黄籽甘蓝型油菜核心种质的SSR标记分析_曲存民

第３自然科学版）７卷第１期　　　　　　　　　西南大学学报（０１５年１月　　　　　　　　　　　２

）Ｖｏｌ．３７　Ｎｏ．１ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎＪａｎ．０１５　　　　　　２ｙ（

：／ＤＯＩ１０．１３７１８．ｃｎｋｉ．ｘｄｚｋ．２０１５．０１．００１ｊ

黄籽甘蓝型油菜核心种质的ＳＳＲ标记分析

２２２，　卜海东１，，　刘晓兰３，　王　敏１，，曲存民１，

２２２２，　刘水燕１，，　杨绍锋１，，　王　瑞１，，卢　坤１，

２２２，　谌　利１，，　李加纳１，徐新福１，①

１．西南大学农学与生物科技学院，重庆４００７１６；２．南方山地农业教育部工程研究中心，重庆４００７１６；

荣昌校区）动物医学系，重庆荣昌４３．西南大学（０２４６０

摘要：核心种质筛选是植物遗传资源研究和利用的便捷途径，利于种质资源杂种优势利用．遗传多样性分析有利于最优亲本组合的鉴定，以期能够产生遗传变异最大的后代群体和促进不同资源的有利基因渗透到栽培品种．该研究通过表型数据分析表明，初选核心种质能够有效地代表参试群体的遗传多样性，利用２０对ＳＳＲ标记对２０份黄籽甘蓝型油菜的核心种质进行了遗传多样性分析，共检测出１２８个等位基因，每对引物在不同材料之间的等位基因数在４～１１之间，平均位点为６．４０个，多态信息量ＰＩＣ值在０．８１～０．９２之间，通过ＵＰＧＭＡ法，核心种质的遗传相似系数介于０．１７～０．６１之间，说明黄籽甘蓝型油菜核心种质具有较丰富的遗传多样性．该研究为甘蓝型黄籽油菜基因资源的挖掘和黄籽杂交育种的利用提供了理论基础．

关　键　词：甘蓝型油菜；黄籽；ＳＳＲ；种质资源；遗传多样性

（）中图分类号：Ｓ６３４．３　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：１６７３９８６８２０１５０１０００１０６－－－

种质资源蕴藏丰富的遗传多样性，是作物新品种培育及育种研究的重要物质基础．在世界范围内巨大的种质资源数量使得育种工作者很难对其进行深入研究并加以有效利用．因此，核心种质的概念于１９８４年

１］，有效促进了种首次被提出，表示尽可能以种质资源的最小数量来最大限度地代表整个种质资源多样性［

］］２］３－４］５］６－１０１１－１２，且在小麦［、大豆［、水稻［质资源评价、利用及发掘重要基因效率［及玉米［等主要作物中已

［３－１］８建立了相应的核心种质资源库，并用ＳＳＲ标记对其进行了遗传分析１．

油菜不仅是我国重要的油料作物，且种质资源十分丰富，与其他作物相同，种质资源的创新与利用也作为油菜育种工作中主要组成部分而备受关注．在生产中，甘蓝型黄籽油菜以其含油量和蛋白含量高，纤维素和多酚等有害物质含量低，油质清澈透明，饼粕饲用价值高等一系列优点，引起国内外育种家的高度重视．但由于甘蓝型油菜在自然界中缺乏天然的种质资源，大部分黄籽均是通过人工合成或诱变获得，因

１９］此针对黄籽甘蓝型油菜核心种质资源筛选利用方面的研究相对较少，但在白菜型油菜中有相关报道［．

２０］本研究根据刘晓兰等［对重庆市油菜工程技术研究中心提供的１８０份黄籽甘蓝型油菜骨干亲本材料

的研究结果，采用ＵＰＧＭＡ法对其进行了遗传背景的差异分析，并综合比较了５个主要品质性状，共获得可以代表其亲本种质材料间背景差异的核心种质２０份．因此，本研究以获得的２０份黄籽甘蓝型油菜核心种质为材料，分析其品质性状并利用ＳＳＲ标记技术检测其分子水平上的多态性，从而确定育种可以充分利用的杂种优势亲本群，为选配黄籽甘蓝型油菜杂交种提供稳定亲本，对于今后杂交育种和优势组合的选配具有重要意义．

