英语文献翻译-环境科学-环境地球化学专业

英语文献翻译-环境科学-环境地球化学专业,溶解有机物中木质素的荧光特性替代,逐字逐句手工翻译!

第一作者：Peter J. Hernes

期刊：JOURNAL OF GEOPHYSICAL RESEARCH

发表时间:2009年

Fluorescence-based proxies for lignin in freshwater dissolved organic

matter-溶解有机物中木质素基于荧光特性的替代

摘要

木质素酚已被证明是在环境研究中良好生物标志物。但是木质素分析的复杂性限制了每次研究的样品数量，从而限制了其时空分辨率。相反，用分光光度对溶解有机物进行表征的方法具有速度快、（对样品）无破坏性、价格便宜和只需小的样品量优点，该方法甚至能在现场测量精细尺度溶解有机物循环的时空详情。在本文中，我们提出了一系列交互验证的偏最小二乘模型，利用溶解有机物的荧光性质解释高达91%的样品中木质素的组成和浓度可变性（两年的样品分季度的取自美国加利福尼亚州萨卡拉门托河和圣华金河河口三角洲）。这些模型随后用来通过测得的荧光特性预测木质素的浓度和组成。经过昼夜循环，模拟的木质素的组成大致保持不变，而模型中的木质素浓度的改变大于预期，木质素基于荧光特性的替代的灵敏性可以作为选择最详实样本作为详细木质素表征的有用工具。经过足够的校准，类似的模型可以显著扩大我们研究复杂地表水系统溶解有机物的来源和转化过程。

前言

溶解有机物的生物地球化学特征已经成为全球碳循环的重要组成部分，它是水生环境中食物网的一部分，这同时也在全球水环境中转移了显著数量的碳损失。影响溶解有机物循环的进程与DOM结构和DOM库中单个分子结构的活性密切相关。生物标志物分析技术（比如木质素的氧化铜氧化法）是研究DOM 的重要工具，因为这些技术能够提供DOM的分子世界，这对理解DOM的反应性是至关重要的。

木质素能够提供维管植物和陆源有机物的重要来源信息，同时还有能力获取成岩历史。利用对溶解性木质素的测定表明陆源有机物只是海洋DOM库中的微小部分，尽管从河流流入到海洋中的DOM实际大于海洋DOM库的平均交换量。

英语文献翻译-环境科学-环境地球化学专业,溶解有机物中木质素的荧光特性替代,逐字逐句手工翻译!

这表明陆源有机物在海洋环境中会迅速损失掉。光化学氧化作用作为一个可能的途径，赋予DOM中的木质素组分一个化学特征，即为酸升高：在大分子中醛以及紫丁香酚与香草酚的比值（S/V）下降。在淡水系统中，溶解的木质素浓度和组成强烈地受到当地DOM的景观尺度特征和该系统的水温特征影响。用来表征河流DOM中的重要一部分的碳标准化的木质素量可能并不像通常所认为的那样来自于维管植物。总之，这些研究表明来源于维管植物的DOM作为作为一个动态库，在水环境中经历了时空上的巨大变化，同时也表明木质素是重大环境进程中的有力示踪剂。然而，很多研究都需要进行木质素分析，而分析的难度以及氧化铜氧化法的高花费严重限制我们在获取自然系统动态变化的时的时空分辨率。

与耗时并复杂分子示踪剂测量形成鲜明对比的是，例如DOM荧光技术的分光光度技术能够迅速地在台式设备上测量和在几乎连续地在原位仪器上收集。尽管获得的信息没有分子示踪剂分析明确，荧光测量的结果仍与溶解有机物的化学组成直接联系，能用来确定DOM的来源和转化历史。有很多的研究自然水体荧光特征与DOM的浓度、来源和组成相联系[e.g., Bergamaschi et al.,2005; McKnight et al., 2001; Stedmon et al., 2003]。例如，激发-发射矩阵（EEMs）的特定特征，比如由于腐植酸和类富里酸物质造成的峰上的减色变化被归因为芳香性的分解[Blough and Del Vecchio,2002; Coble, 1996]，这一发现被用来辨别来源于外来的和本地的DOM[Spencer et al., 2007a]。用分光光度测量方法分辨不同来源DOM和观测DOM的转化，以及在原地进行测量的能力，使对水环境的高频、实时监控变为现实。

