高转移潜能人肝癌细胞特异性结合肽对肝癌侵袭和转移的影响

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．基础研究．

高转移潜能人肝癌细胞特异性结合肽

对肝癌侵袭和转移的影响

荚卫东王伟汤钊猷许戈良孙惠川周海军

【摘要】目的研究高转移潜能人肝癌细胞特异性结合肽（ＡｗＹＰ【腓’肽）对肝癌侵袭和转移的

影响。方法采用Ｍａｔｒｉｇｅｌ侵袭实验、迁移实验、二苯基溴化四氮唑蓝（Ｍ，ｒＩ＇）实验以及黏附实验，探讨Ａ唧聊’肽对高转移潜能人肝癌细胞ＨｃｃＬＭ３侵袭表型的影响。裸鼠皮下接种ＨｃｃＬＭ３细胞，

建立肿瘤肺转移模型，观察ＡｗＹｌＰＬＰＰ肽对ＨｃｃＬＭ３肺转移的影响。结果

Ｈｃｃｕ仍细胞皮下接种３０侵袭实验结果显示，在ＡｗＹＰＬＰＰ肽浓度为０．１—１００Ⅳ∞Ｌ，Ｌ时，能显著促进ＨｃｃＬＭ３细胞的侵袭能力，呈剂量效应关系。迁移实验、ＭＴＴ实验和黏附实验表明，ＡＷＹＨＰＰ’肽对ＨｃｃＬＭ３细胞的迁移、增殖和黏附能力无影响。ｄ后处死裸鼠，ＡｗⅢＰＰ肽组出现明显的肺转移，肺转移率为８８．９％（８／９），

与ＰＢｓ组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５），但对皮下肿瘤的生长无明显影响。结论ＡｗＹＰＬＰＰ

肽能促进高转移潜能人肝癌细胞体外侵袭能力以及肿瘤肺转移；进一步寻找肿瘤细胞表面与

ＡＷＹＰＬＰＰ肽结合的受体，可能为深入研究肝癌侵袭转移的机制和设计干预治疗的靶点提供新思路。

【主题词】肝肿瘤；ＡｗＹＰＬＰＰ肽；肿瘤侵袭；肿瘤转移

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ｍｅｔａ８恤ｉｓ

ＤＯｌ：１０．３７６０／ｃ眦．ｊ．ｉⅫ．０２５３－３７６６．２∞９．０４．００ｌ

基金项目：国家自然科学基金（３０ｒ７７２０９７）；安徽省自然科学基金（ｃｒ７０４１３０ｒ７３）；安徽省优秀青年科技基金（０８０４０１０６８１８）；安徽省“１１５”产业创新团队项目

作者单位：２３０００ｌ合肥，安徽医科大学安徽省立医院肝脏外科（荚卫东、王伟、许戈良）；复旦大学中山医院肝癌研究所教育部癌变与侵袭原理重点实验室（汤钊猷、孙惠川、周海军）

通信作者：荚卫东，Ｅｍａｉｌ：ｊｗｄｌ９６８＠８ｉＩｌａ．锄

生垡旦生擅苤查！塑生！旦筮！！鲞筮堡翅￡堕！』Ｑ！型：△Ｐ逊兰塑。∑尘：！！：堕！：堡

抑制肿瘤转移复发已成为进一步提高肝癌生存率的关键，临床上迫切需要探索肝癌侵袭转移的分子机制和设计干预治疗的新方法…。我们先前利用遗传背景相似、转移潜能不同的人肝癌细胞株阶梯转移模型，采用噬菌体随机肽库技术，筛选出能选择性与高转移潜能人肝癌细胞表面结合的短肽（ＡＷＹＰＬＰＰ肽）悼Ｊ。本研究旨在探讨ＡｗＹＰＬＰＰ肽对高转移潜能人肝癌细胞ＨｃｃＬＭ３侵袭和转移的

影响。

材料与方法

一、材料与试剂

高转移潜能人肝癌细胞株ＨｃｃＬＭ３由复旦大学肝癌研究所建立，用１０％胎牛血清（ＦＢｓ）和高糖ＤＭＥＭ培养液进行传代培养。雄性ＢＡＬＢ／ｃ

ｎｕ／ｎｕ

裸小鼠，４～６周龄，体重１８～２０ｇ，购自中国科学院上海分院药物研究所，在无特殊病原体环境下饲养。ＡｗＹＰＬＰＰ肽和对照肽（含有相同氨基酸组分，但随机组合的肽段ＰＡｗＹＰＬＰ）由上海Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司合成，经高压液相色谱分析，纯度达９９％以上；高糖