收稿日期：２０１３０５１３－－

；国家自然科学基金（，３；重庆市主要农作物良种创新工程项目基金项目：８６３重点项目（２０１１ＡＡ１０Ａ１０４）Ｕ１３０２２６６１４０１４１２）

（）；国家科技支撑计划项目（）；中央高校基本科研业务费专项资金（，ＣＳＴＣ２０１２ＧＧＢ８０００８２０１３ＢＡＤ０１Ｂ０３１２ＸＤＪＫ２０１３Ｃ０３１ＸＤ－－

）；西南大学博士基金（）ＪＫ２０１２Ａ００９ＳＷＵ１１２０３６．

，男，山东潍坊人，讲师，主要从事作物分子育种研究．作者简介：曲存民（１９８３－）

通信作者：李加纳，教授．①

２

／／西南大学学报（自然科学版）ｔｔｘｂｂｂ．ｓｗｕ．ｃｎ７卷　　　　　ｈ　　　　　第３ｐ：ｊ

１　材料与方法

１．１　试验材料

１７］

根据刘晓兰等［对本研究室１８０份黄籽甘蓝型油菜的研究结果，选取了２０份具有遗传多样性及种

，均由西南大学重庆市油菜工程技表１）质特性差异明显、遗传距离较大的甘蓝型油菜黄籽为核心种质（

术研究中心多年培育可供利用的亲本育种品系，且在全国冬油菜产区经这些品系选育的多个高产优质杂交油菜品种被广泛种植．田间试验在重庆市北碚西南大学歇马试验基地播种，单株移栽种植，每份材料２０株，２次重复，田间管理按常规生产方式进行．成熟后分小区收获种子，用于品质性状的分析．

表

黄籽甘蓝型油菜核心种质系谱来源

１．２　核心种质品质性状的测定

，）利用近红外光谱仪（测定核心种质种子含油量、蛋白质、硫苷、芥酸和油酸含量，每份ＦｏｓｓＴＲ３７００－

材料重复测定３次，取平均值．１．３　基因组ＤＮＡ提取

［１］

，按照Ｄ每株系随机选取３～５株幼嫩叶片混合样１ｇ的Ｃｏｌｅ等２ＴＡＢ方法提取基因组ＤＮＡ，用ＴＥｙ

溶解于－２０℃冰箱保存备用．１．４　ＳＳＲ分子标记分析

／／）本研究涉及的Ｓ数据库下载；②ＰＳＲ引物来源包括：①ＢｒａｓｓｉｃａＤＢ（ｈｔｔｗｗｗ．ｕｋｃｒｏ．ｎｅｔｉｕｅ－ｐ：ｐｑ

［２２］

ｍａｌ等于２００５年公开发表的序列；③日本蔬菜茶叶研究所ＳａｔｏｒｕＭａｔｓｕｍｏｔｏ教授提供的序列；④加拿　大ＮＡＦＦ公开发表的序列．源于ＢｒａｓｓｉｃａＤＢ和Ｐｉｕｅｍａｌ等文献中涉及序列由上海生物工程技术有限公司ｑ合成，日本蔬菜茶叶研究所和加拿大ＮＡＦＦ提供的序列为上海英俊生物公司合成．采用本实验室优化后的

２＋

，Ｄ，含１ＰＣＲ扩增反应体系（１０μＬ）ＮＡ模板为２０ｎ１０×ＰＣＲｂｕｆｆｅｒ（５ｍＭ　Ｍ１．２μＬ，０．２μＬ　ｇｇ）

／／１０ｍｍｏｌＬｄＮＴＰ，０．５ＵＴａＤＮＡ聚合酶，引物０．５μｍｏｌＬ，加ｄｄＨ２Ｏ至总体积１０μＬ．ＰＣＲ反应程　ｑ　

，，），，序为９４°Ｃ预变性５ｍｉｎ；３５个循环（９４℃变性４５ｓ５５℃退火４５ｓ７２℃延伸１ｍｉｎ７２℃延伸１０ｍｉｎ

１６℃保存．扩增反应产物通过聚丙烯酰胺凝胶检测，银染观察并照相．

１．５　数据统计分析

），然后分别以０，有带赋值为１，无带赋值为０，缺失为９１和９对ＳＳＲ扩增产物进行统计建立数据库（

［］３

，简方法计算获得单个Ｓ参照Ｓｅｎｉｏｒ等２ＳＲ标记位点的多态性信息量（ＰｏｌｍｏｒｈｉｃＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＣｏｎｔｅｎｔ　　ｙｐ

