微免实验复习整理(图文详尽版本)

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■ 大吞噬现象、小吞噬现象

吞噬功能的测定计数方法：

①吞噬百分率:计数100个中性粒细胞中具有吞噬作用的细胞数,即为吞噬百分率。

②吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计数被吞噬的细菌总数，求平均每个中性粒细胞吞噬

的细菌数即为吞噬指数。

·大吞噬现象要认识“巨噬细胞”

·小吞噬现象主要认识“中性粒细胞”（马蹄状形）

■ 淋巴细胞转化试验（原理、分型、意义）

1、原理：T淋巴细胞可以在分裂剂的刺激下，向母细胞转化。促分裂剂能选择性地激发

T淋巴细胞合成DNA与细胞分裂。转化百分率正常值为70%左右

2、分裂相：即染色体型

3、母细胞：较小淋巴细胞大4-5倍；核质疏松呈网状结构，有1-3个核仁；核周透明区；

胞浆嗜碱性，有空泡

4、过渡型：较小淋巴细胞略大；核质略疏松；着色较淡

5、小淋巴细胞：核质致密；着色深；胞浆少

6、意义：体外淋巴细胞转化反应，可为测定机体细胞免疫状态的指标之一。

■ E玫瑰花环实验

1、原理：T细胞表面有绵羊红细胞受体，可在自然情况下与绵羊红细胞结合，形成E玫

瑰花环，由此可区分T淋巴细胞与B淋巴细胞

2、判定结果：

凡是淋巴细胞周围围绕4个以上绵羊红细胞者为阳性

■ 血清学反应

1、基础：抗原决定簇——抗体的互补决定区

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2、特点：特异性、可逆性、 比例性、阶段性

3、抗原抗体反应因素：电解质、温度、酸碱度

4、抗原或抗体的检测方法：凝集反应、沉淀反应、免疫标记技术

I 凝集反应：（直接、间接）

概念：抗原 + 抗体 = 凝集团块

直接凝集：颗粒性抗原 + 抗体 = 凝集团块（ 玻片法、试管法）

⑴直接凝集反应——玻片凝集反应

① 定性；用已知抗体检测颗粒性抗原；细菌的诊断和分型，红细胞ABO鉴定 ② 出现白色凝集块，属于阳性反应

⑵直接凝集反应——试管凝集反应（半定量，诊断伤寒副伤寒）

间接凝集：可溶性抗原包被于载体 + 抗体 = 凝集团块

反向间接凝集：抗体包被于载体 + 抗原 = 凝集团块

协同凝集：抗体结合金葡菌SPA + 抗原 = 凝集团块

II 沉淀反应：（单项、双向）

概念：可溶性抗原 + 抗体 = 沉淀物

① 单向琼脂扩散

单向琼脂扩散试验是一种定量试验。将一定量已知抗体混于琼脂中，制板，在适当位置打孔，将抗原加入孔中扩散，与板中抗体相遇，在比例合适处呈现白色沉淀环，环的直径与抗原含量成正比。

主要用于测定血清各种Ig和补体成分的含量

② 双向琼脂扩散

可用于分析和鉴定标本中多种抗原成分（抗原、抗体同时扩散（自由、定向） ③ 对流免疫电泳

在相应抗原抗体孔之间可见白色沉淀线。

④火箭电泳：抗原定量试验（抗体琼脂板、抗原扩散（自由、定向）

将一定量已知抗体混于琼脂中，制板，在板的一端打一排小孔，加入待检样品，置于阴极端进行电泳。抗原在泳动过程中与抗体在比例合适部位形成锥形沉淀峰，状如火箭，称火箭电泳。沉淀峰的高低与抗原的浓度成正比。敏感度与单扩相仿，但需时较短。

III 直接凝集反应—玻片凝集

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■ 补体结合实验

■ 中和反应实验：（病毒中和实验、毒素中和实验）略

■免疫标记技术：

1、概念：将已知抗体标记上显示性物质，通过检测标记物，反映有无抗原抗体反应，从

而间接测出微量的抗原或抗体。

2、原理：免疫标记技术是在免疫学、生物化学及显微镜术进展的基础上发展起来的一项

技术，具有特异、敏感、快速的特点。将荧光色素（常用异硫氰基荧光黄，简

称FITC）与特异性抗体（或抗原）以共价键基团牢固结合，但不影响该血清抗

体的免疫特性。这种荧光标记的抗原抗体复合物，可通过荧光灯源中产生的紫

外光或蓝紫光激发产生荧光，而从荧光显微镜加以观察。

3、常用的标记物有： 酶、荧光素、放射性同位素、胶体金、生物素、电子致密物等。

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■ E L I S A（酶联免疫吸附试验）

1、原理：把抗原抗体的免疫反应和酶（主要有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等）的高效

催化作用有机地结合起来，并仍保持其免疫和酶的活性。结合在抗原抗体复合

物上的酶在遇到相应的底物时，可以催化底物水解、氧化或还原，从而产生有

色的物质。颜色反应的深浅与抗体或抗原的量成正比。

2、方法：主要有间接法（用于测抗体）和双抗体夹心法（用于测抗原）。

■ 革兰染色

1、意义：对细菌鉴别、选择抗菌药物、研究细菌致病性等有重要意义。

2、原理：与细菌细胞壁有关，尚未完全阐明。

阴性—红色 阳性—蓝色

■ 细菌学总论

①细菌是一类具有细胞壁的单细胞微生物，形体微小，一般以微米（µm）作为测量单位。 ②细菌按其外型可分为球菌、杆菌、螺型菌三大类。

③不同种类的细菌大小不一，大多数球菌直径约1µm，杆菌长2?5µm，宽0.3?1µm。 ④细菌的特殊结构：荚膜、鞭毛、芽孢、菌毛

【实验】毒力试验：（Elek平板）——鉴定分离出的细菌能否产生外毒素

①方法：在含血清的琼脂平板中央贴上一条浸有白喉抗毒素血清的滤纸条，将待检菌垂

直划过滤纸条接种

②现象：如产生外毒素，则产生白色沉淀线（毒素与抗毒素特异性结合）

③本质：抗原抗体沉淀实验

【实验】细菌划线分离、药物敏感试验（观察抑菌圈的直径，mm来计数）、抗酸染色方法

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■ 细菌生长情况

（1）液体培养基

沉淀生长、混浊生长、表面生长

（2）半固体培养基（0.1%~0.3%琼脂粉）

混浊生长、线状生长

（3）固体培养基（1.4%~2%琼脂粉）

菌落、菌苔

■ 细菌变异

1、菌落变异（S→R变异）

①S型菌落(Smooth)光滑菌落 — 表面光滑有光泽，边缘整齐。

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