载体构建步骤
1. pSIH-H1-Ctl（1818 ng/μL）载体线性化
内容需要下载文档才能查看 内容需要下载文档才能查看1%AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒
2. shRNA退火
shRNA的浓度至50nmol/mL，（加shRNA的nmols数ⅹ20的μL）
内容需要下载文档才能查看2+
内容需要下载文档才能查看16℃4. 转化铺板
向连接反应里加入40 μL感受态，冰浴30min，热激42°C 90s，再冰浴5min。 加入200 μl无氨苄的LB培养基，震荡培养1h。
后把液体均匀滴在LB培养皿上，37°C孵箱中过夜。
5. 挑单克隆摇菌
6. 提取质粒酶切验证
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