缺氧缺血性脑病新生儿血细胞因子表达的意义

第２１卷第６期２００６年３月ＪＡｐｐｌＣｌｉｎＰｅｄｉａｔｒ，Ｖ０１．２１Ｎｏ．６Ｍａｒｃｈ２００６

?３４１?

?论著?

缺氧缺血性脑病新生儿血细胞因子表达的意义

王健１，陆勤２

（１．安徽理工大学医学院病原学与免疫学教研室；２．淮南市妇幼保健院新生儿科，安徽淮南２３２０００）

ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣｙｔｏｋｉｎｅｉｎＰｅｒｉｐｈｅｒａｌＢｌｏｏｄｏｆＮｅｗｂｏｒｎｓｗｉｔｈＨｙｐｏｘｉｃ—ＩｓｃｈｅｍｉｃＥｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙａｎｄＩｔｓＣｌｉｎｉｃａｌ

Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ

Ｗ４ｈＢＪｉａｎｌ，ＬＵ＠Ｈ２

（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｔｉｏｌｏｇｙａｎｄＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＡｎｈｕｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｏｎａ—

ｔｏｌｏｇｙ，ＭａｔｅｒｎｉｔｙａｎｄＩｎｆａｎｔＨｅａｌｔｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｕａｉｎａｎ，Ｈｕａｉｎａｎ２３２０００，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃＤｚ５，ＣＤ２５ｍＲＮＡ，ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一１１７（ＩＬ一１１３）ｉｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｏｆｎｅｗｂｏｒｎｓ

ｗｉｔｈｈｙｐｏｘｉｃ—ｉｓｃｈｅｍｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ（ＨＩＥ）ａｎｄｉｔｓｃｌｉｎｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ（ＰＢＭＣ）ｏｆ

ｎｅｗｂｏｍｓｗｉｔｈＨＩＥａｎｄｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｂｙｒｏｕｔｉｎｅＦｉｃｏｌｌ＿Ｈｙｐａｑｕｅ．ａｎｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＣＤ２５ｉｎｄｕｃｅｄａｎｄｎｏｎ—ｉｎｄｕｃｅｄｂｙｐｈｙ—

ｔｏｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ（Ｐ卜Ｌ气）ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｂｉｏｔｉｎ—ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ（ＢＳＡ），Ｃ赐５ｍＲＮＡｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅａｌ—ｔｉｍｅＰＣＲａｎｄＩＬ一１Ｂｉｎｓｅｒｕｍ

ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｅｎｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙｏｎｔｈｅｆｉｒｓｔ，ｔｈｉｒｄａｎｄｓｅｖｅｎｔｈｄａｙａｆｔｅｒｂｉｒｔｈ．ＴｈｅｆｉｎａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｖｅｌｅｖｅｌｏｆＣｌ－ｈｓ

ｍＲＮＡｗａｓｂａｓｅｄｏｎｒａｔｅｏｆＣＤ２ｓｃＤＮＡａｎｄｇｌｕｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅｐｈｏｓｐｈａｓｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＧＡＰＤＨ）．ＲｅｓｕｌｔｓＯｎｔｈｅｆｉｒｓｔｄａｙ，ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅ

ｒａｔｅｓｏｆＣＤ２５ｉｎｄｕｃｅｄａｎｄｎｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙＰＨＡａｎｄＩＬＩ口ｗｅｒｅ（３．６±１１）％，（２０９±４．８）％，（１７．７±８．２）ｎｇ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．

ＴｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎＨＩＥｇｒｏｕｐａｎｄｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｓ（Ｐ＜０．０１，０．０５）Ｏｎｔｈｅｔｈｉｒｄｄａｙ，ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＣＤ２５ｉｎ—

ｄｕｃｅｄａｎｄｎｏｎ—ｉｎｄｕｃｅｄｂｙＰＨＡａｎｄＩＬ—１８ｗｅｒｅ（３．９±１．２）％，（２２８±５．１）％，（１５．９±４．９）ｎｇ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＴｈｅｒｅｗｅｒｅｈｉｇｈ

ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎＨＩＥｇｒｏｕｐｎｏｎ—ｉｎｄｕｃｅｄａｎｄｉｎｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｓｉｎｓｉｌｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０１，０．０５）．Ｏｎｔｈｅｓｅｖｅｎｔｈｄａｙ，ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅ

