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云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

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云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

:42(12)56~59 贵州农业科学 2014,

 GuizhouAgriculturalSciences

[文章编号]1001-3601(2014)12-0735-0056-04

云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

张鸭关,刘品华*,汪帆

(曲靖师范学院化学化工学院,云南曲靖655011)

摘 要]为进一步开发利用玛咖的地上部分资源,通过盐酸水解结合高效液相色谱仪分析,采用模糊  [

隶属函数法对玛咖地上部分的氨基酸进行定性和定量分析。结果表明:玛咖地上部分至少含17种氨基酸,氨基酸总量为玛咖地上部分的28.有7种人体必需氨基酸,//67%。其中,ET达44.68%,EN为80.77%。玛咖地上部分人体必需氨基酸的构成比例基本符合世界卫生组织食品法典委员会(FAO/WHO)的理想模式标准。玛咖地上部分还含有丰富的味觉氨基酸及特殊药效氨基酸,其中,鲜味氨基酸总量达5.甜味45%,氨基酸含量为4.芳香族氨基酸含量达3.精氨酸含量达2.3%,15%,81%。模糊隶属函数法对玛咖地上部分氨基酸营养价值的综合评价结果为最好,营养及保健价值高,值得开发与利用。

[关键词]玛咖;玛咖地上部分;氨基酸;定性分析;定量分析;模糊隶属函数法;云南[中图分类号]S567.[文献标识码]A9

ContentofAminoAcidsinOvergroundPartofLepidiummeyeniiinYunnan

ZHANGYaguan,LIUPinhua*,WANGFan

(CollegeofChemistryandChemicalEngineering,Yunnan655011,China)QujingNormalUniversity,Qujing,

meyeniiovergroundpartwasanalyzedqualitativelyand  Abstract:TheaminoacidscontentofL.

quantitativelybyHPLCandfuzzymembershipfunctionmethodtoprovidethetheoreticalbasisforfurtherdevelopmentandutilizationofovergroundpartresourcesofL.meyenii.TheresultsshowedthatL.meyeniiovergroundparthasatleast17aminoacidsincluding7humanessentialaminoacids,totalamino

//acidsaccountsfor28.67%ofL.meyeniiovergroundpart,andtheETandENis44.68%and80.77%

respectively.Thecomponentratioofhumanessentialaminoacidsaccordswiththestandardoftheideal

/WHObasically.TheL.meyeniiovergroundpartisrichintasteaminoacidandmodelissuedbyFAO

specialmedicinalaminoacid,ofwhich,thecontentofdelicious,sweet,fragranceaminoacidsandarginineaccountsfor5.45%,4.3%,3.15%and2.81%oftotalaminoacidsrespectively.ThefuzzymembershipfunctionanalysisshowedthatL.meyeniiovergroundparthasthebestcomprehensiveaminoacidnutritionalvalueandhighhealthcarevaluefordevelopmentandutilization.

-Keywords:Lepidiummeyenii;overgrounndpart;aminoacid;qualitativeanalysis;quantitativeanalysis;fuzzymembershipfunction

是十字花科LepidiummeyeniiWalpers)  玛咖(

独行菜属的草本植物,原产于秘鲁安第斯山区,其栽培和食用历史悠久,主要食用部分为成熟膨大的块

可作食物,也作传统药物使用,具有抗疲劳、改善根,

1]

性功能和提高生育力等多种功效[。近年来,玛咖的独特功效被广泛关注,人们对其进行多方面的研3-7]究[发现:玛咖营养丰富,含有蛋白质、糖类、脂类、氨基酸、脂肪酸和矿物元素等多种营养成分,可以作为一些经济技术不发达地区的食物资源,解决营养不良的问题;此外,还具有抗氧化、减少前列腺增生等多种功效。目前已有的研究多集中于玛咖地下部分的成熟块根,而对其地上部分的研究相对较少。

[]

于淼8采用现代提取分离及鉴定技术对吉林产玛咖地上部分化学成分及生物活性进行研究,首次从该植物中分离出苄基吡喃葡萄糖苷、(甲氧-O--D-3-β基苄基)吡喃葡萄糖苷、羟基苄基-O--D-4---O--D-ββ吡喃葡萄糖苷、苯甲酸、香草酸、烟酸和琥珀酸等化

