以上。2.4

重现性实验

取维生素B1标准品,在上述优化后的实验条件

图2

内容需要下载文档才能查看

留胚米样品色谱图

下分别连续6次进样,测得峰面积及保留时间的相对标准偏差(RSD)均小于3%,结果表明其重现性良好。

2.5精密度实验

取不同品种大米样品,分别称取5g左右大米样品,每个品种做6个重复。按处理方法进行处理,上机测定,测定结果的相对标准偏差在2.2%~4.4%。2.6空白对照实验

在不添加试样和标准样品的条件下,按1.2进行前处理,按1.3上机测定,结果在维生素B1相对应的保留时间内无色谱峰出现。由此可见样品前处理过程不影响测定。2.7

最低检出限实验

取维生素B1标准溶液,以三倍信噪比得到检测

图3精白大米样品色谱图

限,为0.012μg/ml。我国大米中维生素B1的平均含量,胚芽米为1.2~5mg/100g,精白大米为0.54mg/100g。所以此方法可以满足大米中维生素B1含量的测定。2.8样品的测定

根据以上优化方法对留胚米和精白大米中维生素B1进行测定,结果见表2,样品色谱图如图2和图3。

表2试样胚芽米精白米

留胚米和精白大米中维生素B1含量

份数55

维生素B1/(mg/100g)

0.152±0.030.044±0.05

4结论

通过实验优化了维生素B1测定的色谱条件,确

定流动相为甲醇:乙酸钠(0.1mol/L)=80:20;柱温

为30℃;流速为0.9mL/min。并进行了加标回收、精密度、空白对照和最低检出限等实验研究。其回收率均在90%以上,最低检出限为0.012μg/mL,重现性和精密度良好。在所选最佳仪器工作条件下测定留胚米和精白大米中维生素B1的含量分别为0.152mg/100g和0.0442mg/100g。实验结果表明:采用本方法测定留胚米和精白大米中维生素B1具有快速、准确、操作简便等特点,完全可以应用于留胚米和精白大米中维生素B1的检测。参考文献:

[1]张秀真,高素莲.RP-HPLC法测定美容液中水溶性维生素的含

J].安徽大学学报(自然科学版),2005,29(6):79-81量[

[2]刘彤,王布军.高效液相色谱法测定小米中维生素B1杨云霞,

29(2):337~339.[J].食品科学.2008,

[3]程树峰,伍松陵,等.高效液相色谱法测定强化面粉中的维唐芳,

3讨论

采用高效液相色谱法检测维生素B1通常以荧

光检测器为主,而以紫外检测器检测B1族维生素多

用于含B族维生素的药物含量的检测。而应用于食品中的相关检验报道较少,其原因可能是紫外法的检测限较高,灵敏度较差。但是由于留胚米和精

J].粮油食品科技.2006,(4):50~51.●

内容需要下载文档才能查看

生素B1[

版权声明:此文档由查字典文档网用户提供,如用于商业用途请与作者联系,查字典文档网保持最终解释权!

下载文档

热门试卷

2016年四川省内江市中考化学试卷
广西钦州市高新区2017届高三11月月考政治试卷
浙江省湖州市2016-2017学年高一上学期期中考试政治试卷
浙江省湖州市2016-2017学年高二上学期期中考试政治试卷
辽宁省铁岭市协作体2017届高三上学期第三次联考政治试卷
广西钦州市钦州港区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
广西钦州市钦州港区2017届高三11月月考政治试卷
广西钦州市钦州港区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
广西钦州市高新区2016-2017学年高二11月月考政治试卷
广西钦州市高新区2016-2017学年高一11月月考政治试卷
山东省滨州市三校2017届第一学期阶段测试初三英语试题
四川省成都七中2017届高三一诊模拟考试文科综合试卷
2017届普通高等学校招生全国统一考试模拟试题(附答案)
重庆市永川中学高2017级上期12月月考语文试题
江西宜春三中2017届高三第一学期第二次月考文科综合试题
内蒙古赤峰二中2017届高三上学期第三次月考英语试题
2017年六年级(上)数学期末考试卷
2017人教版小学英语三年级上期末笔试题
江苏省常州西藏民族中学2016-2017学年九年级思想品德第一学期第二次阶段测试试卷
重庆市九龙坡区七校2016-2017学年上期八年级素质测查(二)语文学科试题卷
江苏省无锡市钱桥中学2016年12月八年级语文阶段性测试卷
江苏省无锡市钱桥中学2016-2017学年七年级英语12月阶段检测试卷
山东省邹城市第八中学2016-2017学年八年级12月物理第4章试题(无答案)
【人教版】河北省2015-2016学年度九年级上期末语文试题卷(附答案)
四川省简阳市阳安中学2016年12月高二月考英语试卷
四川省成都龙泉中学高三上学期2016年12月月考试题文科综合能力测试
安徽省滁州中学2016—2017学年度第一学期12月月考​高三英语试卷
山东省武城县第二中学2016.12高一年级上学期第二次月考历史试题(必修一第四、五单元)
福建省四地六校联考2016-2017学年上学期第三次月考高三化学试卷
甘肃省武威第二十三中学2016—2017学年度八年级第一学期12月月考生物试卷

网友关注

2015山东公务员考试考前申论三类模拟试卷
2014山东公务员面试8月17号真题
2015山东公务员考试行测答案解析-资料分析部分
2014山东公务员面试8月14号真题
2015山东公务员考试行测答案解析-言语理解与表达部分
2015山东公务员面试真题(7月18日下午)
2015山东公务员考试行测重要概念解读之选言命题
2016公务员面试热点模拟题:火车票登广告
2015山东公务员考试申论模拟试卷(B类)
2016公务员面试热点模拟题:小微企业税收优惠
2015山东公务员面试真题(7月20日上午)
2015山东公务员考试行测特色题型盘点
2015山东公务员面试真题(7月18日上午)
2015山东公务员考试行测模拟试卷(一)参考答案及解析
2016公务员面试热点模拟题:政府该管“8元一杯的白开水”吗?
2014山东公务员考试行测常识答案
2015山东公务员面试真题(7月19日下午)
2015山东公务员考试申论模拟试卷(C类)参考答案
2015山东公务员考试申论热点解读:破解养老服务业难题
2015公务员面试热点模拟题:整治网络谣言
2014年山东公务员考试行测真题
2014山东公务员考试行测冲刺模拟题
2015山东公务员考试行测真题解读:总题量为120道 难度较去年有所下降
2015山东公务员考试申论模拟试卷(C类)
2015山东公务员考试行测模拟试卷(二)参考答案及解析
2016公务员面试热点模拟题:扑克牌通缉令
2014山东公务员考试行测言语理解与表达答案
2016公务员面试热点模拟题:随迁子女如何接受义务教育
2016公务员面试热点模拟题:“大数据”时代的利与弊
2015山东公务员考试行测模拟试卷(二)

网友关注视频

外研版英语三起6年级下册(14版)Module3 Unit2
冀教版小学英语四年级下册Lesson2授课视频
化学九年级下册全册同步 人教版 第18集 常见的酸和碱(二)
二年级下册数学第二课
冀教版小学数学二年级下册第二单元《有余数除法的简单应用》
第五单元 民族艺术的瑰宝_16. 形形色色的民族乐器_第一课时(岭南版六年级上册)_T1406126
第五单元 民族艺术的瑰宝_15. 多姿多彩的民族服饰_第二课时(市一等奖)(岭南版六年级上册)_T129830
三年级英语单词记忆下册(沪教版)第一二单元复习
苏科版数学八年级下册9.2《中心对称和中心对称图形》
【部编】人教版语文七年级下册《泊秦淮》优质课教学视频+PPT课件+教案,湖北省
【部编】人教版语文七年级下册《泊秦淮》优质课教学视频+PPT课件+教案,广东省
8.练习八_第一课时(特等奖)(苏教版三年级上册)_T142692
《小学数学二年级下册》第二单元测试题讲解
每天日常投篮练习第一天森哥打卡上脚 Nike PG 2 如何调整运球跳投手感?
七年级英语下册 上海牛津版 Unit3
北师大版小学数学四年级下册第15课小数乘小数一
化学九年级下册全册同步 人教版 第22集 酸和碱的中和反应(一)
【部编】人教版语文七年级下册《老山界》优质课教学视频+PPT课件+教案,安徽省
外研版英语七年级下册module3 unit1第二课时
沪教版八年级下册数学练习册21.4(1)无理方程P18
沪教版八年级下册数学练习册21.3(2)分式方程P15
19 爱护鸟类_第一课时(二等奖)(桂美版二年级下册)_T502436
沪教版牛津小学英语(深圳用) 四年级下册 Unit 4
冀教版小学数学二年级下册1
冀教版小学数学二年级下册第二周第2课时《我们的测量》宝丰街小学庞志荣
二年级下册数学第一课
30.3 由不共线三点的坐标确定二次函数_第一课时(市一等奖)(冀教版九年级下册)_T144342
【部编】人教版语文七年级下册《过松源晨炊漆公店(其五)》优质课教学视频+PPT课件+教案,辽宁省
外研版英语七年级下册module3 unit2第一课时
8 随形想象_第一课时(二等奖)(沪教版二年级上册)_T3786594