，即称ＰＩＣ）

２

ＰＩＣ＝１－∑ｆｉ

［４］

，简称Ｍ其中ｆ方法计算标记索引系数（ｉ位点的基因频率；参照Ｓｍｉｔｈ等２ＭａｒｋｅｒｉｎｄｅｘＩ）．聚类分　ｉ表示

析按非加权组平均法（进行，所有数据分析采用软件ＳＵＰＧＭＡ）ＰＳＳ１３．０和Ｅｘｃｅｌ２００３完成．　　１．６　核心种质的评价参数计算

在原始种质群体和核心种质间，同一品质性状方差与平均数的差异显著性分别用Ｆ检验和ｔ检验进行检测，核心种质主要特性用平均数、方差、极值、变异系数、偏度和峰度等６个主要评价参数进行评价．

２　结果与分析

２．１　核心种质的特性指标评价

表型性状能反映出种质资源的基本特征，通过对种质资源进行多样性分析可有效挖掘有利基因并加以

第１期　　　　　　　　曲存民，等：黄籽甘蓝型油菜核心种质的ＳＳＲ标记分析

３

利用．采用双样本ｔ测验进行比较结果表明，本研究对筛选出的２０份黄籽甘蓝型油菜核心种质性状与原始种质群体差异不显著，说明初选的２０份黄籽甘蓝型油菜核心种质材料能够有效地代表参试的原始种质群

）体，可用该核心种质进行遗传多样性分析（表２．

表２　初始种质群体与核心种质５个种质特性品质性状的平均数、极值、方差、变异系数、偏度和峰度性　　状·ｇ－１）硫苷含量／（ｍｏｌμ

含油量／％

类型Ｃ　Ｏ　Ｃ　Ｏ　

芥酸含量／％

Ｃ　Ｏ　

蛋白质含量／％

Ｃ　Ｏ　

油酸含量／％

Ｃ　Ｏ　

平均数

极值

方差

变异系数０．５７　０．５８　０．０６０．１３．３１　３．０７　０．０７０．０８　０．１８０．１９

偏度２．０８　０．９８－０．２３－０．５３　４．４４　４　－０．０９　０．０６　－２．６７　－１．９５　

峰度４．４６　－０．１－１．０４　１．１２１９．７９　１５．１２０．０９　０．５３９．４６　５．０１

０．５８　

１．２４

０．１　

１．０６

０．１５　

１．３２

０．２４　

１．１１

ｔ值０．８４　

Ｆ值１．３９

４７．５０±０．１９６．３３～１３３．８６３７．８６　２　７　５６．０６±０．３９７．１４～１６３．３４０５１．１４　１　１　４０．５２±０．２６６．８１～４４．３６　３　３８．３９±０．３４５．８４～４９．９８　２　２．２８±０．０６．００～３４．３４　０　２．６２±０．０８．００～４３．９５　０　２６．４７±０．１２２．８２～３０．２１　２　２７．１９±０．１７１．６６～３４．２５　２　５８．３７±１．１２２．６～７８．９４　２　６４．９１±２．２１２．０９～７８．９４　１　

５．５４　１４．８５　５６．８５　６４．６７　３．０５　４．８９　１３５．１３　１２８．５５　

Ｃ分别代表原始种质群体和核心种质．　　注：Ｏ，

２．２　核心种质的等位基因分析

在２０份黄籽甘蓝型核心种质材料间，本研究中利用２０对ＳＳＲ引物共检测到１２８个等位基因位点，每对引物检测出的等位基因平均位点数为６．４０个，计算ＰＩＣ的平均值为０．８６，标记索引系数ＭＩ等于５．５４，反映了黄籽甘蓝型油菜核心种质间具有丰富的遗传多样性．另外，ＢＲＭＳ３２４和ＣＢ１０３６４两对引物均获得１１个等位基因位点数，且ＰＩＣ值和ＭＩ值都较高，而引物ＢＲＭＳ０７１和ＢＲＭＳ２４０最低，均为４个，ＰＩＣ值

