高白鲑受精卵人工孵化及胚胎发育观测
上传者:秦雯|上传时间:2015-05-07|密次下载
高白鲑受精卵人工孵化及胚胎发育观测
第#)卷第!期!""#年##月
水产学杂志
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高白鲑受精卵人工孵化及胚胎发育观测
张北平!
蔡林钢#
吐尔逊#
马燕武#
张人铭#
李精明!
(’"""")
(’’)"")
郭焱#
(#*新疆维吾尔自治区水产科研所,乌鲁木齐
(!*新疆博州赛里木湖冷水鱼科研开发养殖场,博乐
高白鲑(!"#$%"&’()$*$+)原分布于+&",以北的俄罗斯境内,尤其以俄罗斯西伯利亚地区鄂毕河流域为多。高白鲑属冷水性鱼类。由于该鱼适应性强、生长快、性成熟早、易捕捞、肉味美,又是以浮游动物为主要饵料的鱼类。因此,早在!"世纪初,前苏联渔业科学家们对该鱼的增养殖产生了级大兴趣。他们经过近!"年的探索研究,解决了高白鲑人工繁殖、育苗、增殖、养殖等一系列技术难点,并将该鱼推广到+)!,前苏联全境的大型水域和湖沼中,增加了这些水域的产鱼量,带来了显著的经济效益。到目前为止,该鱼还是俄罗斯主要的移植鱼类。同时,该鱼作为新的增养殖对象也引起了其它国家的重视,欧洲等国及日本纷纷进行引种和移植。我国黑龙江地区也于!"世纪("年代初进行引种,并进行了池塘养殖和人工繁殖试验等(李怀明等,。但在大型水体中进行移殖和进行人工繁殖等工作还未见报道。#--(#-((,#--#)
年新疆在有关部门的支持下,与俄罗斯合作,从俄罗斯引进发眼卵,经孵化后投入新疆冷水湖泊———赛里木湖。通过’年的观测,高白鲑在该湖生长发育良好,!"""年#!月我们首次对性成熟的高白鲑进行了人工采卵和受精,并对(%.万鱼卵进行了人工孵化,现就孵化及胚胎发育初步观测进行小结。
#材料和方法
孵化设备是采用俄罗斯维萨氏孵化器,并在室内进行孵化,室内光线自然,无遮蔽。孵化
#*#孵化设备
瓶为有机玻璃和透明玻璃!种材料,容积为%*!/。水流通过上水箱的自压经软管从瓶底口进入,经上部瓶口处溢出,流速、流量通过进水管可调节。
#*!孵化水源
孵化基地位于新疆博州温泉县。孵化用水常年不冻涌泉水,水温终年较低,水体理化性状见表#。
表#
物理指标含量化学指标含量营养指标含量
收稿日期:!""# $##$!%
孵化用水水质分析结果
悬浮物!&*"7<$
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矿化度-#*"=>!$-*##+2)9"*".
总硬度%%*#
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单位:001总碱度.-*’27>’$.&*."
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电导率#&"34561:;!9’*.)7>?#*&
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#*"-
$期?张北平等:高白鲑受精卵人工孵化及胚胎发育观测??$+?