合物。

氨基酸是衡量食品营养价值和资源开发利用价值的重要指标,也是药用植物可以增强人类免疫功

有关全面分析和评价玛咖地能的基础。迄今为止,

上部分氨基酸含量的研究尚未见报道。为此,笔者于2013年以云南省宣威市生产的玛咖地上部分为试材,对其氨基酸进行全面分析研究,以期探明其营

并为其在医疗保健及新产品开发等方面提养价值,

供科学依据。

材料与方法

1.1供试材料

采集于云南省宣威1.1.1植物玛咖地上部分,

市。

仪器与设备Agilent1200高效液相色谱1.1.2

仪、四元梯度泵和DAD检测器(美国安捷伦公司),电子分析天平(美国奥豪斯),烘箱(上海一恒科学仪

收稿日期]-07-09;2014-12-01修回 [ 2014

[基金项目]曲靖师范学院资源与环境化学重点实验室项目(SYS2010BX01)  作者简介],女,副教授,从事生物化学教学及生物资源的开发与利用研究。E1978-)-mail:zhangyaguan2013@163.com [ 张鸭关(通讯作者:刘品华(),男,教授,从事食品化学、分析方面的研究工作。:1963-E-mail406051584.com *@qq

 张鸭关等 云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

 ZHANGYaguanetal ContentofAminoAcidsinOvergroundPartofLepidiummeyeniiinYunnan

·57·

器有限公司),电热恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司),梅特勒托利多仪器上海有LE438pH计(-限公司),高速离心机(上海安亭科学仪器厂)。1.2材料预处理

将采集的玛咖地上部分样品洗净,放入(105±

粉碎过40目筛,装入自封袋放入1)℃烘箱中烘干,

干燥器中保存备用。1.3氨基酸检测

[9]1.3.1样品的水解采用盐酸水解法。精密称

先加取玛咖地上部分样品200mg置于水解管中,

入6mol/L的盐酸15mL,再加入新蒸馏的苯酚3上部分及对照保健食品的氨基酸营养价值进行综合

评价。用模糊隶属函数法的隶属函数值计算公式求出几种保健食品各指标的隶属值,然后再求出平均隶属函数值,最后比较平均隶属函数值,平均隶属函数值越大,其氨基酸营养价值越好。

隶属函数值计算公式:/(R(Xi)=(Xi-Xmin)Xmax-Xmin)

反隶属函数值计算公式:

(/(]R(Xi)=1-[Xi-Xmin)Xmax-Xmin)

式中,Xi为指标测定值,Xmin、Xmax为所有参试材料某一指标的最小值和最大值。

滴,抽真空状态下将水解管封口后置于110℃的烘箱中水解24h,取出冷却。打开水解管取出水解液过滤,精密量取2mL滤液蒸干,残留物用去离子水溶解,再蒸干,反复进行2次。最后将残留物用去离子水定容至25mL,即得待测液。1.3.2柱前衍生HPLC法测定水解后游离氨基酸

采用邻苯二甲醛进行柱前衍生反应[9]

。衍生反应条

件:40℃的条件下反应2min,

加热结束后静置3min。测试液经过滤后用针管进样进行HPLC分

析,

按外标法测定并计算17种氨基酸含量的质量分数。色谱条件:安捷伦液相色谱仪用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相A:0.4%的磷酸溶液与乙腈按体积比40∶60配制500mL,混匀,

0.45流动相B:按乙腈与水比例为80∶20配制μm过滤;

500mL,混匀,0.45μm过滤流速

1.0mL/min,

检出波长338nm,柱温40℃,进样量0.2μL。1.3.3氨基酸营养价值指标包括必需氨基酸总含量占氨基酸总量的比值(E/T)和必需氨基酸含量与非必需氨基酸含量的比值(E/N)

。根据FAO/WHO的理想模式,

质量较好的蛋白质其组成氨基酸的E/T为40%左右,E/N在60%以上[10]

