姜黄素的安全性毒理学评价
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姜黄素的安全性毒理学评价
第6期张利萍,等.“5.12”特大地震两年后板房灾民生活质量评估
345678
747
示仍然应该关注极重灾区(北川县)灾民,给予他们更多的社会、心理支持,改善极重灾区灾民的心理状况。女性灾民在生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、情感职能、精神健康维度得差异有统计学意义。这可能因为男性在体能、对分较男性低,
身体状况、情绪稳定、心理因素方面疼痛的敏感性及耐受性、均优于女性。李宁秀等
[12]
汪向东,王希林,马弘.心理卫生评定量表手册(增刊)[M].中国1999:375-378.心理卫生杂志,
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Molecularbasisofstressevokedpsychiatric
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通过对四川省居民的生活质量进
结果显示,女性在生理机能、生理职能、躯体疼痛、一行评价,
般健康状况维度明显低于男性。地震灾区男、女灾民除了在同时还存在心理上的差别。在重大生活事件生理上的差别,
男、女心理上的区别表现得更为显著,有研究表明地震后下,
PTSD患者中女性比例高于男性
[13]
。其它方面,研究显示:年
9
婚姻、文化、居住人数、夫妻数都对板房灾民生活质量产生龄、
不同程度的影响,本研究提示有必要关注丧偶者、老年人的身改善板房居住环境、提供有针对性的健康教育,对提心健康、
高板房灾民的生活质量具有现实的意义。
不足之处在于,本研究未将家庭人均收入状况、及家庭因灾伤亡情况作为自变量纳入。
(致谢:本研究得到四川省江油县京江社区办,北川县擂鼓镇政府以
及板房灾民的大力支持,谨此致以诚挚的感谢!同时,作者要特别向参与何翠萍、张华强等表示由衷的谢意!)本研究的大学生志愿者唐超、
10111213
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12-29收稿日期:2010-
参考文献
12
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8020(2011)06-0747-03文章编号:1000-
··实验研究
姜黄素的安全性毒理学评价
李然
刘晓红
孔天
李颖
孙长颢
1
150001哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室,
摘要:目的通过姜黄素毒性实验研究,探讨姜黄素的安全性。方法急性毒性试验、鼠伤寒沙门菌试
姜黄素急性毒性试验中,大、
验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30d天喂养试验。结果
小鼠经口最大耐受量均大于12.0g/kg;鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠3个剂量组大鼠各项指标与对照组比精子畸形试验三项遗传毒性试验均为阴性结果;大鼠30d喂养试验中,较均无显著性差异。结论
姜黄素大/小鼠经口急性毒性试验属实际无毒物质,未见潜在的致突变、致微核
及致畸作用,无明显亚慢性毒性损害作用。
关键词:姜黄素
毒性实验
安全性评价文献标识码:A
类化合物,为食用色素的主要成分。其所具有的药理作用主抗肿瘤、抗氧化和降血脂、减肥、缓解药物毒要表现为抗炎、
性、提高机体免疫力、抗微生物等
:“十一五”科技支撑计划(No.2006BAD27B01,基金项目
2006BAD27B05)
作者简介:李然,女,硕士研究生,研究方向:植物化学物与营养相