ｒａｔｅｓｏｆＣｔｈｓｉｎｄｕｃｅｄａｎｄｂｙＰＨＡｗｅｒｅ（４．１±１．２）％，（２３．８±５．２）％，ＴｈｅｒｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎＨＩＥｇｒｏｕｐａｎｄｎｏｒｍａｌｃｏｎ—

ｔｒｏｉｓｉｎｓｉｌｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）．ＴｈｅｌｅｖｅｌｏｆＩＬ一１ｔ？ｗａｓ（１５．０±３．８）ｎｇ／Ｌ，ｓｔｉｌｌｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｎｏｒｍａＩｃｏｎｔｒｏｌｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｈｏｗｅｖｅｒ，

ｔｈｅｓｔａｂｉｌｅｌｅｖｅｌｏｆＣＤ２ＥｍＲＮＡｃｏｕｌｄｂｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｂａｂｉｅｓｗｉｔｈＨＩＥ（Ｐ＞０．０５）．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓＴｈｅｒｅｉｓｏｂｖｉｏｕｓｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅａｃｔｉｏｎ

ｉｎｂａｂｉｅｓｗｉｔｈＨＩＥ．ＴｈｅｍａｉｎｃｈａｒａｃｔｅｒｏｆＰＢＭＣｏｆｎｅｗｌｍｍｓｉｓａｌｌｉｎｆａｎｔｉｌｅａｎｄｕｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ，ｗｈｉｃｈｓｕｒｆａｃｅｓｉｇｎｉｓｉｎｆａｎｔｉｌｅ，ａｎｄｌｏｗｅｒ

ｌｅｖｅｌｏｆＣ耽５ｉｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＣＤ２ｓⅡ垠ＮＡｃａｎｂｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｌｙｄｕｒｉｎｇｔｈｅｃｏｕｒｓｅｏｆｄｉｓｅａｓｅ．Ｔｈｅｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄ

ｉｍｍｕｎｅｒｅｇｕｌａｔｉｖｅｒｅｓｐｏｎｓｅｉｎｎｅｗｂｏｍｓｉｓｇｒａｄｕａｌｌｙｂｕｉｌｔｕｐｄｕｒｉｎｇｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｃａｎｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｉｎｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙｃａｕｓｅｄｂｙ

ＨＩＥ．

ＪＡｐｐｌＣｌｉｎＰｅｄｉａｔｒ，２∞６．２ｌ（６）：３４１—３４２

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｉｎｆａｎｔ，ｎｅｗｂｏｒｎ；ｈｙｐｏｘｉｃ—ｉＳｃｈｅｍｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ；ＣＤ２５；Ｃ耽５ｍＲＮＡ；ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一１口；ｂｉｏｔｉｎ—ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ

［摘要］目的观察缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）新生儿血ＣＤ２，、Ｃｔｈ５ｎｋＲＮＡ和ＩＬ一１ｐ表达水平，探讨其临床意义。方法Ｆｉｃｏｌｌ常

规分离外周血单个核细胞，用生物素一链霉亲和素、Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法分别检测新生儿ＨＩＥ患儿及足月正常新生儿生后

ｄ１、３、７植物凝集素（ＰＨＡ）诱导前后（ｍ２５、ＣＤ２５ｍＲＮＡ及ＩＬ－Ｉｐ水平，以ＣＤ２５ｃＤＮＡ与磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）比值为ＣＤ２５

ｍＲＮＡ最终相对表达量。结果ＨＩＥ患儿生后ｄ１静息期和诱导期ＣＤ２５表达水平分别为（３．６±１．１）％、（２０．９±４，８）％，ＩＬ—ｌｐ为

（１７．７±８．２）ｎｇ／Ｌ，与正常对照相比，差异有显著性（Ｐ＜０．０１，０．０５）。生后ｄ３Ｃａ，表达水平分别为（３．９±１．２）％、

（２２．８±５．１）％，ＩＬ一１１３为（１５．９±４．９）ｎｇ／Ｌ，与正常对照相比，静息期差异有显著性（Ｐ＜０．０ｌ，０．０５）。生后ｄ７静息期和诱导期

ＣＩ）ｚ５表达水平分别为（４．１±１．２）％、（２３．８±５．２）％，与正常对照相比，静息期差异有显著性（Ｐ＜０．０５），ＩＬ－１ｐ为（１５．０±

３．８）ｎｇ／Ｌ，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。ＨＩＥ患儿ＣＤ２ｓｍＲＮＡ与对照组相比，无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论ＨＩＥ患儿存在明显