），说明扩增的等位基因数多少与Ｐ表３和ＭＩ值都较低（ＩＣ值和ＭＩ值具有一定的相关性．

表３　２０对ＳＳＲ引物检测到２０份黄籽甘蓝型油菜核心种质的遗传变异

引物名称

引　　物　　序　　列

染色体Ａ０３，Ｃ０３　Ａ０５　

Ａ０３，Ｃ０９　Ａ０３　Ａ０５　

等位基因数７　６　５　４　４　

多态性信息量

标记索引

ＢＲＡＳ０５１ＧＧＣＴＡＣＡＡＡＡＴＧＴＴＴＧＡＴＡＡＧＣＴＣＴ／ＡＣＣＴＧＡＡＡＧＡＧＡＧＧＣＴＡＣＡＣＡＴ　

ＢＲＡＳ０７２ＧＡＡＴＡＧＣＣＴＣＧＣＡＧＡＡＧＴＡＧＣ／ＣＧＡＣＧＧＣＧＡＴＡＡＡＡＣＧＡＡ　０５０ＣＡＣＣＧＴＣＧＧＡＧＴＣＴＧＡＡＴ／ＧＡＧＣＣＧＴＴＡＡＡＣＣＮＴＡＧＴＧＴＧ　ＢＲＭＳ－ＢＲＭＳ０７１ＧＣＣＡＴＣＴＡＣＡＣＡＴＴＴＡＴＣＣＣ／ＣＡＣＴＡＡＣＣＴＴＣＴＴＧＣＴＡＣＣＧＴ　ＢＲＭＳ２４０ＣＣＧＴＧＡＧＡＡＧＴＣＡＴＴＴＧＧ／ＡＡＴＣＡＴＴＴＴＴＣＧＡＴＧＡＣＡＧＡＡ　

ＣＴＴＧＧＴＴＧＴＡＴＴＣＴＴＴ　ＢＲＭＳ３０９ＣＡＴＡＡＣＡＣＴＴＴＣＴＡＡＴＣＴＣＧＣＡ／ＴＴＧＴＡＴＴＣＣＡＡＣＧＣＴＡＧＴＴＴＴＧＣＴＴＣＢＲＭＳ３２４ＴＧＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧ／Ｇ　

ＣＢ１００２２ＣＣＡＡＡＣＧＣＴＴＴＴＣＴＴＴＣＴＧＣ／ＣＣＡＡＴＧＡＣＧＣＴＣＣＡＡＧＡＴＴＴ　

ＧＴＴＴＣＡＧＡＡＴＣＡＴＡＴＴＧＴＡＴＴＴＴＧＣＴ　ＣＢ１０２５８ＧＡＡＧＡＴＴＣＧＡＧＣＴＣＴＴＴＣＧＧ／ＣＣＢ１０３６４ＡＧＧＡＣＣＣＧＡＣＴＴＴＣＣＴＴＧＴＴ／ＡＣＣＡＡＡＣＴＣＧＧＣＧＴＡＣＡＡＡＴ　ＥＪＵ５ＥＮＡ２１ＥＮＡ６

ＴＣＣＡＡＧＴＡＧＡＣＣＧＡＡＴＣＡＡＧＡＧＡＧＴ／ＡＴＡＡＡＴＣＧＡＡＣＣＴＧＡＡＡＣＣＡＴＧＴＣＴ　

ＡＣＣＡＡＡＣＧＡＣＧＣＡＡＡＣＡＡＡＣＡＡＡＴＡ／ＴＧＡＣＴＴＣＧＧＡＡＣＧＴＧＣＡＡＴＡＧＡＧＡＴ　

０．８７．０６　６０．８７．２１　５０．８６．２９　４０．８４．３５　３０．８２．２６　３０．８５．９８　５０．９０．９１　９０．８６．１８　５０．８１．０３　４０．９２０．１６　１０．９０．２３　７０．８７．１９　５０．８８．１９　６０．８５．１３　５０．８５．０９　５０．８７．２１　５０．８２．９４　４０．８８．１４　６０．８１．０５　４０．８４．２０　４０．８６．５４　５

