-AMH对卵泡募集的调控机制

AMH与卵泡发育波的启动募集

摘 要：抗缪勒氏管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)在卵泡发育中起着重要作

用。早在2001年，通过对AMH缺失大鼠的研究得出AMH缺失大鼠比

野生型大鼠有更多原始卵胞被募集的结论。近年来，越来越多的研究表

明AMH在卵泡发育中起着重要作用.早期研究已经揭示出AMH抑制了

原始细胞向初级卵泡的转化过程。然而，AMH对卵泡启动募集的抑制

机理仍然不是十分清楚。本文对AMH的来源及其对卵泡启动募集的调

控机理进行了综述。

关键词：抗缪勒氏管激素，发育波机理，卵泡启动募集

在卵泡形成后 ,部分原始卵泡脱离原始卵泡库，开始缓慢生长。此即所谓的原始卵泡启动募集(initial recruitment)。原始卵泡的启动募集是一个复杂的过程，它直接决定了哺乳动物一生中可利用的卵泡的数量。因此，原始卵泡的启动募集对于哺乳动物的繁殖至关重要。一直以来，对原始卵泡启动募集调控机制的研究一直没有停止。然而，相对于对卵泡发育其他阶段调控机理的研究，原始卵泡启动募集的调控机理至今还不是很清楚。人们最初对于抗缪勒氏管激素（AMH）的理解，主要是基于它对性别分化方面的作用。从上世纪九十年代开始，人们越来越多的发现它对原始卵泡的发育具有重要作用。1996年，Wandji等发现牛的原始卵泡在非血清的培养体系中存活并启动募集[1]。这似乎暗示了血清中某种因素抑制了原始卵泡生长的启动。在1999年，Durlinger等通过对AMH缺失大鼠的研究得出AMH缺失大鼠比野生型大鼠有更多原始卵胞被募集[2]，进而首次得出AMH抑制了原始卵泡募集的结论。从此，AMH再次引起极大的关注。然而,一直到今天，有关AMH对卵泡发育调控机理的研究仍在进行，具体的机制仍不清楚。但不可否认的是，AMH对卵泡发育具有重要的作用，而且血清

中AMH水平可以作为卵巢储备的一个重要指标[3]。近年来，世界上有关AMH对动物繁殖性能影响的研究越来越多，但关于AMH对卵泡募集影响的研究尤其是在国内还相对比较少。本文对AMH的表达并着重对AMH对卵泡启动募集调节机制的研究进展进行了综述。

1 AMH的分子生物学特性

抗缪勒氏管激素(anti-Müllerian hormone, AMH), 也叫缪勒氏管抑制物(Müllerian inhibiting substance, MIS)，是生长和转化因子

TGF-家族中的一员。它是由二硫键链接而成的糖蛋白二聚物[4]。它的名称是为了纪念一位著名的科学家约翰内斯·彼得·米勒[5]。AMH的分子量是140 ku，人类 AMH 基因位于第19号染色体短臂，其长度为2750 bp， 包含五个外显子[6]。其长度为2750 bp， 包含五个外显子[7]。与其他

TGF-家族成员不同的是，AMH仅限于在性腺表达[8]。 在雄性动物中，抗苗勒氏管激素(anti-Müllerian hormone ,AMH)由睾丸支持细胞分泌 ,具有抑制雄性苗勒氏管发育的作用[9]，这也是它为什么又称作MIS的原因；在雌性动物卵巢中，AMH主要由颗粒细胞分泌，少量在卵巢膜细胞表达[10]。 2 AMH的表达与原始卵泡发育

原始卵泡发育是一个极为复杂的过程。卵泡由一个居于核心的卵细胞及周围的颗粒细胞和卵泡膜细胞所组成。原始卵泡启动生长以后，便经历一个连续不断的发育和分化过程，研究表明，FSH/LH浓度升高时，参加启动募集的原始卵泡数量也增加[11]，然而，然而在启动募集期间卵泡尚无 FSH受体表达。Wandji等