炎症反应；新生儿免疫细胞表面ＣＤｅ５表达水平偏低，但其ｍＲＮＡ水平稳定，具有一定免疫调节能力，可参与ＨＩＥ脑损伤的修复。

实甬ＪＬ科艋臻杂志．２００６．２ｌ｛６ｌ：３４ｌ一３４２

［关键词］婴儿，新生；缺氧缺血，脑；（、Ｄ２５；ＣＩ）２ｓｍＲＮＡ；白细胞介素．１８；生物素一链霉亲和素

［中图分类号］Ｒ７２２．１［文献标识码］Ａ［文章编号］１００３５１５Ｘ［２００６）０６—０３４ｌ０２

新生儿缺氧缺血性脑病（ｈｙｐｏｘｉｃ—ｉｓｃｈｅｍｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ，３７－－４２周，出生体质量２５００－－４０００ｇ，均有出生窒息史，根据意ＨＩＥ）是围生期窒息缺氧导致的脑损害ｕＪ，是足月儿围生期脑识障碍、肌张力改变、原始反射异常、惊厥等临床表现及ＣＴ检损伤的最常见病因幢ｊ。外周血单个核细胞（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄ查结果分为轻度１５例，中度９例，重度８例。ＨＩＥ诊断及分度ｍｏｎｏｎｕｃ［ｅａｒｃｅｌｌｓ，ＰＢＭＣ）富含各种免疫活性细胞，主要为Ｔ细符合《新生儿缺氧缺血性脑病诊断依据》ＨＪ。对照组３０例为我胞，可分泌多种细胞因子，参与宿主的免疫调节和抗感染反院产科分娩的正常足月顺产新生儿，男１９例，女１１例，胎龄应旧Ｊ。为探讨ＨＩＥ与细胞免疫的关系，本文以免疫组织化学、３７－－４２周，出生体质量２５００～４０００ｇ，无宫内发育迟缓、窒息，排Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ法及ＥＬＩＳＡ法动态检测ＨＩＥ患儿ＯＤｅ，、除宫内感染，生后７ｄ内健康。母亲孕期体健，分娩前无明显感ＣＤ２５ｍＲＮＡ和ＩＬ－Ｉｐ表达水平。现报告如下。染史，无血制品及免疫抑制、增强剂使用史。

资料与方法二、试剂与仪器ＢＳＡ法：ＣＤ２。检测试剂盒购自上海思创

生化电子有限公司；ＥＬＩＳＡ法：ＩＬ，ｌ检测试剂盒购自法国ＤＩ．

一、一般资料ＨＩＥ组３２例为淮南市妇幼保健院新生儿科ＡＣＬＯＮＥ公司。Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒购自美国Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司。２００２年５月～２００３年１０月收治患儿，男２２例，女１０例，胎龄

ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒＦａｓｔＳｔａｒｔＤＮＡＭａｓｔｅｒＳＹＢＲＧｒｅｅｎＩ购自德国

Ｒｏｃｈｅ公司。ｉＣｙｃｌｅ．ｚ荧光实时定量ＰＣＲ仪购自美国Ｂｉｏ—Ｒａｄ

［收稿日期］２００６—０２—０２公司。淋巴细胞分离液购自上海生化试剂二厂，生产批号：［基金项目］淮南市科技局自然科学重点项目资助（２００１—０５）

［作者简介］王健，男，教授，硕士研究生导师，硕士学位，研究方向为０１０１２０；ＲＰＭＩ１６４０培养粉为Ｇｉｂｃｏ公司产品。二氧化碳感染与免疫疾病。（Ｃ０２）培养箱购自日本Ｓａｎｙｏ公司。