ＤＭＥＭ和ＲＰＭＩ１６４０培养液购自ＧＩＢｃＯ公司；纤维

连接蛋白（铀ｍｎｅｃｔｉｎ，ＦＮ）和二苯基溴化四氮唑蓝

（ＭｒＩｆＩ＇）是Ｓｉｇｍａ公司产品；Ｍａｔｌｉｇｅｌ为ＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ公司产品；１０％ＦＢＳ为Ｈｙｃｌｏｎｅ产品。

二、实验方法

１．Ｍａｔｒｉｇｅｌ侵袭实验：使用２４孔微孔膜小室装置ＴｒａｎｓｗｅＵ（美国Ｃｏａｓｔｅｒ公司）和８“ｍ微孔滤膜。取对数生长期ＨｃｃＬＭ３细胞，无血清培养液制备单

细胞悬液。取肝癌细胞培养上清液、ＮＩＨ３乃细胞培养上清液和新鲜含１０％ＦＢＳ的培养液，按１：ｌ：１的

比例充分混合，作为条件培养液。Ｍａｔｒｉｇｅｌ与无血清

培养液混合作为人工基底膜，ＴｒａｎｓｗｅＵ上室加入７５

山人工基底膜。ｌ×１０５ＨＣＣＬＭ３细胞与梯度稀释的ＡｗＹＰＬＰＰ肽或对照肽加入上室各孔，下室各孔加入８００¨ｌ条件培养液。在３７℃、５％ｃＯ：培养箱

孵育２４ｈ后取出小室，吸弃液体，擦净基底膜胶，姬

姆萨染色、固定。镜下计数迁移到滤膜背面的细胞。

２．迁移实验：方法类似上述侵袭实验，但

７ｒｍｎｓｗｅＵ上室未加入Ｍａｔｒｉｇｅｌ人工基底膜。１×ｌＯ’ＨｃＣＬＭ３细胞与梯度稀释的ＡｗＹＰＬＰＰ肽或对照肽

加入上室各孔，下室各孔加入８００山条件培养液。

在３７℃、５％ｃＯ：培养箱孵育１６ｈ后取出小室，吸弃

液体，姬姆萨染色、固定。镜下计数迁移到滤膜背面

的细胞。

３．ＭＴＴ实验：对数生长期ＨｃＣＬＭ３细胞制成单细胞悬液，以ｌ×１０４爪／孔接种于９６孔培养板，在含１０％ＦＢＳ的高糖ＤＭＥＭ培养液中，３７℃、５％

ｃ０：培养２４ｈ；更换培养基，加入含不同浓度的ＡｗＹＰＬＰＰ肽或对照肽，继续温育４８ｈ；加入５ｍｇ／ｎｌｌ

Ｍ１Ｔｒ

１０斗ｌ，３７℃、５％ｃ０２温育４ｈ；弃上清，加入１００

一二甲基亚砜，避光摇动１５ｌｌｌｉｎ；酶标仪（美国Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司）上测定各孔在４９２ｎｍ处的吸光度（Ａ）