Hedges在1997年的一项研究中推断基于分光光度测量的详尽调查获取近海DOM的动态特征（光化学分解）。而最近的研究进一步显示出通过海洋[Coble, 2007]和河流[Spencer et al., 2007b]中的高频的分光光度测量在分辨DOM的不同来源和监控DOM组成在短时间内的动态变化的潜力。本项研究的焦点在于建立一个基于荧光的在一个多样的河口环境中的木质素浓度和组成模型，使之通过荧光测量达到高灵敏性和高时空覆盖，并成为获取木质素循环动态特征的工具。

2.方法

2.1 取样和分析

58个水样（经0.2μm滤膜滤过）采自萨克拉门托河和圣华金河河口三角洲

英语文献翻译-环境科学-环境地球化学专业,溶解有机物中木质素的荧光特性替代,逐字逐句手工翻译!

的11个采样点（以下简称三角洲样品）。这批样品时间跨度超过两年的水温循环，具体为1999年12月到2001年5月[Stepanauskas et al., 2005]。这个三角洲是位于美国加州中部旧金山湾口潮汐淡水部分，具有很多对比的栖息地和土地用途。这11个采样点包括湿地、河流、疏导水道和开阔水面。所有的三角洲样品在24小时内进行了分光光度分析，并根据Aiken et al. [1992]的方法通过XAD8和XAD4树脂对DOM进行浓缩，然后冷冻干燥[Kraus et al., 2008]。这些方法是一个更大的研究中的一部分，使用XAD是为了分离足够的物质用来做多项不同的研究，而C18固相萃取技术通常只能用来测量木质素。然而，相比旋转蒸发和C18固相萃取技术，XAD技术的淡水木质素恢复率约为90%，并有最小成分分离，因此木质素测量的XAD基本上是全水测量。XAD后萃取的木质素分析是采用碱性氧化铜法，将样品在一个蒙乃尔合金反应器中，加热温度为155℃，氧化产物用乙酸乙酯萃取，再用GC-MS定性定量分析，采用对单个木质素酚使用精度10%五点校准方案[Eckard et al., 2007; Hernes andBenner, 2002]。木质素数据和荧光光谱都是作为我们模型建立的基础。除了三角洲样品外，在圣华金河的Crow’s Landing（在三角洲上游20英里左右）取了25个水样（0.2μm滤膜滤过），采样时间以两小时为间隔，跨度为从2005年7月28日中午起到2005年7月30日中午[Spencer et al, 2007b]。圣华金河排出加州中部峡谷的南部的水，由于水改道，它在夏季的月份并不是与其源头想联系的，在这一时期，主要排出的是农耕、果园和湿地水[Kratzer et al., 2004]。Crow’s Landing的水样在24h内进行荧光特性分析，然后用于模拟木质素浓度和组成。

对滤过水的分光光度测量使用SPEX model Fluoromax 2 (Delta样品) and 3 (Crow’s Landing样品)分光光度计(Horiba Jobin Yvon, Ltd., Japan)，在室温下使用10mm石英比色皿。激发波长范围为250–440 nm，梯度为10 nm；对每一个激发波长，发射波长的测定范围为250-440nm，间隔为1nm，但是在这项研究中使用的最低波长总是高激发50nm，这是为了避免瑞利散射现象。所有产生的激发-发射矩阵（EEMs）都进行了水空白修正、拉曼归（Raman-normalized）和使用由制造商提供的校正因子仪器进行偏差校正。因此，从Fluoromax 2和Fluoromax 3得到的荧光光谱是可直接比较的。荧光光谱也进行了内部滤镜影响修正（IFEs）

[Spencer et al., 2007a],对木质素的测定包括三种香草（V）酚类（香草醛，香草酮，

英语文献翻译-环境科学-环境地球化学专业,溶解有机物中木质素的荧光特性替代,逐字逐句手工翻译!