E-mail:yo_yo1983@http://wendang.chazidian.com关疾病,
1通讯作者:孙长颢,E-mail:sun2002changhao@yahoo.com男,教授,
[1-3]
中图分类号:R961
姜黄素(curcumin)是从姜科姜黄属(CurcumaLonga)植物姜黄、莪术、郁金等的根茎中提取的一种低分子量天然多酚
。姜黄素具有风险小,潜
力大,并具有广泛的生理活性等种种优势。本课题组对姜黄素进行了两个阶段的毒理学评价
[4]
,为其安全性评价提供依
从而为合理开发、利用姜黄素提供理论依据。据,
748卫生1
材料与方法
1.1
材料
姜黄素粉末由河北食品添加剂有限公司提供。清洁级昆
明种小白鼠购自北京大学医学部实验动物科学部,实验动物合格证编号:SCXK(京)2006-0008。清洁级SD品系大白鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司,实验动物合格证编号:SCXK(京)2007-0001。在本院清洁级动物实验中心(屏障环境)饲养,许可证号:SYXK(黑)2006-010,温度为21~23℃,湿度为55%~58%。试验动物所用的清洁级饲料购自北京科澳协力饲料有限公司,许可证号:SCXK(京)2005-0007。1.2方法
1.2.1
急性毒性试验
采用最大耐受量(MTD)试验方法。
SD大鼠和昆明种小白鼠各20只,雌雄各半,体重分别为180~220g和18~22g,购买后在本实验室适应环境3天,禁食16h(不禁水),将样品以人体推荐剂量的4000倍即12.0g/kg于一日内按照20ml/kg分别给大、
小鼠经口灌胃,灌胃后观察大、小鼠的中毒表现和死亡时间,观察时间为14天。1.2.2
鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验
采用平板掺
入法进行试验。选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100和TA102共4株。活化系统为PCB-五氯诱导的雄性Wistar大鼠肝S-9液,按1∶9加入辅助因子(Ames1983年配方)配成10%S-9混合液,经阳性诱变剂活性鉴定符合试验要求。将受试样品经0.055MPa,
20min灭菌后,在无菌条件下用二甲基亚砜稀释成如下剂量组:50000、10000、2000、400和80μg/ml。除上述5个剂量组外,又设未处理对照组、
溶剂对照组(二甲基亚砜)和阳性对照组[加S-9用2-AF(TA102用1,8-二羟蒽醌),不加S-9用DEXON(TA100用叠氮钠)]。在加或不加S-9的条件下进行试验,需要代谢活化时加入用多氯联苯(PCB)诱导的大鼠肝匀浆作为体外代谢活化系统,37℃培养箱孵育48h,计算回变菌落数。试验在同条件下重复1次。1.2.3
小鼠骨髓细胞微核试验
昆明种小白鼠,体重25~
30g,共50只,在本实验室适应环境一周后,随机分成5组,每组10只,雌雄各半。高剂量组为12g/kg,中剂量组为6g/kg,低剂量组为3g/kg。阴性对照组经口灌胃1%羧甲基纤维素溶液;阳性对照组灌胃给予环磷酰胺,剂量为40.0mg/kg。样品以1%羧甲基纤维素溶液为溶剂,各组动物均按体重的2%容积进行灌胃。采用30h给受试物法,即二次给受试物间隔24h,第二次给受试物后6h颈椎脱臼处死小鼠,取股骨,常规制片。显微镜双盲法阅片,每只小鼠观察1000个嗜多染红细胞(PCE),记录有微核的嗜多染红细胞数,计算出微核率。每只动物计数200个红细胞,观察嗜多染红细胞与成熟红细胞比值。1.2.4
小鼠精子畸形试验
昆明种雄性小白鼠25只,体重
25.0~30.0g,随机分成5组,每组5只。设3个剂量组,剂量设计同小鼠骨髓微核实验。阴性对照组经口灌胃1%羧甲基纤维素溶液。阳性对照组灌胃给予环磷酰胺,剂量为40.0mg/kg。样品以1%羧甲基纤维素溶液为溶剂,各组动物均按体重的2%容积进行灌胃。每日一次,连续5天。各组动物均于首次投与检样后35天处死,按常规方法制片、固定、2%伊红染色,每只小鼠镜检1000个完整精子,计算畸形率。1.2.5