万方数据

Ｎｏ．６

?３４２?韵枷缔黼第２１卷第６期２００６匀ａ３月ｄＡｐｐｌＣｌｉｎ删妇，刚．２１Ｍｎ础２００６

三、实验室检查１．ＣＤ２ｓ检测：将新鲜肝素抗凝血１ｎ１ＬＨＩＥ患儿通过Ｔｈｌ、Ｔｈ２细胞分泌ＩＦＮ一７、ＩＬ－２、ＩＬ－５、ＩＬ．６等参用Ｆｉｏｌｌ～Ｈｙｐａｑｕｅ常规分离ＰＢＭＣ，以ＲＰＭＩ１６４０完全培养液与ＨＩＥ的发病过程。ＨＩＥ患儿对因缺氧缺血产生的炎性反应配成（１～３）×１０６／ｍＬ细胞悬液，取１０“Ｌ涂布于印有防酸漆具有较强的免疫反应性，～方面通过释放ＸＬ－Ｉｐ、ＩＬ－６、ＩＬ－８等圈的玻片孔内，作静息期ＣＤ２５检测。取自然干燥的涂片，用新细胞因子参与局部的炎症反应，另一方面通过释放ＩＬ－ＩＯ等细鲜丙酮固定１５～２０ｒａｉｎ，干后加入抗一Ｔａｃ的ＭｃＡｂ及生物素胞因子，抑制炎症递质的产生，降低免疫损伤。

化羊抗鼠ＩｇＧ、ＳＡ－ＨＲＰ于各孔中，经３７℃含５％、ｃ０２培养箱ＣＤ２５ｍＲＮＡ是反映Ｔ细胞编码ｃＤ２５的功能基因，其表达孵育３０ｒａｉｎ后，用Ｔｒｉｓ缓冲液（ＴＢＳ）漂洗，加入当天新鲜配制水平可反映编码分泌ＣＤ２，的能力［７｜。本文结果显示，ＨＩＥ患的二氨基联苯胺（ＤＡＢ）显色液，待显色明显时用ＴＢＳ漂洗，终儿ｃＤ２５ｒｎＲＮＡ表达水平略低于正常新生儿，但差异无显著性止显色，高倍镜下观察，计数２００个细胞，细胞膜呈棕色者为（Ｐ＞０．０５），且随着Ｅｌ龄增加和综合治疗后缺氧缺血症状的改阳性，分别计算阳性细胞百分率。取上述分离提纯的细胞悬善，ＣＤ２５ｍＲＮＡ表达水平并无明显改变，说明尽管新生儿外周液０．５ｍＬ，加入最终浓度为２００ｍｇ／ＬＰＨＡ的１６４０完全培养血幼稚Ｔ细胞比例较高，成熟Ｔ细胞相对较少，但这些幼稚Ｔ液０．５ｎｌＬ，置３７℃、５％Ｃ０２环境孵育７２ｈ。取沉淀细胞同细胞已初步具有编码分泌ＣＤ２；的功能。

法涂片、孵育、漂洗、镜检，行诱导期ＣＤ２５检测。２．ＣＤ２，ｍＲＮＡＩＬ－ｌ／？是缺氧缺血性脑损伤后早期反应的细胞因子，是神Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅＰＣＲ检测：分批集中采取上述分离提纯的Ｐ瑚以Ｃ，用经一内分泌一免疫调节系统中的关键介质。外周ＩＬ一１＿｜３可通过Ｔｒｉｚｏｌ试剂抽提患儿ＰＢＭＣ中的总ＲＮＡ，逆转录为ｃＤＮＡ置神经介质作用于中枢神经系统（ＣＮＳ）或通过受损血脑脊液屏一８６℃冰箱备检。采用ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＩ荧光标记法检测ＰＣＲ障进入ＣＮＳ。ＩＬ－ｌｐ可上调细胞间黏附分子１（ＩＣＡＭ－１）的表产物，总反应体系为２５止，包括引物１ｔｍｌｏｌ／Ｌ，氯化镁２．５达，而ＩＣＡＭ．１促进中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞在损伤区ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｅｘ—Ｔａｑ１Ｕ，２０ｒｎｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，ＰＣＲｂｕｆｆｅｒ（５００域聚集，这些细胞又继续释放细胞毒物质，如兴奋性氨基酸、ｍｍｏｌ／Ｌ氯化钾，１００ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ，２０ｇ／Ｌｇｅｌａｔｉｎ，ｐＨ８．３），５×一氧化氮、氧自由基、神经毒细胞因子，并再次引起神经损ＳＹＢＲＴＭＧｒｅｅｎＩ液。２＂Ｌ标准品或模板ｃＤＮＡ，模板ｅＤＮＡ伤旧Ｊ。本研究发现ＨＩＥ患儿血浆ｉｔ．－ｌｐ水平显著高于对照以１：４稀释。扩增反应参数如下：９５℃预变性３００Ｓ，９５℃１０组，重度ＨＩＥ患儿急性期血浆ｉｔ．－１／３水平显著高于对照组和Ｓ，６５℃１０Ｓ，共４０个循环，最后７２℃保温３００Ｓ。以１０９ｃＤ—轻度组，恢复期则显著降低，提示ＨＩＥ患儿机体免疫细胞活ＮＡ／ｌｏｇ磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）比值为其最终含量。３．化，［Ｌ－１１３作为免疫病理损伤中的重要介质，参与缺氧缺血性ＩＬ－１８检测：采用固相夹心ＥＬＩＳＡ法。脑损伤的炎症反应，并与ＨＩＥ严重程度有关。在一定程度上

