耳鼻咽喉科学专业优秀论文 xiap及caspase-3在年龄相关性听力减退c57bl6j小鼠初级听皮层中的表达及其意义

上传者：刘翰森
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上传时间：2015-05-05
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耳鼻咽喉科学专业优秀论文 xiap及caspase-3在年龄相关性听力减退c57bl6j小鼠初级听皮层中的表达及其意义

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耳鼻咽喉科学专业优秀论文 XIAP 及CASPASE-3 在年龄相关性听力
减退C57BL/6J 小鼠初级听皮层中的表达及其意义
关键词：老年性耳聋 X 染色体连锁凋亡抑制蛋白初级听皮层听觉细胞凋亡半
胱氨酸基天冬氨酸特异性蛋白酶-3 发病机制

摘要：目的：老年性聋( presbycusis)是由于年龄增长引起的听觉器官衰老、
退变而出现的双耳对称、缓慢进行性感音神经性听力减退。临床研究显示老年性
聋可能是外周听觉系统和中枢系统功能联合降低衰变的结果，听力生理学的研究
提示中枢的改变参与了老年性聋的发展。随着研究的深入，发现老年性聋与听觉
细胞的凋亡有关。在细胞凋亡的过程中，半胱氨酸基天冬氨酸.特异性蛋白酶
3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3，Caspase-3)被认为是此过程
的必经之路，是细胞凋亡中的关键酶，在细胞凋亡分子机制网络中居核心地位。
而凋亡抑制蛋白家族(Inhibitor of apoptosis protein，IAP)是哺乳动物体内
唯一的内源性凋亡抑制因子，IAP 通过抑制CASPASE 等多种途径而发挥抗凋亡作
用。其中X 染色体连锁凋亡抑制蛋白( X-Iinked inhibitor of apoptosis
protein，XIAP)的结构最典型，作用最强，功能最全面。本实验旨在通过测定年
龄相关性听力减退小鼠听皮层XIAP、Caspase-3 含量的变化及对初级听皮层细胞
凋亡情况的检测，初步探讨老年性聋与听皮层细胞凋亡的关系及初级听皮层细胞
凋亡与XIAP、Caspase-3 之间的关系，深入认识老年性耳聋发病机制，并为老年
性耳聋的临床治疗提供新的思路。材料和方法： 1、分别选取15 只2 月龄
C57BL/6J 小鼠(15-20 克)和15 只10 月龄C57BL/6J 小鼠(50-60 克)，检测两组
C57BL/6J 小鼠听性脑干反应(Auditory brainstem response，ABR)。 2、采
用免疫组织化学法，分别染色检测两组C57BL/6J 小鼠初级听皮层XIAP、
Caspase-3 的表达情况。 3、采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记
(Terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP nick end labeling，
TUNEL)染色技术与透射电镜技术检测两组实验动物初级听皮层细胞凋亡状况。
结果： 1、2 月龄组小鼠ABR 检测2KHz、4KHz 听力阈值分别为64.33±8.49dB
SPL、58.33±8.80dB SPL，10 月龄组小鼠ABR 检测相同频率听力阈值分别为
76.33±7.89dBSPL、74.67±5.16dB SPL，10 月龄组较2 月龄组听力阈值有所提
高。与此同时2 月龄组小鼠ABR 检测8KHz、16KHz、32KHz 听力阈值平均为
17.33±4.95dB SPL、25.67±2.28dB SPL、36.33±7.67dB SPL，10 月龄组小鼠
ABR 检测相同频率听力阈值平均为68.00±9.78dB SPL、52.67±7.53dB SPL、
80.33±6.11dB SPL。两组的听力阈值在各频率都有明显差异(P<0.05)，
但是在高频部分10 月龄龄组听力阈值提高较低频部分更明显一些。 2、在2
月龄组中凋亡抑制蛋白XIAP 的表达数目较多，经图像分析系统计数，2 月龄组
中凋亡抑制蛋白XIAP 的表达数目为476.33±57.35，10 月龄组中凋亡抑制蛋白
XIAP 的表达数目为402. 00±23.75，两者比较有统计学意义(P<0.01)。
在2 月龄组中，可见Caspase-3 的表达数目略少，经图像分析系统计数，2 月龄
组中Caspase-3 表达阳性细胞个数为856.67±62.60，10 月龄组中Caspase-3
表达阳性细胞个数为937.13±81.01，两者比较有统计学意义(P<0.01)
3、与2 月龄组C57BL/6J 小鼠相比，10 月龄组C57BL/6J 小鼠初级听皮层中细胞
凋亡数目明显增多。经图像分析系统计数，2 月龄组中初级听皮层中细胞凋亡数

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