Ａ０６７　　

Ａ０３，Ａ０９，Ｃ０８１　１　Ａ０９　Ａ０１，Ｃ０１　Ａ０８　Ａ０６　Ａ０９　Ａ０７　Ａ０６　Ａ０５　Ｃ０９　Ｃ０１　Ａ０４，Ｃ０４　Ａ０９，Ｃ０９　Ｃ０８　

６　５　１１　８　６　７　６　６　６　６　７　５　５　１２８６．４０　

ＴＧＡＧＧＴＴＡＧＡＣＡＴＧＧＣＧＣＴＧＣＴＴＧＣ／ＴＴＴＧＡＴＣＡＴＴＧＴＧＧＴＣＧＣＧＡＧＴＴＣＧ　

ＥＳ０９１ＡＡＧＴＣＡＣＴＡＣＴＴＣＣＡＴＴＧＡＧＧＡＡＣＣ／ＧＡＴＧＡＴＴＧＧＴＧＧＴＴＴＧＧＧＴＴＴ　－ｂ－ＭＲ１１９ＡＡＡＡＣＡＡＴＡＣＧＡＣＴＧＡＴＴＧＡＡＣＣＡＴ／ＣＡＡＡＴＣＡＴＡＧＴＣＧＡＡＡＣＴＡＧＣＴＡＡＡＡ　＿ｎｉａｂｓｓｒ０２２ＧＴＡＧＡＧＴＡＣＴＴＴＧＣＧＡＧＧＣＡＡＧＧＡＴ／ＡＧＧＡＴＴＣＴＴＴＡＣＴＣＴＣＴＧＣＡＧＣＴＴＴ　＿ｓｓｒ１１２ＣＡＣＣＴＧＴＣＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＣＴＧＧ／ＴＴＧＴＣＴＴＴＧＴＴＴＴＣＴＴＣＴＣＡＴＴＣＧｎｉａｂ　ｓＮ１１５１６ＡＴＣＴＣＡＴＧＧＴＴＧＧＴＴＣＡＣＣＧ／ＡＴＴＴＣＣＡＡＡＡＣＡＣＡＣＡＣＧＣＡ　ｓＲ１２７７７ＣＴＣＧＴＣＴＴＣＴＴＣＡＣＣＴＡＣＡＡＣ／ＣＴＧＡＣＡＴＣＴＴＴＣＴＣＡＣＣＣＡＣ　ｓＳ２３３１Ｂ总计平均

ＡＧＣＣＧＴＧＴＡＧＣＡＣＣＡＧＡＡＣＴ／ＣＧＴＧＴＡＧＴＧＴＧＣＧＣＡＴＣＴＴＴ　

４／／西南大学学报（自然科学版）ｔｔｘｂｂｂ．ｓｗｕ．ｃｎ７卷　　　　　ｈ　　　　　第３ｐ：ｊ

２．３　遗传多样性分析

，对２采用类平均法（ＵＰＧＭＡ）０份黄籽甘蓝型油菜核心种质间的多态性数据进行聚类分析，结果表明

（），表明这些种质具有较丰富的遗传多样图１２０份黄籽甘蓝型油菜核心种质的相似系数范围为０．１７～０．６１

性，且１号材料与其他材料间的遗传差异最大，而材料６号与８号、７号与１８号之间的遗传差异相对较小，

）结果与材料本身系谱来源一致（表１．尽管材料１和１１系谱来源也一致，但它们遗传差异却很大．因此，

在遗传育种工作中对于常异花授粉作物的遗传保纯是非常重要的

．

图１　２０份黄籽甘蓝型油菜核心种质的ＵＰＧＭＡ聚类分析图

３　讨　论

新品种选育的前提是具有丰富的种质资源，因此在育种工作中对遗传资源的收集与利用也得到各国育

３］种单位的高度重视．然而，对于众多的种质资源中能被有效用于作物特定目标改良的资源却极为有限［．

因此，如何进行研究与利用是各个育种单位面临的主要问题．研究表明核心种质能够最大限度地代表整个种质资源的遗传多样性，一般认为核心种质应该占整个遗传资源的５％～１０％，但国内外研究者在不同植物核心种质构建中并没有提供合适的取样比例，根据地域不同取样的比例也存在一定的差异，比如在云