!"#高白鲑受精卵
我们在赛里木湖冰封前后捕捞!’%%余尾高白鲑亲$%%%年!$月&日到$%%!年&月#%日,
鱼,在现场分批进行了采卵和受精,共采集鱼卵()’万粒。每批鱼卵在送孵化前,在室内(%*漓水放置!*$-,送入孵化室时,标注采集时间和数量(见表$)。+,)
表$
批号!$#&+’)(.!%!!!$
合计
高白鲑卵分装各孵化瓶中的数量记录人工采卵和授精时间!$月$)、$(日!$月&、!%、!.日!$月#%日!$月$%、$!日!$月#%、#!日!$月$+、$’日!$月$(、$.日!月#、&日!月!、$日!$月$$、$#日!$月$!日!月+日
$%%%年!$月&日*$%%!年!月+日
鱼卵的数量(万粒)
(%&’+%(+&%!!%.+)%’%!!%(%+%()’
!"&日常管理
鱼卵进行孵化阶段后,每日!%:%%时和!(:%%时对水温进行测定。同时选定个别天进行
全天水温测定(见图!、,并且每天随时检查孵化瓶鱼卵的浮动情况,随时调节流量和流速。$)发现鱼卵有水霉滋生应及时消毒并将死卵捡出。每周分别取不同瓶中活体观察胚胎发育情
内容需要下载文档才能查看况。
图!$%%%年!$月.日至$%%!年&月!+日
内容需要下载文档才能查看孵化用水水温变化
图$孵化前期($%%!年$月!+日)孵化用水水温昼夜变化
$结果
$"!人工孵化结果
我们在赛里木湖捕捞亲鱼!’#$尾,其中雌鱼&+’尾$%%% 年!$月&日至$%%!年!月+日,
?-)??水产学杂志?第!’卷(平均体重!"#$%,体长"&’((),雄鱼!!&)尾(平均体重*#!%,体长"’’(()。采卵中实际用雌鱼!*$尾,雄鱼+$$尾。通过人工采卵获鱼卵*&)万粒,经洗卵脱粘后,并在低温下放置!,-.后,入孵化瓶中孵化。在本次试验的水温中,经*$,!$+.孵出鱼苗,获鱼苗**万尾,孵化率为
(前期所采"+$万粒卵未受精)。根据孵化天数和水温记录换算,其孵化度日在"!*,!)/&0
平均为"-+1日。"日之间,
-/-胚胎发育观测
高白鲑鱼卵受精后卵膜吸水膨胀,表面全为卵囊所包,受精卵橙黄色,光泽而明亮,卵径在
原生质在卵的动物!/’,!/)之间。受精!2左右形成卵黄周隙,-2后卵膜固化。受精-’2后,
极集中,形成略带淡红色的胚盘,随后受精卵进入卵裂期,受精卵开始分裂,细胞数目成倍递增。胚盘细胞形成的胚层突出在卵膜上,形成高囊胚。以后细胞继续分裂变小,并向下扩张,囊胚高度降低,形成低囊胚。
受精后"+.,胚层进一步向植物极扩张,下包卵黄近!3-,囊胚层细胞沿卵黄向四周扩展,由于卵黄阻碍,外包到一定程度就有大量细胞积聚在囊胚层外周边缘,形成环状隆起。背唇处由内卷及增生的细胞向中央伸展集中形成胚盾。
受精后’-.,此时囊胚层已包围绝大部分卵黄囊,胚盾背面中线处形成一个神经沟,前端略大,以后形成脑。当囊胚层最终完全包围了卵黄囊,胚孔封闭,胚体初步形成。
受精后+-.,胚体脑部两侧出现膨大视泡,胚体体节出现,并逐渐增多、清晰。随着胚体器官进一步分化,在解剖镜下,眼点、头部、躯干、脊椎骨清晰可见,血液形成并流动,胸鳍形成并不时扇动,身体出现少量花斑状色素,颜色逐渐加深。眼点进一步发育,肉眼观察,可见金黄色晶体。有时胚胎在卵内剧烈扭动,特别是一些快出膜的卵内胚胎,扭动相对频繁和剧烈。卵膜变薄,易破。
受精后*$.,胚胎开始孵化出膜,出膜前胚体通过自身分泌的孵化酶使卵膜破裂,尾部首先穿出卵膜,而头部仍然在卵膜内,尾部不停摆动,最终头部也脱离卵膜。
受精后!$$.前后,出膜数量达到高峰期,受精后!$+天前后绝大多数胚胎孵化出膜。本年度生产最早出膜时间为-$$!年"月!’日,全部出膜时间’月-!日前后绝大部分均已出膜,
是-$$!年’月"$日。出膜时仔鱼体长在&/$,&/+((之间,体色透明,仍保持胚胎色素。躯体由鳍褶包围,胸鳍鳍片呈圆形,而腹鳍和脂鳍胚芽还未明显分开。卵黄囊呈长卵形,内含脂肪滴。
"讨论
本次人工采卵*&)万粒卵,而孵出鱼苗仅**万尾,孵化率比较低。其原"/!从孵化结果看,