值，参比波长６３０

ｎｍ。

４．黏附实验：将１×１０６／ＩＹｌｌ的ＨＣＣＬＭ３细胞悬

液加入ＦＮ包被的９６孔细胞培养板上，每孔１００山，同时加入高糖ＤＭＥＭ培养液１００山；在培养孔内加

入含不同浓度的ＡＷＹＰＬＰＰ肽或对照肽；３７℃、５％

ｃＯ：温育３ｈ，Ｈａｎｋ液冲洗３次除去未黏附细胞；

ＭＴＴ法定量测定各孔在５７０ｎｍ处的Ａ值，参比波长６３０

ｎｍ。

５．裸小鼠ＨｃｃＬＭ３细胞皮下移植模型的建立∞Ｊ：以无菌ＰＢｓ制备ＨＣＣＬＭ３单细胞悬液，按

５×１０５细胞／ｏ．２ｍ１接种于３０只裸鼠右肩背部皮

下，接种后观察皮下瘤的生长，建立裸小鼠ＨＣＣＬＭ３

细胞皮下移植模型。

６．实验动物分组及处理：皮下接种１０ｄ后，将

成瘤的２７只裸鼠随机分为ＰＢＳ组、对照肽组和

ＡｗＹＰＬＰＰ肽组，每组９只。ＡｗＹＰＬＰＰ肽组和对照肽组裸鼠按１００灿ｇ／只剂量皮下注射ＡｗＹＰＬＰＰ肽和对照肽，ＰＢＳ组注射等体积的ＰＢｓ，１次／２ｄ，共用

药２０

ｄ。

７．观察指标：观察裸鼠的进食和一般活动状

况，于接种３０ｄ后，用脱颈法处死裸鼠，切取皮下肿瘤并称重；切取肺脏，ｌＯ％中性甲醛固定，石蜡包埋，常规４ｕｍ连续切片，每只裸鼠双肺的切片数在１３０～

１８０张，ＨＥ染色，光镜下观察有无肺转移灶。

三、统计学方法

．

使用ＳＰＳＳ１１．０统计学软件，组间均数比较采用单因素方差分析，肺转移率的比较采用Ｆｉｓｈｅｒ精确概率法检验，Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。

结

果

１．ＡｗＹＰＬＰＰ肽对ＨｃｃＬＭ３细胞侵袭的影响：

在ＡＷＹＨＰＰ’肽浓度为０．０ｌ¨舯ＤＬ／Ｌ时，对ＨＣＣＬＭ３细胞侵袭无明显影响；ＡＷＹＰＬＰＰ肽浓度为０．１—１００斗ｍｏＬ／Ｌ时，能显著促进ＨＣＣＬＭ３细胞的侵袭能力，呈剂量效应关系；对照肽对ＨＣＣＬＭ３细胞侵袭无明显影响（图１、２）。

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?２４３?