［］［５］南，初级核心种质的地方稻种资源取样比例为１６％８，而江西地方稻的取样比例为９．２８％２．另外，不同

［６］，而本研究中的黄籽的材料中取样比例也存在一定的差异性，比如中国普通小麦的取样比例为１４．９％２

甘蓝型油菜核心种质的取样比例为１１．１１％．因此，选取核心种质比例的基本原则是在种群没有明显多样性丢失的前提下，再根据原始种质群体的大小来确定适当的取样比例．

遗传多样性不仅作为种质资源评价利用的基础，也是发掘物种中重要基因资源的信息源．在我国，油菜是重要的油料作物之一，本研究室利用不同的亲本材料已选育和推广了大批的油菜新品种，但产量和品质一直处于较低的水平．因此，在甘蓝型油菜中稳定的黄籽品系的选育是重要的育种目标之一，同时对现有甘蓝型黄籽油菜种质资源的多样性分析及核心种质的确立也显得尤为重要．前人对核心种质表型性状多

［７］为参考指标，主要缺点在于以材料样性进行分析大都依据Ｓｈａｎｎｏｎｉｅｎｅｒ多样性指数和Ｎｅｉ遗传距离２－Ｗ

性状的表型值来衡量核心种质资源易受制于环境条件的变化，其结果也不能真正反映核心种质基因型间的遗传差异．但ＤＮＡ分子标记技术具有不受基因表达的时空限制和环境条件影响等优点，其中ＳＳＲ标记在水稻、小麦、大豆及玉米等主要作物中不仅能很好地检测不同种质资源的特异性，也能指导种质资源的有

］］３－１７２０，２７－３０，且油菜研究方面也有过相关报道［效利用［．本研究选取２０对分布于不同连锁群且重复性和多

态性都比较好的ＳＳＲ标记对２０份甘蓝型黄籽油菜核心种质的遗传变异进行分析，发现黄籽甘蓝型油菜核心种质在基因组水平上有着十分明显的遗传变异，相似系数在０．１７～０．６１之间，体现出较为丰富的遗传多

第１期　　　　　　　　曲存民，等：黄籽甘蓝型油菜核心种质的ＳＳＲ标记分析５

，而７和１样性；而系谱来源一致的材料在表型上存在差异，但在基因型间差异很小（６和８）８号在表型与

基因型间均存在显著差异，说明筛选的核心种质较好地反映了原始种质资源的群体结构，在育种工作中对该核心种质资源的长期保存、利用都具有重要价值．

在育种工作中，利用杂种优势是提高油菜产量的重要途径之一，且双亲的遗传差异越大，杂交种的杂种优势越强．因此，本研究结果提供的２０份黄籽甘蓝型油菜作为核心种质，体现出了丰富的遗传多样性，这将对甘蓝型黄籽油菜杂交种亲本的早期筛选及优势组合利用具有重要意义．

参考文献：

［］Ｆ／／：Ｎ１ＲＡＮＫＥＬＯ　Ｈ，ＢＲＯＷＮ　Ａ　Ｈ　Ｄ．ＣｕｒｒｅｎｔＰｌａｎｔＧｅｎｅｔｉｃＲｅｓｏｕｒｃｅｓａＣｒｉｔｉｃａｌＡｒａｉｓａｌ［Ｍ］ＧｅｎｅｔｉｃｓｅｗＦｒｏｎ　　　　　　　　－ｐｐ