因是本次工作所用的亲鱼绝大多数为首次性成熟鱼。根据俄罗斯经验,第一次性成熟的卵质较差,其后质量最佳。另外,赛里木湖海拔较高,湖水较深,水温长年较低(4!#1)。高白鲑为适应该湖的环境条件,体内积累脂肪较多,这也在一定程度影响了性腺发育质量。同时还发现高白鲑性腺成熟转化对水温要求非常严格。观测获得只有当湖水温度降至"1以下时,高白鲑性腺才能达到性成熟,这时人工采卵比较顺畅,精液质量也较佳,受精率较高。而水温大于"1时,大部分鱼性腺尚未成熟,人工采卵较为困难,费力,精液质量差,受精率不高。这从不同时间孵化器中的鱼卵孵化过程中也可看出。这说明前期采集的卵,大多数未受精。根
据这些观测结果,我们认为今后进行赛里木湖高白鲑人工繁殖的最佳时间是该湖冰封前后的
&期?张北平等:高白鲑受精卵人工孵化及胚胎发育观测??&)?!"#内。
本次孵化所用水的水温不管是月季还是昼夜变幅均较大。从月季看$%&从图!和图&看出:
(图!)孵化前期水温较高,在’(以下,随后经控制使水温有所下降,并随着气温的影响,!月底至&月底水温最低,平均在&(左右。$月后为了生产需要水温大幅度回升,达到了)(。从昼夜水温看(图&)白天水温低,夜间和早晨水温高。这种水温的变化对高白鲑受精卵胚胎发育产生较大的负面影响。也是造成孵化率不高的因素之一。因此,今后进行孵化工作时,应有效控制和保持孵化用水的水温至关重要。按照赛里木湖的解冻时间和生产运行。今后的孵化水温前期应保持在&*$(。$月中旬逐步升高,但升高的过程必须是渐进的,并且其中最高不能超过+(。这样不仅能缩短孵化期,而且能减少孵化和育苗生产成本。
水质指标(见表!)符合高白鲑精卵孵化的要求。但由$%$本项孵化工作用水为地下涌泉水,
于水源地的施工影响,水中悬浮物较多。孵化中观察发现受精卵卵膜上粘附着大量悬浮物,这在一定程度上影响了胚胎的代谢功能,造成了胚胎发育死亡。对此,今后一定要采取措施解决过滤装置,减少悬浮物对胚胎发育的影响。另外从使用的孵化器经验看,适宜的水量也对受精卵胚胎发育产生较大影响。当孵化瓶中水流速过小,会使瓶中的受精卵不能有效的循环浮动,造成缺氧死亡;当流速过大时,则瓶中受精卵会产生翻泡现象,使卵随水流溢失,同时特别是对胚胎发育中神经胚期的卵由于翻滚过大,将会严重影响胚胎发育。此外,由于各瓶中卵的数量和发育阶段的差异,各瓶中水的流速也应有一定的差异。因此原则上水流量以能使受精卵在孵化瓶中产生微微翻动为宜,而在出苗期可以适当加大水流量,以有利于刚孵化出的幼苗能及时流入收集槽中。在本次生产试验中,水流量的波动范围在,%+*$%$-./01之间,平均为!%+-./01。
及时消毒和捡出死卵非常重要。同时孵化过程应避免光照。从高白$%’孵化日常管理中,
鲑自然繁殖时节也可发现。高白鲑冬季繁殖,并且鱼卵大部分时间在冰下无光的条件下孵化。因此在人工采卵和人工孵化中应避免光照。但由于本次试验的设施等问题,在采卵和孵化时没有避光处理。另外,高白鲑受精卵在人工孵化中主要病害为水霉。治疗和预防水霉病的药物一般是孔雀石绿。消毒浓度应为"22/。消毒时将配制好的溶液倒入水箱中,调节流量,以水箱中的消毒液能在$,*3,/01内流完为佳。消毒间隔时间根据卵的感染程度而定,一般
其目的是防止孵化瓶中过多的死卵浮起,而!,天消毒一次。捡出死卵为每天工作任务之一,
好卵沉底。用细长胶管将浮起的死卵吸出。同时也掺杂一部分好卵,捡出死卵后,再将好卵倒回原瓶,整个操作过程动作要轻,时间不可拖得太长,以防损坏好卵。
参考文献
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[&]李怀明,等%高白鲑养殖、繁殖技术的研究总结报告[4]%鲑鳟渔业,!55!%97:8’678!!3*&&8
[$]张北平,等%高白鲑在赛里木湖的生长发育观测[4]%淡水渔业,&,,,%97:8$,678!33*358
[’]张人铭,等%赛里木湖高白鲑性腺发育观测[4]%水产学杂志,&,,!%97:8!’678!33*358
["]张人铭,等%赛里木湖高白鲑人工繁殖[4]%淡水渔业,&,,!%97:8$!678"!&*!$8
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