四、治疗方法患儿住院后均采用国内通用的综合治疗，反映了ＨＩＥ患儿脑损伤的程度，对病情的监测具有一定意义。即３项支持治疗，维持充分的通气和换气功能，纠正酸碱、电表１ＨⅢ患儿血ａ）２５、ＣＩ）２５ｍＲＮＡ及ＩＩ．－ｌｌＩ水平（上－Ｉ－ｓ，％）解质紊乱，维持良好的血液灌流，改善心功能。积极控制惊厥Ｔａｂｌｅ１ＬｅｖｅｌｓｏｆＣＤ２５，ｃＤ２５ｍＲＮＡａｎｄＩｎｔｅｒｌｅｕｌｋｉｎ～ｌｐｉｎＳｅｒｕｍｏｉ＇

Ｎｅｗｂｏｒｎｗｉｔｈｒｌ［Ｅ（ｘ±ｓ。％）

和颅内高压。应用营养脑细胞制剂等。…。呱哦ｍＲＮＡ儿１ｐ

五、统计学处理两组ＣＤ２钆Ｃ耽ｓｍＲＮＡ及Ｉｔ．－ｌｔ３水平以，．“ｔＴｇＪ“

静息期诱导期（１０９正ＮＡ／崦ＧＡＩ硎）（ｒｉｇ／Ｌ）

ｚ±Ｓ表示，采用ｔ检验，Ｐ＜０．０５为有显著性差异。ｄ１对照组３０４，３±１．３２４．１±５．５１．２１６±０．１４６１１．２±５．３

ＨＩＥ组３２３．６±１．１２０．９±４，８１．１８９±０．１３６１７．７±８．２

结果ｔ２．２９４２．４４５０．７７２３．６踟

两组血ＣＤ２５、ＣＤ２５ｒｎＲＮＡ及ＩＬ—ｌｐ水平见表１。Ｐ＜０，０５＜０．０５＞０．０５＜０．０１

轻度１５３．９±１．２２３．２±５．０１．２０±０．１３８１２．０±５，７

讨论中度９３．４±１．２２０．０－＋４．８１．１７５±０．１２３１８．４±８．１’

重度８３．１±０９１７．６±４，５。１．１６８±０．１２１２７．５±９．７６

以往研究表明ＨＩＥ的发病是由于脑能量代谢障碍、兴奋ｄ３对照组３０４．６±１．２２４．９±５．７１．２２２±０．１５０１２．７±４．４

性氨基酸的神经毒损伤、钙离子内流与再灌注损伤、自由基损ＨＩＥ组３２３．９±１．２２２．８±５．１１．１９４±０．１４２１５．９±４．９

ｔ２．２９５１．５３１０．７４９２．６９９

伤和微血管损伤等，近年来发现ＨＩＥ与患儿细胞免疫功能亦．Ｐ＜０．０５＞Ｏ０５＞０．０５＜０．０１有关。ＨＩＥ患儿血ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋均明显较低，病情缓解轻度１５４，１±１．３２３．８±５．２１．２０±０．１３２１２．１－＋４．０

