生化名词解释
自己整理,临床生化
生化问答题
1.简述酶的“诱导契合假说”。
酶在发挥其催化作用之前,必须先与底物密切结合。这种结合不是锁与钥匙式的机械
关系,而是在酶与底物相互接近时,其结构相互诱导、相互变形和相互适应,这一过程
称为没底物结合的诱导契合假说。酶的构象改变有利于与底物结合;底物也在酶的诱导
下发生变形,处于不稳定状态,易受酶的催化攻击。这种不稳定状态称为过渡态。过渡
态的底物与酶的活性中心在结构上最相吻合,从而降低反应的活化能。
2.受试大鼠注射DNP(二硝基苯酚)可能引起什么现象?其机理何在?
解偶联剂大部分是脂溶性物质,最早被发现的是2,4-二硝基苯酚(DNP)。给受试动
物注射DNP后,产生的主要现象是体温升高、氧耗增加、P/O比值下降、ATP的合成减少。
其机理在于,DNP虽对呼吸链电子传递无抑制作用,但可使线粒体内膜对H+的通透性升
高,影响了ADP+Pi→ATP的进行,使产能过程与储能过程脱离,线粒体对氧的需求增加,
呼吸链的氧化作用加强,但不能偶联ATP的生成,能量以热能形式释放。
3.简述乳糖操纵子的结构及其调节机制。
乳糖操纵子含Z、Y、及A三个结构基因,编码降解乳糖的酶,此外还有一个操纵序
列O、一个启动序列P和一个调节基因I,在P序列上游还有一个CAP结合位点。由P
序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个编码基因由同一个调
控区调节。
乳糖操纵子的调节机制可分为三个方面:
(1)阻遏蛋白的负性调节 没有乳糖时, 阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与
P序列结合,抑制转录起动;有乳糖时,少量半乳糖作为诱导剂结合阻遏蛋白,改变了
它的构象,使它与O序列解离,RNA聚合酶与P序列结合,转录起动。
(2) CAP的正性调节 没有葡萄糖时,cAMP浓度高,结合cAMP的CAP与lac操纵子
启动序列附近的CAP结合位点结合,激活RNA转录活性;有葡萄糖时,cAMP浓度低,
cAMP与CAP结合受阻,CAP不能与CAP结合位点结合,RNA转录活性降低。
(3)协调调节 当阻遏蛋白封闭转录时,CAP对该系统不能发挥作用;如无CAP存在,
即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合,操纵子仍无转录活性。
4.何谓限制性核酸内切酶?写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。
解释限制性内切核酸酶;酶识别DNA位点的核苷酸序列呈回文结构。?
5.酮体是如何产生和利用的?
酮体是脂肪酸在肝脏经有限氧化分解后转化形成的中间产物,包括乙酰乙酸、β-
羟丁酸和丙酮。肝细胞以β-氧化所产生的乙酰辅酶A为原料,先将其缩合成羟甲戊二
酸单酰CoA(HMG-CoA),接着HMG-CoA被HMG-CoA裂解酶裂解产生乙酰乙酸。乙
酰乙酸被还原产生β-羟丁酸,乙酰乙酸脱羧生成丙酮。HMG-CoA合成酶是酮体生成的
关键酶。肝脏没有利用酮体的酶类,酮体不能在肝内被氧化。酮体在肝内生成后,通过
血液运往肝外组织,作为能源物质被氧化利用。丙酮量很少,又具有挥发性,主要通过
肺呼出和肾排出。乙酰乙酸和β-羟丁酸都先被转化成乙酰辅酶A,最终通过三羧酸循环
彻底氧化。
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6.为什么测定血清中转氨酶活性可以作为肝、心组织损伤的参考指标?