：，ｔｉｅｒｓ．ＮｅｗＤｅｌｈｉＯｘｆｏｒｄａｎｄＩＢＨＰｕｂｌｉｓｈｉｎ１９８４：１１２－１４５．　　　　ｇ

［］／／，２ＲＡＮＫＥＬＯ　Ｈ．ＧｅｎｅｔｉｃＰｅｒｓｅｃｔｉｖｅｓｏｆＧｅｒｍｌａｓｍＣｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ［Ｍ］ＡｒｂｅｒＷ　Ｋ，ＬｌｉｍｅｎｓｅｅＫ，Ｐｅａｃｏｃｋ　ＷＪｅｔ　Ｆ　　　　　　　　ｐｐ

：：，ａｌ．ＧｅｎｅｔｉｃＭａｎｉｕｌａｔｉｏｎＩｍａｃｔｏｎＭａｎａｎｄＳｏｃｉｅｔ．ＣａｍｂｒｉｄｅＣａｍｂｒｉｄｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔＰｒｅｓｓ１９８４：１６１－１７０．　　　　　　ｐｐｙｇｇｙ　

［］，３ＬＡＳＣＨＫＥＪＧＡＮＡＬ　Ｍ　Ｗ，ＲＤＥＲ　Ｍ　Ｓ．ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＧｅｎｅｔｉｃＤｉｖｅｒｓｉｔｉｎＣｌｏｓｅｌＲｅｌａｔｅｄＢｒｅａｄＷｈｅａｔＵｓｉｎＭｉｃ　Ｐ　　　　　　　　－ｙｙｇ　　　

］，（）：ｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅＭａｒｋｅｒｓ［Ｊ．ＴｈｅｏｒＡｌＧｅｎｅｔ１９９５，９１６－７１００１－１００７．　　　ｐｐ

［］４ＲＡＳＡＤ　Ｍ，ＶＡＲＳＨＮＥＹＲ　Ｋ，ＲＯＹＪＫ，ｅｔａｌ．ＴｈｅＵｓｅｏｆＭｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅｓｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｎＤＮＡＰｏｌｍｏｒｈｉｓｍ，Ｇｅｎｏ　Ｐ　　　　　　　　　　－ｇｙｐ　

］，（）：ｔｅＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＤｉｖｅｒｓｉｔｉｎ　Ｗｈｅａｔ［Ｊ．ＴｈｅｏｒＡｌＧｅｎｅｔ２０００，１００３－４５８４－５９２．　　　　　　ｙｐｙｐｐ　

［］，ＭＡ５ＰＪＲＯＯＦ　Ｍ　ＡＳ，ＢＵＳＳＣＲ．ＭｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅａｎｄＡｍｌｉｆｉｅｄＳｅｕｅｎｃｅＬｅｎｔｈＰｏｌｍｏｒｈｉｓｍｓｉｎＣｕｌｔｉ　ＭＡＵＧＨＡＮ　　　　　　　　　　　　－ｐｑｇｙｐ

］，（）：ｖａｔｅｄａｎｄ　ＷｉｌｄＳｏｂｅａｎ［Ｊ．Ｇｅｎｏｍｅ１９９５，３８４７１５－７２３．　　ｙ

［］］６ＨＵＺＦ，ＳＵＮＣＱ，ＬＩＺＣ，ｅｔａｌ．ＳｔｕｄｏｎｔｈｅＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＲｉｃｅＶａｒｉｅｔｉｅｓｗｉｔｈＳＳＲ　ＭｏｌｅｃｕｌａｒＭａｒｋｅｒｓ［Ｊ．Ｊ　Ｚ　　　　　　　　　　　　　　　ｙ　