30天喂养试验
采用刚断乳的SD大白鼠80只,体
重60~90g,随机分成4组,每组20只,雌雄各半,共设3个剂
研究第40卷
量组和1个阴性对照组。高剂量组为300mg/kg(相当于人体推荐剂量的100倍),中剂量组为150mg/kg(相当于人体推荐剂量的50倍),低剂量组为75mg/kg(相当于人体推荐剂量的25倍)。受试物采用经口灌胃方式给予动物,各剂量组均按体重的1%给予,
阴性对照组给予1%羧甲基纤维素溶液。各组动物单笼喂养,自由饮水、进食,每周称一次体重,并记录食物摄入量,
30天后处死大鼠做血液学、血液生化、病理组织学检查及脏器系数计算。
每天观察并记录动物的一般表现、行为、中毒症状及死亡情况。每周记录一次体重和两次食物摄入量,
计算每周及总的食物利用率。实验结束时,采血检测血液学指标,包括血红
蛋白含量、
红细胞计数、白细胞计数及其分类。检测生化指标,包括谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、血糖(Glu)、血清白蛋白(Alb)、总蛋白(TP)、总胆固醇(TCH)和甘油三酯(TG)。同时取出肝、肾、脾、睾丸称重,计算脏/体比,并进行高剂量组和对照组动物肝、肾、脾、胃肠、睾丸及卵巢的组织病理学检查。
2
结果
2.1
急性毒性试验
在14天的观察期间内,两性别大、小鼠一般状态良好,未
出现任何中毒症状,无动物死亡。根据试验所设计的剂量,观察到的结果及大、小鼠急性毒性判定标准,可以认为姜黄素大、小鼠经口最大耐受量均大于12.0g/kg,属实际无毒物质。2.2
鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验)姜黄素对Ames各试验菌株在加与不加活化系统条件下,
结果与阴性对照组菌落数相比,均未超过2倍以上,亦无剂量-反应关系,故说明姜黄素对鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株均无致突变性。2.3
小鼠骨髓细胞微核试验
3个剂量组雌、雄小鼠微核发生率为0.16%~0.20%,阴性对照组为0.12%~0.15%,阳性对照组分别为2.64%和3.04%。3个剂量组与阴性对照组比较,微核发生率差异均无显著性(P>0.05),而阳性对照组微核率明显高于阴性对照组(P<0.01)。表明姜黄素对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显影响。2.4
小鼠精子畸变试验
3个剂量组小鼠精子畸形发生率分别为1.62%、1.62%和1.54%,阴性对照组为1.60%,阳性对照组为5.68%。3个剂量组与阴性对照组比较,小鼠精子畸形发生率差异均无显著性(P>0.05),而阳性对照组则明显高于阴性对照组(P<0.01)。表明姜黄素对小鼠精子畸形发生率未见明显影响。2.530天喂养试验2.5.1一般状况观察
在整个试验过程中,各组动物一般状
况良好,行为正常,未见任何中毒表现,亦无动物死亡。
2.5.2
姜黄素对大鼠体重增长、进食量、食物利用率的影响各剂量组雌、雄大鼠的体重增长情况良好,与对照组比较均无显著性差异。各剂量组雌、
雄大鼠的增重、进食量及食物利用率与对照组比较差异均无显著性。表明姜黄素对大鼠体重增长、进食量及食物利用率均未见明显影响。2.5.3
姜黄素对大鼠血液学指标的影响
雌、雄大鼠对照组
和各剂量组的红细胞计数在(8.62±0.48)×1012
/L~(8.68±
第6期
李然,等.姜黄素的安全性毒理学评价
749
表1
姜黄素对大鼠体重增长、进食量、食物利用
率的影响(n=10,
x±s)性别组别体重增加进食量总食物利用
(g)(g)率(%)雄性