正常时体内多种转氨酶主要存在于相应组织细胞中,血清含量极低,如谷丙转氨酶
(GPT)在肝细胞中活性最高,而谷草转氨酶(GOT)在心机细胞中活性最高,当肝细胞
或心机细胞损伤时上述转氨酶分别释放入血。
7. 讨论复制保真性的机制。
①. 遵守严格的碱基配对规律;
②. 聚合酶在复制延长时对碱基的选择功能;DNA-polⅢ依据碱基表现的亲和力,实现正
确的碱基选择。
③. 复制出错时DNA-pol I的及时校读功能。
8.试述乳酸异生为葡萄糖的主要反应过程及其酶。
(1)乳酸经LDH催化生成丙酮酸。
(2)丙酮酸在线粒体内经丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸,后者经GOT催化生成天冬氨
酸出线粒体,在胞液中经GOT催化生成草酰乙酸,后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下
生成磷酸烯醇式丙酮酸。
(3)磷酸烯醇式丙酮酸循酵解途径至1,6—二磷酸果糖。
(4)1,6—二磷酸果糖经果糖二磷酸酶—1催化生成6—磷酸果糖,再异构为6—磷酸葡
萄糖。
(5)6—磷酸葡萄糖在葡萄糖—6—磷酸酶作用下生成葡萄糖。
9.举例说明蛋白质一级结构、空间构象与功能之间的关系。
蛋白质一级结构是高级结构的基础。有相似一级结构的蛋白质,其空间构象和功能
也有相似之处。如垂体前叶分泌的肾上腺皮质激素的第4至第10个氨基酸残基与促黑激
素(α-MSH,β-MSH)有相同序列,因此ACTH有较弱的促黑激素作用。又如广泛存在与
生物学的细胞色素C,在相近的物种间,其一级结构越相似,空间构象和功能也越相似。
在物种上,猕猴和人类很接近,二者的细胞色素C只相差1个氨基酸残基,所以空间构
象和功能也极相似。
10.胞浆中的NADH如何参加氧化磷酸化过程?试述其具体机制。
线粒体内生成的NADPH可直接参加氧化磷酸化过程,但在胞浆中生成的NADPH不能
自由透过线粒体内膜,故线粒体外NADPH所带的氢必须通过某种转运机制才能进入线粒
体,然后再经呼吸链进行氧化磷酸化过程。这种转运机制主要有α-磷酸甘油穿梭和苹果
酸-天冬氨酸穿梭两种机制。
(1)α-磷酸甘油穿梭:这种穿梭途径主要存在于脑和骨骼肌中,胞浆中的NADH在
磷酸甘油脱氢酶催化下,使磷酸二羟丙酮还原成α-磷酸甘油,后者通过线粒体外膜,
再经位于线粒体内膜近胞浆侧的磷酸甘油脱氢酶催化下氧化生成磷酸二羟丙酮和
FADH2,磷酸二羟丙酮可穿出线粒体外膜至胞浆,参与下一轮穿梭,而FADH2则进入
琥珀酸氧化呼吸链,生成2分子ATP
(2)苹果酸-天冬氨酸穿梭:这种穿梭途径主要存在于肝和心肌中,胞浆中的NADH
在苹果酸脱氢酶催化下,使草酰乙酸还原为苹果酸,后者通过线粒体外膜上的α-酮
戊二酸转运蛋白进入线粒体,又在线粒体内苹果酸脱氢酶的作用下重新生成草酰乙酸
和NADH。NADH进入NADH氧化呼吸链,生成3分子ATP。
可见,在不同组织,通过不同穿梭机制,胞浆中的NADH进入线粒体的过程不一样,参与氧
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化呼吸链的途径不一样,生成的ATP数目不一样。
11.举例说明蛋白质的变构效应。
当配体与蛋白质亚基结合引起亚基构象变化,从而改变蛋白质的生物活性,此种现
象称为变构效应。变构效应也可发生与亚基之间,即当一个亚基构象的改变引起相邻的
另一个亚基的构象和功能的变化。例如一个氧分子与Hb分子中一个亚基结合,导致其构
象变化,进一步影响第二个亚基的构象变化,使之更易与氧分子结合,依次使四个亚基
均发生构象改变而与氧分子结合,起到运输氧的作用。
12.糖、脂、蛋白质在体内是否可以相互转变?简要说明可转变的途径及不能转变的原因。
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糖
脂变糖可能性小,仅甘油,丙酮,丙酰CoA可异生成糖,其量甚微。蛋白质与糖、脂:
蛋白质可以转变为糖、脂,但数量较小,生糖氨基酸异生成糖,生酮、生糖氨基酸可生
成脂类。
糖、脂不能转变为蛋白质,糖、脂不能转变为必需氨基酸,虽可提供非必需氨基酸的碳