，（）：ＡｒｉＢｉｏｔｅｃｈ２００１，９１５８－６１．　ｇ

［］］７ＳＲ标记构建江西稻种资源核心种质库的研究［Ｊ．植物遗传资源学报，２０１２，　黎毛毛，黄永兰，余丽琴，等．利用Ｓ

（）：１３６９５２－９５７．

［］］（）：８Ｊ．中国农业科学，２０００，３３５１－７．　李自超，张洪亮，曾亚文，等．云南地方稻种资源核心种质取样方案研究［

［］］（）：９Ｊ．作物学报，２００１，２７３３２４－３２８．　魏兴华，汤圣祥，余勇汉，等．浙江粳稻地方品种核心样品的构建方法［

［］曾亚文，申时全，汪禄祥，等．云南稻核心种质元素及其多样性中心分析［］１０Ｊ．西南大学学报：自然科学版，２００５，

（）：２７１１－４．

［］王久光，蔡一林，孙海艳，等．西南主要玉米地方种质自交系的Ｒ］１１ＡＰＤ标记聚类分析［Ｊ．西南大学学报：自然科学

（）：版，２００４，２６５５４５－５４９．

［］ＴＡ］，１２ＲＡＭＩＮＯＧ，ＴＩＮＧＥＹＳ．ＳｉｍｌｅＳｅｕｅｎｃｅＲｅｅａｔｓｆｏｒＧｅｒｍｌａｓｍ　ＡｎａｌｓｉｓａｎｄＭａｉｎｉｎＭａｉｚｅ［Ｊ．Ｇｅｎｏｍｅ　　　　　　　　　ｐｑｐｐｙｐｐｇ　

（）：１９９６，３９２２７７－２８７．

［］董玉琛，曹永生，张学勇，等．中国普通小麦初选核心种质的产生［］（）：１３Ｊ．植物遗传资源学报，２００３，４１１－８．［］邱丽娟，曹永生，长如真，等．中国大豆（］核心种质构建Ｉ１４Ｇｌｃｉｎｅｍａｘ）．取样方法研究［Ｊ．中国农业科学，２００３，　ｙ

（）：３６１２１４４２－１４４９．

［］ＷＡＮＧ）１５ＬＸ，ＧＵＡＮ　Ｙ，ＧＵＡＮＲＸ，ｅｔａｌ．ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅＳｏｂｅａｎ（ＧｌｃｉｎｅｍａｘＣｏｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎｓｗｉｔｈＡ　　　　　　　　　　　　－ｙｙｇ

］，（）：ｒｏｎｏｍｉｃＴｒａｉｔｓａｎｄＳＳＲ　Ｍａｒｋｅｒｓ［Ｊ．Ｅｕｈｔｉｃａ２００６，１５１２２１５－２２３．　　　ｐｙ

［］Ｌ１６ＩＹ，ＳＨＩＹＳ，ＣＡＯＹＳ，ｅｔａｌ．ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆａＣｏｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎｆｏｒＭａｉｚｅＧｅｒｍｌａｓｍＰｒｅｓｅｒｖｅｄｉｎＣｈｉｎｅｓｅＮａｔｉｏｎａｌ　　　　　　　　　　　　　　　　　ｐ

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８４５－８５２．

［］滕中华，王晓雯，张　建，等．棉花栽培品种／品系的Ｓ］１７ＳＲ标记遗传多样性分析［Ｊ．西南大学学报：自然科学版，

（）：２０１２，３４１２２０－２６．

［］彭忠华，赵　致，张明生，等．］１８ＳＳＲ标记对高海拔玉米自交系遗传多样性的研究［Ｊ．西南大学学报：自然科学版，

（）：２００６，２８１１７－２１．

［］何余堂，涂金星，傅廷栋，等．陕西省白菜型油菜核心种质的初步构建［］（）：１９Ｊ．中国油料作物学报，２００２，２４１６－９．［］刘晓兰，曲存民，谢景梅，等．］２０ＳＳＲ标记对不同黄子甘蓝型油菜亲本材料的遗传分析［Ｊ．植物遗传资源学报，２０１２，

（）：１３４６３２－６３８．

［］Ｄ，］，（）：２１ＯＹＬＥＪＪＤＯＹＬＥＪＬ．ＩｓｏｌａｔｉｏｎｏｆＰｌａｎｔＤＮＡｆｒｏｍＦｒｅｓｈＴｉｓｓｕｅ［Ｊ．Ｆｏｃｕｓ１９９０１２１３－１５．　　　　　　　　　　

［］Ｐ，）Ｇ２２ＩＱＵＥＭＡＬＪＣＩＮＱＵＩＮＥ，ＣＯＵＴＯＮＦ，ｅｔａｌ．ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆａｎＯｉｌｓｅｅｄＲａｅ（ＢｒａｓｓｉｃａｎａｕｓＬ．ｅｎｅｔｉｃＭａ　　　　　　　　　　　ｐｐｐ