Ｉａ：Ｏ岬１０ⅣＬＡｗＹＰＬＰＰ肽；１ｂ：Ｏ．０１叫１０∥ＬＡｗⅥ’ＬＰＰ肽；ｌｃ：Ｏ．１阻ｍ彬Ｌ

ｌｅ：ｌＯ斗ｒｎｏＶＬ

ＡＷＹＰ【肿肽；ｌｄ：ｌⅣ∞Ｌ／ＬＡＷＹＰＬＰＰ肽；

×２００

ＡｗＹＰＩＰＰ肽；ｌｆ：１００斗ｎｌｏＬ／ＬＡｗＹＰＬＰＰ肽

图１镜下观察不同浓度ＡｗＹＰＬＰＰ肽对ＨｃｃＬｍ细胞侵袭能力的影响姬姆萨染色

３．ＡＷＹＰＬＰＰ肽对ＨＣＣＬＭ３细胞增殖的影响：

在浓度为０．０１—１００岬ｏＬ／Ｌ时，ＡＷＹＰＩ脚肽和对照

６０

肽对ＨＣＣＬＭ３细胞增殖能力均无明显影响（图４）。

１．２

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２０

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Ｏ

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０．Ｕｌ

０．１

ｌ

ｌＯ

１００

三

ｏ

ｏ．６

多肽浓度（ｕ∞ｌ／Ｌ）

图２

ＡｗＹＰＩ胛肽促进ＨＣＣＬｈｌ３细胞侵袭能力

０．３

２．ＡＷＹＰⅡ．Ｐ肽对ＨＣＣＬＭ３细胞迁移的影响：在浓度为０．Ｏｌ～１００岬∞Ｌ／Ｌ时，ＡＷＹＰＬＰＰ肽和对照肽对ＨｃＣｕＢ细胞迁移能力均无明显影响（图３）。

１５

０

Ｏ

０．Ｕｌ

０．１

Ｉ

１０

１００

多肽浓度（ｕｍｏｌ几）

圈４

ＡｗＹＰＬＰＰ肽对ＨＣｃＬＭ３细胞增殖能力无明显影响

４．ＡＷＹＰＩＪＰＰ肽对ＨＣＣＬＭ３细胞黏附的影响：在浓度为０．０１～１００斗ｍｏＬ／Ｌ时，ＡｗＹＰＩＪ）Ｐ肽和对照

ｌＯ

籁翟骡潍蚶

肽对ＨＣＣＬｌⅥ３细胞黏附能力均无明显影响（图５）。

５．ＡＷ＾ＹＰＬＰＰ肽对ＨＣＣＬＭ３细胞肺转移的影响：ＨＣＣＬＭ３细胞皮下接种３０ｄ后处死裸鼠，ＰＢＳ

５

组、对照肽组和ＡＷＹＰＬＰＰ肽组的皮下肿瘤重量分

另０为（１．３３±０．３１）ｇ、（１．５±０．４２）ｇ和（１．７３±

Ｏ

Ｕ

Ｏ．（Ｊｌ

（ｆ．Ｉ

ｌ

ＩＯ

１００

０．４７）ｇ，差异无统计学意义；肺转移率分别为２２．２％

多肽浓度（ｕ∞ｌ几）

图３

ＡＷＹＰＬＰｐ肽对ＨＣＣＬ￣Ｂ细胞迁移能力无明显影响

（２／９）、３３．３％（３／９）和８８．９％（８／９），ＡＷＹＰＩ胛组

与ＰＢＳ组比较，差异有显著意义（Ｐ＜０．０５），且

ＡｗＹＰＬＰＰ肽组荷瘤裸鼠肺转移灶更加明显（图６）。

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的侵袭性密切相关，而癌细胞黏附、侵袭和迁移等侵

袭性生物学行为均需要细胞因子或表面分子参

与Ｈ引。因此，深入研究高转移潜能肝癌细胞表面分

子及其特异性结合肽，可能为Ｉ临床研究肝癌侵袭转

移的机制和设计干预治疗的靶点提供新思路。

噬菌体随机肽库技术被认为是筛选肿瘤细胞特

异性结合肽的强有力、高通量、简便、经济的新技术，

可在靶分子未知的情况下筛选完整的细胞，适用于

Ｕ（Ｊ．（Ｊｌ（Ｊ．Ｉｌ１０１００

多肤浓度（ｕｍｏｌ几）

图５ＡｗＹＰＩ。ＰＰ肽对ＨｃｃＬＭ３细胞黏附能力无明

显影响筛选复杂的、经常改变细胞表面的肿瘤细胞一－。近年来，利用噬菌体随机肽库技术，经体内或体外筛选，获得了一系列与肿瘤细胞表面分子特异性结合

的多肽，可能在肿瘤的转移侵袭、预后判断、靶向治讨论疗以及进一步寻找肿瘤细胞表面的受体等方面具有

潜在的临床应用价值【７。１１Ｊ。原发性肝癌是亚洲和非洲最常见的恶性肿瘤之

一，手术切除仍是目前最有效的治疗方法，但根治性

切除术后５年转移复发率高达６０％一７０％，转移复

发是影响肝癌远期疗效的主要原因…。有研究表

明，肝癌的转移复发可能起源于原发瘤阶段，是一个我们先前利用遗传背景相似、转移潜能不同的人肝癌细胞株阶梯转移模型，以低转移潜能肝癌细胞系ＭＨＣＣ９７Ｌ和高转移潜能肝癌细胞系ＨＣＣＬＭ３表面的天然受体作为差减筛选分子，采用体外快速

差减筛选噬菌体随机肽库技术，筛选得到能选择性多基因参与和多阶段形成的动态过程¨ｊ，与癌细胞

６ａ一６ｃ：ＰＢｓ组；６ｄ一６ｆ：对照肽组；６９一６ｈ：ＡＷＹＰＬＰＰ肽组

图６ＡｗＹＰＬＰＰ肽组荷瘤裸鼠出现明显肺转移灶（箭头示），对皮下肿瘤的生长无影响。图中标记线（一）为２００“ｍ，ＨＥ染

色

×１００

生堡胜瘤盘圭！塑生璺旦筮！！鲞筮兰翅鱼！垫』Ｑ趔：蜒！！塑，！尘：！！：塑！：生

与高转移潜能人肝癌细胞表面结合的短肽ＡｗＹＰＬＰＰ［２］。在本研究中，我们进一步探讨了

ＡＷＹＰＬＰＰ肽对高转移潜能人肝癌细胞侵袭表型的

?２４５?