中度９３．８±１．２２２５±５，１１．１０±０．１５０１６．５±５，４‘

或好转后明显上升，说明患儿细胞免疫参与ＨＩＥ的病理生理重度８３．５±１．０２１．１±４．９１．００３±０．１３１２２．３±６．２６过程。窒息缺氧与ＨＩＥ可引起免疫功能紊乱，使新生儿ｄ７对照组３０４．７±１．０２５．３±５．８１．２３４±０，１５６１２．０±４．０Ｔ细胞亚群紊乱、免疫球蛋白与补体水平低下，而免疫功能异ＨＩＥ组３２４．１±１．２２３．８±５．２１．２０４±０．１５０１５．０±３．８

ｔ２．１３１１．０７４０．７６７３．０２９

常又进一步导致和加重新生儿缺氧缺血性脑损伤【３ｊ。＿Ｐ＜０．０５＞Ｏ．０５＞０．０５＜０．０１

ＣＤ２５是ＩＬ－２受体的ａ亚单位，又称ｍＩＬ一２Ｒ，是Ｔ细胞活轻度１５４，４±１．３２４．７±５．３１．２２０±０．１４８１２．４±３．３

中度９４．０±１．２２３．５±５．２１．１７６±０．１５３１５．８±４．０。

化的重要标志，在ＩＬ－２发挥生物学效应上起关键作用，其表达重廑！．３：§圭！：Ｑ丝：！圭§：！！：！竖圭Ｑ：！塑１２：Ｑ圭！：§：水平可反映Ｔ细胞的激活过程和机体的免疫状态【５Ｊ，当Ｔ细与ＨＩＥ轻度相比＋Ｐ＜Ｏ．０５，６Ｐ＜Ｏ．０ｌ

胞功能受损时，ＣＤ２５表达率明显降低。本文结果显示，新生儿［参考文献］

［１］杨存明，宋健刚．新生儿缺氧缺血性脑病１３６例分析［Ｊ］．新乡医学

ｄｌＣＤ２５水平均较低，明显低于健康成人水平【６Ｊ，生后ｄ３逐渐院学报，２００５，２２（３）：２４２～２４３．

增高，生后ｄ７ＣＤ２５水平趋于正常，与正常对照相比差异无显［２］ＨｅｄｔｊａｒｎＭ，ＭａｌｌａｒｄＣ，ＨａｇｂｅｒｇＨ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｇｅｎｅｐｒｏｆｉｌｉｎｇｉｎｔｈｅ著性（Ｐ＞０．０５），提示虽然新生儿细胞免疫功能不足，但已具ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｍｏｕｓｅｂｒａｉｎａｆｔｅｒｈｙｐｏｘｉａ—ｉｓｃｈｅｍｉａ［Ｊ］．ＪＣｅｒｅｂＢｌｏｏｄ

ＦｌｏｗＭｅｔａｂ，２００４，２４（１２）：１３３３—１３５１．有一定的免疫调节能力，主要表现为诱导期ＣＤ２５无异常，提示（下转第３５４页）

万方数据

?３５４?

勃帆射蝴第２１卷第６期２００６年３月

根据年龄、发作频率、描

－，Ａ删ａ跏删衙ｒ．Ⅷ．２１

Ｎｏ．６

Ｍｎ砌２００６

二、癫痫患儿７３例发作期的脑电表现７３例患儿发作期中出现棘波、棘慢波、尖波、尖慢波７０例，出现多棘慢波１０例，出现高峰失律７例，出现爆发抑制４例，出现单一节律发放的３例。

三、癫痈患儿７３例监测后分类

暂的局限性发作症状，而只能提供泛化后的、继发的全面性发作表现。本组描记前后不一致的３４例中，８例全面强直和（或）阵挛发作确诊为局限继发全面性发作；另外，结合发作间歇期的脑电图表现，４例全面强直和（或）阵挛发作确诊为颞叶癫痫。因此，ＶＥＥＧ若能描记到此时的发作，通过反复回放来观察临床发作的表现，结合发作初期的脑电图起源情况，就能区分是全面性发作还是局限继发性全面性发作。

本组描记前后不一致的３４例中，２例失神性发作，描记后确诊为失神伴肌阵挛性发作。失神发作具有典型的凝视、呆滞、发作频繁等临床特点，通过过度换气等诱发试验的脑电图出现对称、同步３Ｈｚ棘慢波的阳性率高，一般经常规脑电图即可得到确诊和分类诊断【６，７｜。本组２例常规脑电图结合典型的临床发作已能诊断，足量丙戊酸钠治疗无效，经ＶＥＥＧ证实，除失神外伴眼肌阵挛，加用氯硝西泮后，发作得到控制。可见ＶＥＥＧ对癫痫的分类诊断和正确选药的重要性【８Ｊ。