骨架,但缺乏氮源。
13.试述复制和转录的异同点。
复制和转录都以DNA为模板,都需依赖DNA的聚合酶,聚合过程都是在核苷酸之间
生成磷酸二酯键,合成的核酸链都从5’向3’方向延长,都需遵从碱基配对规律。复制和
转录最根本的不同是:通过复制使子代保留杂代全部遗传信息,而转录只需按生存需要部分
信息表达。因此可以从模板和产物的不同来理解这一重大区别。此外,聚合酶分别是DNA pol
和RNA pol,底物分别是dNTP和NTP,还有碱基配对的差别,都可从二者产物结构性质不同
上理解。
14. 试述人体胆固醇的来源与去路。
人体胆固醇的来源有:①从食物中摄取。②机体细胞自身合成。去路有:①用于构成细
胞膜。②在肝脏可转化成胆汁酸。③在性腺、肾上腺皮质可转化成性激素、肾上腺皮质激素。
④在皮肤可转化成维生素D3。⑤还可酯化成胆固醇酯,储存在胞液及血浆脂蛋白中。
15.人体生成ATP的方法有哪几种?请详述具体生成过程。
ATP是生物体能量的储存和利用中心,其生成或来源主要有两种,一种是底物水平磷酸
化,另一种是氧化磷酸化。具体过程如下:
(1)底物水平磷酸化:利用代谢分子中的能量使ADP磷酸化生成ATP的过程,称为底
物水平磷酸化,在物质分解利用过程中,有三个典型的底物水平磷酸化反应,糖酵解
过程中,磷酸甘油酸激酶催化1,3二磷酸甘油酸生成3磷酸甘油酸以及丙酮酸羧激
酶催化磷酸烯醇式丙酮酸生成烯醇式丙酮酸这两步反应均伴有ADP磷酸化生成ATP,
三羧酸循环中琥珀酰CoA合成酶催化琥珀酰CoA生成琥珀酸,同时催化Pi和GDP生
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成GTP,而GTP又可在酶促作用下能量转移生成ATP;
(2)氧化磷酸化:即在呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化,生成ATP。如物质脱下
的2H经NADH氧化呼吸链可偶联生成3个ATP;经琥珀酸氧化呼吸链则偶联生成2个
ATP。这是机体内ATP生成的主要方式。
16. 何谓基因克隆?简述基因克隆的基本过程。
基因克隆的概念;以质粒为载体进行DNA克隆的过程(为例)。包括:目的基因的获
取,基因载体的选择与构建,目的基因与载体的拼接,重组DNA分子导入受体细胞,筛选
并无性繁殖含重组分子的受体细胞。
17. 脂肪酸的β-氧化与生物合成的主要区别是什么?
脂肪酸的β-氧化与生物合成的主要区别有:①进行的部位不同,脂肪酸β-氧化在线粒
体内进行,脂肪酸的合成在胞液中进行。②主要中间代谢物不同,脂肪酸β-氧化的主要中
间产物是乙酰CoA,脂肪酸合成的主要中间产物是丙二酸单酰CoA。③脂肪酰基的运载体
不同,脂肪酸β-氧化的脂肪酰基运载体是CoA,脂肪酸合成的脂肪酰基运载体是ACP。④
参与的辅酶不同,参与脂肪酸β-氧化的辅酶是FAD和NAD+,参与脂肪酸合成的辅酶是
--NADPH+H+。⑤脂肪酸β-氧化不需要HCO3,而脂肪酸的合成需要HCO3。⑥ADP/ATP比值
不同,脂肪酸β-氧化在ADP/ATP比值增高是发生,而脂肪酸合成在ADP/ATP比值降低时进
行。⑦柠檬酸发挥的作用不同,柠檬酸对脂肪酸β-氧化没有激活作用,但能激活脂肪酸的
生物合成。⑧脂酰CoA的作用不同,脂酰CoA对β-氧化无抑制作用,但能抑制脂肪酸的
生物合成。⑨所处膳食状况不同,β-氧化通常是在禁食或饥饿时进行,而合成通常是在高
膳食状况下进行。
18. 细胞内有哪几类主要的RNA?其主要功能是什么?
动物细胞内主要含有的RNA种类及功能
种类
核蛋白体RNA
信使RNA
转运RNA
不均一核RNA
核内小RNA
核仁小RNA
胞质小RNA 细胞核和胞液 rRNA mRNA tRNA hnRNA snRNA snoRNA scRNA/7SL-RNA 线粒体 mt rRNA mt mRNA mt tRNA 功能 核蛋白体组成成分 蛋白质合成模板 转运氨基酸 成熟mRNA的前体 参与hnRNA的剪接、转运 rRNA的加工和修饰 蛋白质内质网定位合成的信号
识别体的组成成分
19. 原核生物复制中的引发体是如何形成的?