人肝癌细胞结合肽．中华实验外科杂志，２００６，２３：２７６之７８．［３］ＹｅＱＨ，ＱｉｎＬＸ，Ｆｏｒｇｕ船Ｍ，ｅｔａｌ。Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇｈ印ａｔｉｔｉｓＢ、，ｉｍｓ—

ｐ∞ｉｔｉｖｅｎ＂ｔ聃ｔａｔｉｃｈｅｐａｔｏｃｅＵｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏ咖ｓｕｓｉｎｇｇｅｎｅｅｘｐｒｅ髓ｉ∞

ｐｍ６ｌｊｎｇａｎｄ¨ｐｅｎｉ￥ｅｄ

４１６＿４２３．

ｍ卸ｈ妇ｌ憾ｒｎｉｌｌｇ．Ｎ砒Ｍｅｄ，２００３，９：

ａ１．ｈｏｇ叩鲥ｃⅡｄ朐ｌＬＢｒ耻畦∞

ｍＶｉｅｗ．

ＥＩｌｒ

影响。研究结果显示，ＡｗＹＰＬＰＰ肽能显著促进高转移潜能肝癌细胞ＨｃＣＬＭ３的侵袭能力，但对

ＨＣＣＬＭ３细胞迁移、增殖和黏附能力均无明显的影响。裸小鼠ＨＣＣＬＭ３细胞皮下移植模型是复旦大

［４］Ｍ咖ＣＤ，Ｎ∞Ｉ

ｃＰ，Ｃａｒｏ睫Ｇ，ｄ

ｉｎｈｅｐａｔｏｃｅＵｕｌ盯ｃａ地ｉＩｍｍａ：ａ２００７，４３：９７９—９９２．

ｓｙ８ｔｅｍ蚶ｃ

ＪＣａＩｌｃｅｒ，

［５］郭荣平，钟崇，石明，等．血管内皮生长因子和基质金属蛋白

酶－２在肝细胞肝癌中的表达及临床意义．中华肿瘤杂志，

２００６，２８：２８５．２８８．

学肝癌研究所建立的肺转移实验平台［３］，我们采用

该模型研究了ＡＷＹＰＬＰＰ肽对ＨＣＣＬＭ３肿瘤肺转移

［６］ＢｒｏｗｎＫｃ．Ｎｗ８ｐｐ№ｃｈ自细ｏｅｎ—ｓｐｅｃｉ矗ｃｔａｒ鲥ｎｇ：ｉｄｅｒ碰ｃ啦ｉ∞

０ｆｃｅＵ眈ｌｅｃｔｉｖｅｐｅｐｔｉｄ鹧ｆ南ｍｃ∞ｌｂｉｎａｔｏｒｉａｌｌｉｂｒ撕ｅｓ．ＣｕＩＴ０ｐｉｎ

ＣｈｅｍＢｉｏｌ，２０００，４：１６＿２１．

的影响。结果表明，ＡｗＹＰＬＰＰ肽能促进ＨＣＣＬＭ３

肿瘤肺转移，但对皮下肿瘤的生长无明显的影响，进

［７］杜冰，于静，周忠良，等．利用体内噬菌体展示技术筛选肝癌组

织特异性结合肽．中华肿瘤杂志，２００５，”：６４５—６４７．

一步证实了体外实验的结果。

本研究结果表明，ＡｗＹＰＬＰＰ肽能促进高转移潜能人肝癌细胞体外侵袭能力以及肿瘤肺转移，进

一步寻找肿瘤细胞表面与ＡｗＹＰＬＰＰ肽结合的受

［８］ＥｈｙａｄｉＡＮ，ｓｍｌｉ心，ＰｍｄｋｉｎＬ，ｅｔａ１．Ａｐｅ州ｄｅｓｅｌｅｃｔｅｄｂｙ

ｂｉ叩ａｎＩＩｉＩｌｇｉｄ蚰蛐ｅｓｔＩｌｅｉｎｔｅ咖ｎａＩｐｈａｖ晰ａ６拍ａｐｍ印枷ｃｂｉｏｍ盯ｋｅｒｆｏｒｎｏ聃ｍａｌｌｃｅｕｌｕＩＩｇｃ卸ｃｅｒ．Ｃａｒ啪ｒＲ瞄，２００７，６７：

５８８９－５８９５．

［９］Ｌ册１－Ｙ，磺～Ｈｃ，ＴｋＩＩｇＹＬ，ｃｔａ１．Ａｎｏｖｅｌｐｅｐｔｉｄｅｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ

ｂｉｎｄｉｎｇｔｏｎ鹊叩ｈａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａｆ打ｔａｒｇｅｔｅｄｄｍｇｄｅｌｉｖｅｒｙ．Ｃ∞ｃｅｒＲ∞。２００４，６４：８００２—８００８．