[12]发现 ,切除垂体的动物其原始卵泡依然能够发育到周期募集前。这说明原始卵泡的启动募集有一些未知因子参加，而不再是单纯的下丘脑-垂体性腺轴的政府反馈调节。在卵巢中，AMH主要在腔前卵泡和小的有腔卵泡上表达，在原始卵泡和大的有腔卵泡上不见其表达[13]。通过免疫组织化学方法对人卵巢的研究发现，AMH在出生后第2天在卵巢内开始有表达，原始卵泡周围的颗粒细胞上可见AMH表达，在腔前卵泡和小的有腔卵泡的颗粒细胞表达最为明显，随着卵泡的继续发育，AMH的表达逐渐消失[14]。这与1999年Rajpert-DeMeyts[15]等对人的胎儿期和出生后卵泡的研究结果相似。因此，AMH在原始卵泡发育过程中的的表达具有时空特异性。

一些卵泡在启动募集时，其余的原始卵泡保持静止状态长达数月甚至数年，似乎是参与启动募集的卵泡由于脱离了某种抑制作用而开始生长[16]。1999年，Durlinger等对 AMH 基因缺失小鼠的研究发现，AMH 基因缺失的雌性小鼠在出生前后原始卵泡库的形成无明显差异，然而25日龄后发现AMH缺失小鼠有着更多原始卵泡被募集，到4月龄发现，AMH缺失小鼠原始卵泡数目相对于野生型明显减少，12个月龄的AMH缺失小鼠卵巢内已经几乎不见原始卵泡，而且AMH缺失小鼠的原始卵泡对FSH表现出更大的敏感性[2] [17]。在2002年Durlinger[18]等在体外培养的小鼠原始卵泡中发现，添加AMH的试验组相对于对照组生长卵泡减少40%～50%。这不仅证明了AMH是原始卵泡启动募集的一个抑制因子，而且AMH可以降低原始卵泡对FSH的敏感性[16]。然而对于AMH究竟怎样参加卵泡募集的调控至今还没有一个明确的答案。但大量研究结果表明生长卵泡所产生的AMH可以形成反馈信号来调控原始卵泡的启动募集[14] [19]。 3 AMH对原始卵泡启动募集的调节机制

AMH是生长和转化因子

TGF-家族中的一员，有人认为AMH调控卵泡启动募集的信号通路与其所在家族的其他成员如

TGF-、骨形态发生蛋白、激活素相似，这些因子通过丝氨酸-苏氨酸激酶受体起作用，这些受体包括配体特异性II型受体和一系列I型受体，其中I型受体也就是为人们所知的激活素受体样蛋白激酶（ALKs）[19]。AMH的一种II型受体（AMHRII）在1994年已被发现[20]，并被证明对于AMH信号通路是必要的[21]。AMH受体在早期生长卵泡上有表达

[22]，但是它在卵泡上的具体位置仍不清楚[5]，AMH在卵泡发育过程中的作用位点仍有待研究。

目前，对AMH调控卵泡募集信号通路的的研究目前仍处于探索阶段。研究发现被激活的AMH受体可使细胞浆内Smad蛋白激活并转移到细胞核，从而直接或间接影响了基因的表达[19]。2007年Eric Nilsson等用AMH处理体外培养的4日龄新生大鼠卵巢后发现，AMH可以影响707种基因的表达，总的结果是AMH可以使原始卵泡发育的正向因素减少，负向因素增加，即AMH抑制了原始卵泡的募集。研究还发现AMH对Smad基因具有抑制作用，表明AMH对TGF-家族成员有抑制作用[23]。一些对卵泡募集有促进作用的细胞因子例如GDF9[24] 、

BMP15[25]和BMP4[26]在AMH处理组中的表达都受到了抑制[21]。尽管AMH属于转化因子

TGF-家族中的一员，但AMH要么不参与

TGF-的信号通路，要么对其有负反馈调节作用[23]。但具体的调控机制还不清楚。2006年Droguett等发现，AMH处理过的卵巢中针对

TGF-信号通路的某种抑制剂增多，而

TGF-的表达减少[27]，因此大量事实表明AMH在TGF-的信号通路中具有负反馈调节的作用，但具体的调节机制仍有待研究。

4 AMH的应用前景

AMH对卵泡募集有重要作用，目前已成为人们研究卵泡发育的一个热点。除此之外，AMH还有许多其他用途。AMH作为卵巢功能的一个重要指标，例如卵巢储备，确切的说是原始卵泡库的质量和数量[28]，因此AMH可以作为临床上评估卵巢功能的一个重要指标[29]。研究发现，与FSH、 抑制素 B 、雌激素相比，月经第3天血清AMH水平能更好地反映卵巢有腔卵泡的数量[30]，因此血清中AMH水平更能体现出妇女的生育能力[31]，而且AMH作为一个卵巢老化的指标非常有效[32]。目前，有关AMH对卵泡发育尤其是对卵泡募集的调控机理仍不十分清楚，还有很多问题有待解决。但不可否认，在将来对AMH及其相关信号通路的研究会成为一个研究动物繁殖性能的一个重要途径。