复制的起始需要解生成引发体和合成引物。原核生物在复制起始点DNA上结合Dna A Dna
B、 Dna C蛋白。含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引
发体。在引发体上DnaG催化NTP聚合生成引物。
20.什么是血浆脂蛋白,它们的来源及主要功能是什么?
血浆脂蛋白主要包括CM、VLDL、LDL和HDL四类。CM的功能是运输外源性甘油三
酯和胆固醇;VLDL运输内源性甘油三酯和胆固醇;LDL转运内源性胆固醇;HDL逆向转
运胆固醇。
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21.简述谷氨酸在体内转变成尿素、CO2与水的主要代谢过程。
+ 谷氨酸在L-谷氨酸脱氢酶的作用下生成α酮戊二酸、NADH+H和NH3;α酮戊二酸经三
+羧酸循环产生草酰乙酸、CO2、FADH2、NADH+H;
草酰乙酸在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2;磷酸烯醇式丙酮
酸在丙酮酸激酶的作用下生成丙酮酸,在丙酮酸脱氢酶的作用下生成乙酰辅酶A;乙酰辅酶
+A经三羧酸循环生成2CO2、1FADH2、3 NADH+H和ATP;经氧化呼吸链生成ATP和H2O
NH3+CO2+ATP生成氨基甲酰磷酸,经鸟氨酸循环生成尿素。
22.简述肝糖原合成代谢的直接途径与间接途径。
肝糖原合成时由葡萄糖经UDPG合成糖原的过程称为直接途径由葡萄糖先分解成三碳化
合物如乳酸、丙酮酸,再运至肝脏异生成糖原的过程称为三碳途径或间接途径。
23.试讨论各类核苷酸抗代谢物的作用原理。
5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、氨基蝶呤和氨甲蝶呤、氮杂丝氨酸等核苷酸抗代谢物均可
作为临床抗肿瘤药物,其各自的机理如下表所示:
抗肿瘤药物
核苷酸代谢
中类似物 5-氟尿嘧啶 胸腺嘧啶
抑制胸腺嘧核苷酸
合成酶;影响RNA
的正常结构和功能 6-巯基嘌呤 次黄嘌呤 抑制IMP转变为AMP和GMP的反应;抑制IMP和GMP的补救合成和从
头合成 氨基蝶呤和 氨甲蝶呤 叶酸 氨杂丝氨酸 谷氨酰胺 干扰嘌呤、嘧啶核苷酸的合成 作用机理 抑制二氢叶酸还原酶
24.为什么说真核生物基因是断裂基因?请讨论hnRNA的剪接过程。
基因是指为生物大分子编码的核酸片段。在真核生物中,编码序列只占少数,可称为外
显子。非编码序列可称为内含子,它是阻断基因线性表达的DNA片段。这种在同一基因外
显子被内含子分隔的现象就是断裂基因。此外,基因与基因之间还有间隔序列,也是基因断
裂性的表现。mRNA剪接实际上是切除内含子,把外显子互相连接起来,剪接体由snRNP
与hnRNA结合组成。snRNA的U1U2结合一个内含子的两端,使内含子弯曲及两个相邻外
显子互相靠近。U2U6形成催化中心,发生转酯反应。由含鸟苷的辅酶亲电子攻击使第一外
显子切出,再由第一外显子3’-OH亲电子攻击内含子与第二外显子的磷酸二酯键,使内含
子去除而两外显子相接。
25.什么是蛋白质的二级结构?它主要有哪几种?各有何结构特征?
蛋白质二级结构是指多肽链主链原子的局部空间排布,不包括侧链的构象。它主要有
α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲四种。在α-螺旋结构中,多肽链主链围绕中心
轴以右手螺旋方式旋转上升,每隔3.6个氨基酸残基上升一圈。氨基酸残基的侧链伸向螺旋
外侧。每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四个氨基酸残基上的氧形成氢键,以维持α-螺
旋稳定。在β-折叠结构中,多肽链的肽键平面折叠成锯齿状结构,侧链交错位于锯齿状结
构的上下方。两条以上肽链或一条肽链内的若干肽段平行排列,通过链间羰基氧和亚氨基氢
形成氢键,维持β-折叠构象稳定。在球状蛋白质分子中,肽链主链常出现180度回折,回
折部分称为β-转角。β-转角通常有4个氨基残基组成,第二个残基常为脯氨酸。无规卷
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