体，可能为深入研究肝癌侵袭转移的机制和设计干预治疗的靶点提供新思路。

参考文献

［１］’ｒ肌ｇｚＹ．Ｈｅｐａｔｏｃｅｕｕｌ盯ｃａｒｃｉｎｏ眦吼ｌ瑁ｅｒｙ：ｍｖｉｅｗ

ｐｒｏｓＰｅｃ协ｆｏｒ

ｔｈｅ２１８ｔ

ｏｆ

［１０］Ｋ绷ａｉＮ，Ａ删ＩｍｉＪ，Ｍｕ坩ｋａｍｉＪ，ｅ￡ａ１．ＮＤ佗ｌｃｅ锄喵ｕｒ｛酞ｐｅｐｄｄｅｓ

ｓｐｅｃ洫ｃｔｏｈｕｎ姗。商ｓｑｕ砌ｏｕｓｃｅＵｃａｒｃｉｎｏｍａｌｌｓｉｎｇ锄Ｅ．ｃ“

［１１］Ａｒ印ＭＡ，Ｉ丑ｈｄｅｍ讹Ｊ，ＭｉｎｔｚＰＪ，ｅｔａ１．ｃｅｕｓｕｒｆ如ｅ唧ｒ％ｓｉ伽

ｇｔｒｅ鸥Ｉｅ８ｐｏｎｓｅｃｈ印ｅｍｎｅＧＲＰ７８ｅｎａｂｌｅ８ｔｕ枷ｒｔａＪ寥石Ｉｌｇｂｙ

ｃｉｒｃｌｌＩａｔｉ“ｇｌｉｇａＩｌｄ８．Ｃｎｃｅｒｃｅｕ，２００４。６：２７５－２８４．

０ｆ山ｅ

ｐｅｐｔｉｄｅｄｉ印ｌａｙｌｉｂｒａｒｙ．０ｎｃｏｌＲｅｐ，２００７，１７：７８７．７９１．

ｔ｝ｌｅ

ｐ鹕ｔ釉ｄ

ｃｅｎｔｕｒｙ．Ｊ

Ｓｕ唱０ｎｃｏｌ，２００５，９ｌ：９５舶．

（收稿日期：２００８Ｊ０ｒ７—１５）

［２］荚卫东，孙惠川，薛琼，等．利用噬菌体肽库筛选高转移潜能

中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第十届全国学术大会征文通知

由中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会主办，陕西省抗癌协会、陕西省肿瘤医院承办的中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第十届全国学术大会，定于２００９年９月中旬在西安召开。此次大会的主题为“科学总结，合理治疗”。会议形式包括专题讲座、专题讨论、大会发言、手术视频。届时将邀请妇科肿瘤学专家作专题报告，并对热点和存有争议的问题展开深入细致的讨论。现将大会征文内容及有关事项通知如下：

１．征文内容：（１）近年来妇科肿瘤领域的临床研究进展；（２）治疗方法（放疗、化疗、手术、生物等治疗）的总结和疗效观察及对治疗方法的评价；（３）官颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌等手术及盆腔和腹主动脉旁淋巴结的处理；（４）过度治疗及对患者的影响；（５）妇科肿瘤复发转移癌的处理；（６）妇科肿瘤的基础、病理、流行病学研究；（７）ＨＰＶ新进展及官颈上皮内瘤变的处理；（８）滋养叶细胞肿瘤的新问题；（９）手术

中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会

陕西省抗癌协会陕西省肿瘤医院会议筹备组

视频：宫颈的冷刀锥切、宫颈的ｋｐ治疗、宫颈切除术、广泛

性子宫切除＋盆腔淋巴结清扫术及腹主动脉旁淋巴结的处理。

２．征文要求：３５００字左右全文及８００字以内摘要各１份，请在文稿上注明作者姓名、所在单位通讯地址及邮政编码。（１）通过电子邮件形式投稿：请发至投ｉａｏｆｅｉ＠１６３．ｃｏｍ。（２）以书信形式投稿：请寄陕西省西安市雁塔西路３０９号陕西省肿瘤医院妇瘤中心；邮编：７１００６ｌ；收信人：王平、闫涛、田小飞、付玉兰。请在信封上注明“征文”字样，并随文稿寄软盘。联系电话：０２９－８５２７６１３４、８５２７６１３９、８５２７６１３６。传真：０２９．８５２５３１８。征文截稿日期：２００９年６月３０日。