必需氨基酸总含量占氨基酸总量的百分比=E/T×100%

必需氨基酸含量与非必需氨基酸含量之比=E/N×100%

式中,氨基酸总量(T)为检测出的17种氨基酸之和;必需氨基酸总量(E)为苏氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和赖氨酸等7种氨基酸含量之和;非必需氨基酸总量(N)为天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸和丙氨酸等10种氨基酸含量之和。1.4氨基酸营养价值评价

氨基酸营养价值是受多基因控制的复杂性状,不同测定指标所表现出的氨基酸不一致,利用单一指标评价氨基酸局限性很大。因此,参照文献[11]采用多指标综合评判法—模糊隶属函数对玛咖地上部分的氨基酸进行科学、客观的评价。在多指标的测定与分析基础上,应用模糊隶属函数法对玛咖地

此外,为了更好地分析评价玛咖地上部分氨基酸的营养价值,将其氨基酸含量与常规保健食品玛咖根、小黑药及三七等进行对照分析,其中,玛咖根、小黑药和三七的氨基酸含量分别引自文献资料[1][10][12]。1.5数据的统计分析

采用Excel2003和DYES数据统计分析软件进行数据处理,并采用DUNCAN法进行多重比较。

结果与分析

2.1玛咖地上部分的氨基酸

2.1.1氨基酸的组成成分与含量由表1可见:

1)组成成分。从玛咖地上部分样品中共检出

苏氨酸、

精氨酸、天门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、丙氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸等。17种氨基酸由于本试验采用盐酸水解法,色氨酸在酸水解中被破坏,谷氨酰胺和天冬酰胺则在酸

表1

玛咖地上部分与对照保健食品氨基酸的组成与含量

Table1 Compositionandcontentofovergroundpartof

L.meyeniiandotherhealthfoods

氨基酸名称玛咖地玛咖根小黑药三七

Nameof上部分Rootof

RootofPanaxaminoacids

OvergroundL.meyenii

veinednotoginseng

partof

inula

L.meyenii

Thr

2.290.25

0.26

0.23

精氨酸Arg2.810.800.291.14天冬氨酸Asp2.690.630.600.70丝氨酸Ser1.610.250.230.13谷氨酸Glu2.760.810.810.62甘氨酸Gly1.170.280.330.20组氨酸His1.330.140.130.13丙氨酸Ala1.460.290.290.30脯氨酸Pro0.060.320.180.23半胱氨酸Cys0.380.060.020.08酪氨酸Tyr1.590.160.150.13缬氨酸Val1.510.310.340.28蛋氨酸Met0.510.070.050.63赖氨酸Lys2.240.410.350.35异亮氨酸Ile1.720.200.290.23亮氨酸Leu2.980.340.440.43苯丙氨酸Phe1.560.240.310.31T

28.67a

5.57c

5.07c

6.12b

  注:

T为氨基酸总量;表中不同小写字母表示在0.05水平差异显著(p<0.05)。  Note:Differentlowercaselettersinthetableindicatessignifi-canceofdifferenceat0.05level.

                                        贵州农业科学

·58·                                   GuizhouAgriculturalSciences

水解时释放出氨而成为谷氨酸或天冬氨酸,因此,不能排除样品中含有色氨酸、谷氨酰胺及天冬酰胺。

玛咖地上部分其余162)含量。除脯氨酸外,

种氨基酸的含量均很高,均为玛咖根、三七和小黑药等保健食品的4~19倍。其中,亮氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、苏氨酸和赖氨酸的含量极高,分别达2.98%、2.81%、2.76%、2.69%、2.29%和

玛咖地上部分氨基酸总量很高,达28.2.24%;67%,

分别是玛咖根氨基酸总量的5.小黑药的5.15倍,65倍,三七的4.且差异显著(。68倍,05)p<0.

除色氨酸可能2.1.2必需氨基酸由表1可知,

在酸水解中被破坏外,玛咖地上部分含有7种人体必需氨基酸,即苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸,以及组氨酸和精氨酸2种儿童必需氨基酸。其中:玛咖地上部分必需氨基酸的含量为12.是玛咖根(的7.81%,1.83%)0倍,小黑药(的6.三七(的5.2.04%)3倍,2.48%)2倍;其非必需氨基酸的含量为15.86%,E/T为

/玛咖地上部44.68%,EN为80.77%。由此可见,

分的必需氨基酸符合FAO/WHO的理想模式,为

表2

名称Name

玛咖地上部分

meyenii OvergroundpartofL.

玛咖根RootofL.meyenii小黑药Rootofveinedinula三七P.notoinsen优质蛋白质。

2.1.3药效氨基酸和特殊功效氨基酸天然蛋白

如脯质中有的氨基酸具有一定的药效和特殊功效,

16-18]

氨酸和精氨酸[。由表1可知,玛咖地上部分精氨酸含量高达2.远高于对照保健食品玛咖81%,根、小黑药和三七,分别是玛咖根的3.小黑药5倍,的9.三七的2.其脯氨酸含量较低,仅为7倍,5倍;

低于玛咖根、小黑药和三七。0.06%,

2.1.4味觉氨基酸氨基酸不仅具有维系人体生命活动的各种生理与营养功能,还在食品的呈味方面起着重要作用。天然蛋白质中的氨基酸都属L型,鲜味及芳香L型的氨基酸及其盐大多具有甜味、味,是某些膳食清香味美的生物活性成分,其作为甜

13-15]

味料和营养素源,已广泛应用于食品调味剂[。

其1)鲜味氨基酸。包含天门冬氨酸和谷氨酸,

含量决定食物的鲜美程度。由表2可知,玛咖地上部分的鲜味氨基酸总量高达5.远高于对照保45%,

健食品玛咖根、小黑药和三七,且差异显著(。05)p<0.

玛咖地上部分与对照保健食品的味觉氨基酸含量

甜味类Sweettastetype

甘氨酸丙氨酸脯氨酸丝氨酸1.170.280.330.19

1.460.29

0.290.29

0.060.32

0.180.22

1.610.25

0.230.13

小计4.30a1.14b

1.03b0.85c

芳香类Fragrancetype酪氨酸苯丙氨酸小计1.590.16

0.150.13

1.560.24

0.310.13

3.15a0.40b

0.46b0.26c

Table2 ContentoftasteaminoacidinovergroundpartofL.meyeniiandotherhealthfoods

鲜味类Delicioustype天冬氨酸谷氨酸2.690.63

0.600.70

2.760.81

0.810.62

小计5.45a1.44b

1.41b1.32b

同列不同小写字母表示差异达显著水平(。05)  注:p<0.

 Note:Differentlowercaselettersinthesamecolumnindicated5%significantlevel.

丙氨酸、脯氨酸和丝  2)甜味氨基酸。甘氨酸、

氨酸为呈甜味的特征性氨基酸,其含量决定食物的甜美程度。由表2可知,玛咖地上部分的甜味氨基酸含量为4.远高于对照保健食品玛咖根、小黑3%,药和三七,且差异显著(。说明,玛咖地上05)p<0.部分含有很丰富的甜味氨基酸,在烹调中具有很好的增甜作用。

表3

酪氨酸和苯丙3)芳香族氨基酸。包含色氨酸、

氨酸,其含量决定食物的香美程度。由于色氨酸在酸水解中被破坏未被检出,因此,在此只对苯丙氨酸和酪氨酸进行分析。由表2可知,玛咖地上部分的芳香族氨基酸含量高达3.远高于对照样品玛15%,咖根、小黑药和三七,且差异显著(。05)p<0.

玛咖地上部分与对照保健食品氨基酸的隶属函数值

meyeniiandotherhealthcarefoods Table3 SubordinativefunctionvalueofaminoacidsinovergroundpartofL.

Indexes

Totalaminoacids

/TE/NE

鲜味氨基酸含量Contentofdeliciousaminoacid甜味氨基酸含量Contentofsweetaminoacid

芳香组氨基酸含量Contentoffragranceaminoacid精氨酸含量Argcontent谷氨酸含量Glucontent脯氨酸含量Procontent

总隶属函数值Totalsubordinativefunctionvalue平均隶属函数值Meansubordinativefunctionvalue氨基酸排序Overgroundpartof

Rootof

Rootofveinedinula0.00000.62630.57980.02180.05220.06920.00000.08880.46151.89960.2111P.notoginseng0.044

0.6420.5970.0000.0000.0000.3370.0000.6532.2750.2525

9100030879L.meenii1.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00000.00008.00000.8889L.meenii

0.02120.00000.00010.02910.08410.04840.20240.08881.00001.47400.1638

 张鸭关等 云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

 ZHANGYaguanetal ContentofAminoAcidsinOvergroundPartofLepidiummeyeniiinYunnan

·59·

玛咖地上部分具有丰富的特殊  以上分析说明,

呈味作用的味觉氨基酸,可作为鲜味剂、甜味剂、香味剂加以综合开发利用。2.2氨基酸的营养价值综合评价

由表3可知,除脯氨酸外,玛咖地上部分氨基酸各指标的隶属值均为1,平均隶属函数值为

玛咖地上部分与对照保健食品氨基酸的平0.8889;

均隶属函数值依次为玛咖地上部分>三七>小黑药>玛咖根,即玛咖地上部分及对照保健食品的氨基酸营养价值依次为玛咖地上部分>三七>小黑药>玛咖根。由此可知,玛咖地上部分氨基酸营养[3]ClementaC,KneubuhlerbJ,UrwylerbA,etal.Effect

ofmacasupplementationonbovinespermquantityandqualityfollowedovertwospermatogeniccycles

[:J].Theriogenology,2010,74(2)173-183.

[4]ZenicoT,CiceroAFG,ValmorriL,etal.SubjectiveeffectsofLepidiummeyenii(Maca)extractonwell-beingandsexualperformancesinpatientswithmilderectiledysfunction:arandomised,double-blindclini-:J].Andrologia,2009,41(2)95-99.caltrial[

[5]GustavoFG,AnaR,CarlaG,etal.EffectofLepidi-ummeyenii(maca)rootsonspermatogenesisofmale

J].AsianJournalofAndrology,2001,3:231-rats[价值很高,其次是三七和小黑药,而玛咖根的氨基酸营养价值相对较低。

结论与讨论

1)利用高效液相色谱法从玛咖地上部分共检

出17种氨基酸,包括7种人体必需的氨基酸。氨基酸总量高达28.67%,分别高于对照保健食品玛咖根、小黑药及三七的氨基酸总量。

2)玛咖地上部分含有丰富的氨基酸,其E/T

为44.68%,E/N为80.77%,

必需氨基酸组成及构成比例符合食品法典委员会(FAO/WHO)的理想模式标准。

3)玛咖地上部分具有丰富的特殊呈味作用的味觉氨基酸和特殊药效氨基酸。其中,鲜味氨基酸总量达5.45%,甜味氨基酸含量为4.3%,芳香族氨基酸含量达3.15%,精氨酸含量达2.81%。玛咖地上部分含有含量较高的药效及特殊氨基酸———精氨酸,揭示玛咖地上部分应该具有很好保健作用的一些物质特性,这有待更深入研究并加以综合开发利用。

4)采用模糊隶属法对玛咖地上部分及对照保健食品的氨基酸营养价值进行综合评价发现,氨基酸营养价值依次为玛咖地上部分>三七>小黑药>玛咖根。说明,玛咖地上部分氨基酸营养价值和保健价值高。

5)由于该研究应用盐酸水解法检测氨基酸,

色氨酸在酸水解中被破坏,谷氨酰胺和天冬酰胺则在酸水解时可释放出氨而成为谷氨酸或天冬氨酸,因此,不能排除玛咖地上部分含有色氨酸、谷氨酰胺及天冬酰胺。这有待进一步验证。

[参

献]

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(责任编辑:王 海)

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云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

作者:

作者单位:

刊名:

英文刊名:

年,卷(期):张鸭关, 刘品华, 汪帆, ZHANG Yaguan, LIU Pinhua, WANG Fan曲靖师范学院 化学化工学院,云南 曲靖,655011贵州农业科学Guizhou Agricultural Sciences2014(12)

引用本文格式:张鸭关.刘品华.汪帆.ZHANG Yaguan.LIU Pinhua.WANG Fan 云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

[期刊论文]-贵州农业科学 2014(12)

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