高剂量组154.0±5.95549.2±11.3728.1±1.13中剂量组149.7±4.04552.3±11.1027.1±0.73低剂量组154.5±7.31549.8±10.3928.1±1.03阴性对照组
152.0±6.70549.9±7.8427.6±1.28雌性高剂量组115.5±3.23454.3±10.6425.4±0.75中剂量组117.2±4.73453.7±11.5625.8±0.66低剂量组117.3±3.44454.7±11.0025.8±0.85阴性对照组
116.6±4.00
460.0±11.63
25.9±0.76
0.48)×1012/L、血红蛋白含量在(155.0±5.65)~(156.7±
5.70)g/L、白细胞计数(10.63±1.93)×109
/L~(15.90±
1.92)×109/L,均在正常参考值范围内。各试验组与阴性对照组相比,
差异均无显著性(P>0.05)。说明姜黄素对大鼠红细胞总数、血红蛋白含量和白细胞总数无明显的影响。雌、雄大鼠对照组和各剂量组的嗜酸性细胞在(0.7±0.82)%~(0.9±0.88)%、嗜碱性细胞在(0.1±0.32)%~(-0.2±0.42)%、中性淋巴细胞在(24.4±3.81)%~(25.6±5.21)%、淋巴细胞在(72.7±4.92)%~(74.3±4.67)%、单核细胞在(0.4±0.70)%~(0.7±0.82)%,均在正常值范围之内,且各试验组与阴性对照组相比,差异均无显著性(P>0.05),说明姜黄素对各型白细胞均无明显影响。2.5.4
姜黄素对大鼠血生化的影响
雌、雄大鼠对照组和各
剂量组的血液各生化指标:AST(171.09±18.03)~(175.40±16.43)U/L、ALT(43.31±3.37)~(46.12±2.83)U/L、TP(55.63±3.00)~(60.73±4.38)U/L、Alb(39.21±1.05)~(40.75±1.71)U/L、Glu(5.21±0.61)~(5.69±0.82)U/L、
BUN含量(5.82±1.02)~(6.55±0.84)U/L、TC(1.60±0.27)~(1.87±0.29)U/L、TG(0.70±0.16)~(0.87±0.20)U/L、Cr(58.70±8.10)~(67.20±9.43)U/L,指标的检测结果均在正常参考值范围内,进行方差分析后各组差异均无显著性(P>0.05),说明在30天喂养试验中,姜黄素对大鼠血液生化学指标无影响。2.5.5
姜黄素对大鼠脏器重量、脏体比的影响
各剂量组
雌、雄大鼠的脾重和脾体比、肝重和肝体比、肾重和肾体比与对照,睾丸(卵巢)和睾丸(卵巢)体比与对照组比较差异均无显著性(P>0.05),说明在30天喂养试验中,姜黄素对大鼠脏器重量及脏体比值无影响。
2.5.6大鼠组织病理学观察结果
大鼠大体解剖观察均未
发现异常改变。病理切片镜检,取高剂量组和对照组雌、雄动
物的肝、脾、肾、胃、肠、睾丸(卵巢)等主要脏器进行组织病理学检查。雄性高剂量组3例、
对照组2例和雌性高剂量组3例、对照组3例标本内可观察到肝汇管区内有少量炎性细胞浸润灶。雄性高剂量组1例、对照组2例和雌性高剂量组1例、对照组1例标本内可观察到脾脏瘀血。雄性高剂量组2例、对照组2例标本内可观察到少量精上皮细胞变性。肾、胃、肠、卵巢均未见异常改变。以上变化对照组和高剂量组比较均未见明显差异。说明姜黄素对大鼠大体解剖、组织学观察结果未见明显影响。
3讨论
姜黄素的毒理学试验表明:姜黄素大/小鼠经口急性毒性
试验属实际无毒物质;未见潜在的致突变、致微核及致畸作用;大鼠30天喂养试验未见明显毒性反应,
其对大鼠的生长发育、血液学指标、血生化及脏体比等指标均未见明显影响,对大鼠大体解剖、组织学观察结果也均未见明显不良影响。实验结果表明,开发姜黄素类食品安全性较高,基本无毒副作用。因此,姜黄素在食品、医药等领域的应用开发具有十分广阔的前景。
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