复杂局限性癫痫极易泛化为继发性全面性发作，临床上若没有发现精神运动或自动症状，就极易与全面性发作混淆。本组描记前后不一致的３４例中，４例颞叶癫痫的先前诊断是全面强直和（或）阵挛发作；６例额叶癫痫先前诊断为复杂局限

记到的发作表现、同步及间歇期脑电图。确诊全面大发作１２例，全面强直１１例，全面阵挛、肌阵挛、失神伴肌阵挛各２例，婴儿痉挛８例，Ｌｅｎｎｏｘ—ＧａｓｔａｕｔＳｙｎｄｒｏｍｅ４例，大田原综合征１例；全面性发作占５７．５％（４２／７３例）。额叶癫痫６例，中央颞区棘波良性局灶性癫痫５例，颞叶癫痢、顶叶癫痫各４例，枕叶癫痫１例。局限继发全面性发作１１例；局限性发作占４２．５％（３１／＇／３例）。

四、监测前后的癫痫分类发作监测前后癫痫发作类型一致３９例，其中全面大发作１２例，全面强直１１例，全面阵挛２例，婴儿痉挛５例，肌阵挛１例，局限运动性５例，局限继发全面３例。监测前后癫痫发作类型不一致３４例见表１。

表１

Ｔａｂｌｅ

１

ＶＥＥＧ前后癫痫发作类型不一致的３４例分类

Ｔｈｉｒｔｙ—ＦｏｕｒＩｎｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔＥｐｉｌｅｐｔｉｃＳｅｉｚｕｒｅＴｙｐｅｓａｆｔｅｒ

Ｖｉｄｅｏ—ＥＥＧ

Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ

”

监测后癫痫分类

８局限继发全面性发作

３婴儿痉挛

。４颞叶癫痢

ＬＧＳ

４

失神伴肌阵挛

枕叶癫痴肌阵挛

中央颞区棘波良性局灶性癫痫额叶癫痫

２

１１

ｎ监测前癫痫分类

全面强直和（或）阵挛８

３全面强直

全面强直和（或）阵挛４全面强直和（或）阵挛４失神性发作２

１局限继发全面性发作

全面阵挛性发作１

性发作３例，失神性发作、局限运动发作、局限继发全面性发作各１例。回放视频脑电图时，要注意发作早期的起源情况，同时要结合发作间歇期脑电图。明确癫痫的分类，弄清楚癫痢病灶的起源后，不仅对正确的选药治疗有帮助，同时对癫痫外科手术治疗的定位也有指导作用旧Ｊ。

［参考文献］

［１］章素芳，孙西霞．ｄ，ＪＬ癫痫的临床与遗传研究进展［Ｊ］．中国优生与遗传杂志，２００５，１３（７０）：１３５．

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５

全面强直和（或）阵挛局限继发全面性发作肌阵挛

复杂局限性发作失神性发作

局限运动性发作

局限继发全面性发作

３

１１

６３１

１１

讨

论

临床上有些发作不典型而不能确诊癫痫或部分患儿可确诊为癫痫，但无法分型。不同类型癫痫的治疗及预后不同。因此癫痫的正确诊断和分类非常关键。部分癫痢患儿，常规脑电图已难以满足临床医师鉴别癫痫发作的类型，从而不能正确选药治疗和判断预后，常使癫痫病人遭受到医源性难治性发作。发作期脑电图监测就成为发作性疾病的分类诊断和正确选药的重要手段【２￣５Ｊ。本组在ＶＥＥＧ监测前，诊断全面性发作为８０．８％（５９／７３例）；局限性发作为１９．２％（１４／７３例）。ＶＥＥＧ监测后确定为全面性发作为５７．５％（４２／７３例）；局限性发作为４２．５％（３１／７３例）。与监测前相比，发生了明显变化。导致这一现象的主要原因是家属或其他目击者在发作时，缺乏必要的医学专业知识，无法关注发作初始阶段很短

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（本文编辑：邓丽娜）

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（本文编辑：周二强）

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