参考文献：

［1］ Wandji SA, Srsen V, Voss AK, Eppig JJ and Fortune JE. Initiation in vitro of growth of

bovine primordial follicles [J]. Biol Reprod, 1996, 55,942–948.

［2］ Durlinger AL, Kramer P, Karels B, de Jong FH, Uilenbroek JT, Grootegoed JA and

Themmen AP. Control of primordial follicle recruitment by Anti-Müllerian hormone in the mouse ovary [J]. Endocrinology, 1999,140, 5789-5796.

［3］ Seifer, D.B., MacLaughlin, D.T., Christian, B.P., Feng, B., Shelden, R.M.. Early

follicular serum Müllerian -inhibiting substance levels are associated with ovarian response during assisted reproductive technology cycles [J]. Fertil. Steril. 2002, 77, 468–471.

［4］ Visser JA & Themmen AP. Anti-Müllerian hormone and folliculogenesis [J]. Molecular

and Cellular Endocrinology, 2005,234 81–86.

［5］ http://wendang.chazidian.com/wiki/Anti-M%C3%BCllerian_hormone.

［6］ Cohen-Haguenauer, O., Picard Mattei, J.Y., Mattei, M.G., Serero, S., Nguyen, V.C., de

Tand, M.F., Guerrier, D., Hors-Cayla, M.C, Josso, N. & Frezal, J. Mapping of the gene for Anti-Müllerian hormone to the short arm of human chromosome 19 [J]. Cytogenetics and Cell Genetics, 1987, 44, 2–6.

［7］ La Marca A, Volpe A. Anti-Müllerian hormone (AMH) in female reproduction: is

measurement of circulating AMH a useful tool? [J]. Clin Endocrinol . 2006, 64 (6): 603 - 610.

［8］ Josso N, Clemente N. Transduction pathway of Anti-Müllerian hormone, a sex-specific

member of the TGF-β family [J]. Trends Endocrinol Metab, 2003, 14(2):91-97.

［9］ Josso, N., Cate, R.L., Picard, J.-Y., Vigier, B., di Clemente, N., Wilson,C., Imbeaud, S.,

Pepinsky, R.B., Guerrier, D., Boussin, L., Legeai, L., Carre-Eusebe, D. . Anti-Müllerian hormone: the Jost factor [J]. 1993,Rec. Progr. Horm. Res. 48, 1–59.

［10］ Ku LT.Nakajima ST.McClure ME. Follicular fluid of single follicles from women with

PCOS contains higher levels of Müllerian inhibiting substance [J].Fertility and Sterility,2007，88, Suppl 1 :179-180.

［11］ Wandji SA. Initial in vitro growth of bovine primordial follicle [J]. Biol

Reorod,1996, 55 :942～948.

［12］ Baob, Garverick HA. Expression of steroid genicen enzyme and gonadotropin receptor

genes in bovine follicular waves. J Anim Sci ,1998, 76:1903-1931.

［13］ Baarends WM, Uilenbroek JT, Kramer P, Hoogerbrugge JW, van Leeuwen EC,

Themmen AP, Grootegoed JA. Anti-Mullerian hormone and Anti-Müllerian hormone type II receptor messenger ribonucleic acid expression in rat ovaries during postnatal development, the estrous cycle, and gonadotropin-induced follicle growth [J]. Endocrinology, 1995, 136:4951–4962.

［14］ Weenen C, Laven JS, Von Bergh AR, et al. Anti-müllerian hormone expression pattern

in the human ovary: potential implications for initial and cyclic follicle recruitment [J]. Mol Hum Reprod, 2004, 10(2):77-83.

［15］ Rajpert-DeMeyts E, Jorgensen N, Graem N, Muller J, Cate RL and Skakkebaek NE.

Expression of Anti-Müllerian hormone during normal and pathological gonadal development: