抗生素对铜绿假单胞菌产生藻酸盐的影响

上传者：厉励
|
上传时间：2015-04-29
|
密次下载

抗生素对铜绿假单胞菌产生藻酸盐的影响

抗生素对铜绿假单胞菌产生藻酸盐的影响
Ξ

饶宪唐英春张扣兴张天托
(中山医科大学附属第三医院, 广州510630)
摘要藻酸盐为铜绿假单胞菌生物膜的主要成分, 为了探讨药物对铜绿假单胞菌产生藻
酸盐的影响, 对在含不同浓度红霉素和不同浓度头孢唑肟的普通琼脂培养基上生长的铜绿假单
胞菌, 采用高效液相色谱法测定其所产生的藻酸盐, 结果红霉素对铜绿假单胞菌产生藻酸盐物
质有抑制作用, 而头孢唑肟则不能抑制藻酸盐的产生。说明红霉素对防治慢性铜绿假单胞菌感
染症有意义。
关键词铜绿假单胞菌藻酸盐红霉素高效液相色谱
铜绿假单胞菌是慢性呼吸道感染中的常
见病原菌, 是造成院内感染的主要原因之一,
引起的感染不易控制, 治疗困难。近年来, 国
外对慢性细菌感染治疗困难的原因进行了广
泛的研究, 细菌形成生物膜 (b io f ilm ) 是造成
慢性感染症治疗困难的原因之一, 已引起人
们的重视。粘液型铜绿假单胞菌容易形成生
物膜, 其产生的多糖—蛋白质复合物的主要
成份为藻酸盐 (a lg in a te) , 是形成生物膜的重
要基础
1
。如何抑制细菌形成生物膜, 是防治
慢性感染症的重要课题之一。我国还鲜有这
方面的报道, 本文就红霉素和头孢唑肟对铜
绿假单胞菌产生藻酸盐的影响进行了研究,
现报告如下。
1 材料和方法
1. 1 菌株和药物粘液型铜绿假单胞菌标准
菌株 M 310。
红霉素 (
EM ) 为大日本制药株式会社提供,
头孢唑肟 (C ZX ) 为日本藤泽制药株式会社提
供。
1. 2 主要试剂
标准藻酸盐为 S igm a 公司产品; 普通琼
脂培养基为日本日水制药公司产品; 萘酚雷
琐辛、醋酸丁酯和氰化甲烷均为日本和光纯
药公司提供。
1. 3 藻酸盐定量分析法根据丰田氏的改良
法
2, 3
, 采用高效液相
色谱 (H PL C ) 方法进行藻酸盐的定量。
1. 3. 1 藻酸盐的分离提取将铜绿假单胞菌
M 310分别接种在含不
同浓度红霉素或不同浓度头孢唑肟的普通琼
脂培养基上, 37℃培养24h。收集菌落用生理
盐水调制菌液浓度为M cF a r lan d N o. 4, 为进
一步精确测定活菌数, 再取部份菌液稀释后
用 Sp ira l sy stem (美国产) 装置接种于普通琼
脂培养基, 37℃过夜培养, 进行存活菌计数。
余菌液用0. 22Λm M ilipo re s ( 日本产) 滤过灭
菌, 取滤液1m l 加10% 硫酸铜3m l, 用1m o l?L
盐酸调 pH 4. 0, 室温下静置 1h 后, 离心 15
m in , 去上清液, 沉淀物加10m l pH 4. 0蒸馏水
洗涤后, 再次离心15m in , 去上清液, 沉淀物
加1m o l?L 氢氧化铵0. 1m l 溶解, 再加蒸馏水
0. 9m l, 盐酸、硫酸铜混合液 (40m l 36% 盐酸、
1m l 2. 5% 硫酸铜、9m l 蒸馏水) 2m l, 4% 萘酚
雷锁辛1m l, 混合后置沸水浴40m in , 再冰浴
冷却至室温, 加醋酸丁酯4m l, 充分混匀, 吸
Ξ 卫生部启动基金资助项目。参加第6届全国临床药理学术会议 ( 1996) 、第43回日本化学疗法学会
西日本年会 ( 1995) 交流。
饶宪: 男, 41岁, 讲师。

教育资源为主的文档平台

文档分类