探究培养液中酵母菌数量的动态变化

上传者：李永太
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上传时间：2015-04-22
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探究培养液中酵母菌数量的动态变化

广州市生物教研会第8周高二教研活动——实验操作学案

探究培养液中酵母菌数量的动态变化

广州市生物教研会高二中心组

一、探究原理

酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下能产生较多的CO2，在无氧条件下产生酒精和少量的CO2。在理想的无限环境中，即资源和空间十分充足，没有天敌和其他灾害等，酵母菌种群呈“J”型增长；现实中，资源和空间总是有限的，酵母菌种群呈“S”型增长。

酵母菌可以用液体培养基培养。培养基中酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关。我们可以以时间为横坐标，以培养液中酵母菌数量为纵坐标作曲线，从而掌握酵母菌的种群数量变化情况。

二、探究目的

初步学会酵母菌等微生物的计数及种群数量变化曲线的绘制

三、探究步骤

（一）血球计数板

利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的，所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。

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血球计数板，通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一横短浅槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个计数室，计数室呈方格网状（也就是说，每个血球计数板有两个计数室），每个计数室又分九个大方格。中央的大方格用于酵母菌、红细胞等体积较小的细胞的计数，四个角

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的大方格，用于白细胞等体积较大的细胞的计数。

中央大方格有2种规格，一种分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。另外一种分成16个中方格，每个中方格又分成25个小方格。无论哪一种规格，中央大方格都共有400个小格。

以分为25个中方格的大方格为例，每一个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm，所以每个大方格的容积为：长1mm×宽1mm×高0.1mm= 0.1mm。

中央大方格内的每一个中方格的容积=长0.2mm×宽0.2mm×高0.1mm=0.004mm 每个小方格的容积=长0.05mm×宽0.05mm×高0.1mm=0.00025mm

在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。

下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数（原溶液）：

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因1ml=1cm3=1000mm3，