香草酸），紫丁香（S）酚（丁香醛，乙酰丁香酮，丁香酸）和两种肉桂基（C）的酚（对-香豆酸，阿魏酸）。

2.2 建模和应用

使用The Unscrambler软件(Camo)建立偏最小二乘法模型来通过激发-发射矩阵来预测三角洲样品的木质素组成和浓度（模型使用10nm发射步骤的变现和1nm的相同，故选择10nm的来减少运行时间，因此每个光谱使用约350个发射（emissions））。所有测得的激发/发射对都在没有事先参数的模型上使用，以便充分利用激发-发射矩阵的所用信息。偏最小二乘法模型（PLS）与主成分分析（PCA）相类似，大量的变量被减少为正交主成分（PCs）。然而，PCA可以用来在一个单矩阵找到所有变量之间的整体结构，PLS利用线性回归最大化的两个矩阵之间的协方差，迭代计算输入（荧光特性）和输出（木质素）变矩阵的主成分。更多关于PLS模型的信息可以从Geladi and Kowalski [1986]中获取。所有的荧光和木质素数据都进行了标准偏差归一化来保证一致性；然而，我们注意到木质素数据的归一化对模型的结果没有影响。所有实际模型的变量都进行了平均中心化（mean centered），尽管为了解释的方便，这些预处理在统计最具预测性的EEMs区域时的被除去了。平均中心化能提高约5%模型的拟合度。所有的模型都进行了“留一法”交叉验证，每一个样品依次排除，然后用剩下的样品校准的模型对它进行预测。每一个生成的模型包含一个与EEMs相同的矩阵回归系数和一个特定木质素参数的基准值，后者类似于线性回归中的截距。当运用平均中心化后，这个基准值大约与所有样本的木质素平均值相同。预测是通过将回归系数两个的与任何相同大小（identically sized）EEM相乘，将所有的结果相加，然后将结果与基准值想结合。预测值和观测值之间的剩余误差被用来评价模型的表现。15个正交的主成分在每一个模型中都进行了计算；然而，只有最前面的3~7个是显著的。我们生成了木质素浓度（μg/L），碳标准化木质素量(mg 100 mg OC -1)，肉桂酚与香草酚比（C/V），丁香酚和香草酚比（S/V）和香草酸和香草醛之比（(Ad:Al)v）等的模型关系。随后，这些模型关系都用于预测一个Crow’s Landing日研究中木质素浓度和组成[ Spencer et al., 2007b]。

我们对将平行因子分析(PARAFAC)作为激发-发射矩阵的数据缩减技术的兴趣上升了，我生成了三角洲样品的3-、5-、7-组分平行因子分析模型来测试这

英语文献翻译-环境科学-环境地球化学专业,溶解有机物中木质素的荧光特性替代,逐字逐句手工翻译!

些组分（组成）中是否有与我们的木质素参数相关联。对58个样品在MATLAB上的N way toolbox version 3.10工具箱上进行平行因子分析[ Andersson and Bro,2000]。所有的模型都通过将所有测得的EEMs和模拟的EEMs进行对比和观察剩余的EEMs的强度来验证。由于样本数目的限制，分开的一半分析没有用在这些模型上。

3.结果

用于模型训练的所有木质素数据都在Eckard et al. [2007]中发表了。现简要介绍一下（表格一），建模样本的木质素浓度范围为3.0到36.8μg/L，其中湿地的平均木质素浓度最高（18.5μg/L），河流平均木质素浓度最低（7.7μg/L）。碳标准化的量Λ8的范围为0.13~0.846mg/100 mg OC，也是湿地平均值最高（0.48），而开阔水面样点平均值最低（0.29）。开放水面的S:V平均值最高（1.28），河流样本的平均值最低（0.94），S:V值范围为0.59 到 1.53。C:V值范围为0.13 到 0.85，开放水面的S:V平均值最高（0.79），河流样本的平均值最低（0.29）。最后，关于(Ad:Al)v值，从这个数据建模数据变化接近四倍，其值为0.83到3.21，开放水面（1.44）和河流样本（1.42）的平均值最高，湿地（1.11）和三角洲沟渠（1.12）的平均值最低。

四个样本的荧光光谱类似十分相似（如图三所示）。最初的特征分辨包括河流样本类腐殖质峰A上的一个浅色位移（hypsochromic shift）（可以从Stedmon et al. [2003]中激发-发射矩阵峰的概况）（河流样本的中心为250/450，其他样本的中心为250/470），和湿地样本中总体较高的荧光强度（最大强度约为1个罗曼单位Raman Unit, R.U；开阔水面的为0.8；河流和沟渠的为0.6）。

我们对三角洲样品五个主要的木质素参数的模拟取得不同程度上的成功。对木质素浓度进行“留一法”验证样本与观测到的数据相关性(p < 0.0001, student t test)）较好(r2 = 0.91,图 4a),碳标准化总量(r2 = 0.79;图 4b), S:V (r2 = 0.74, Figure 4c), 和 C:V (r2 = 0.50,Figure 4d)。然而，这个模型没能预测(Ad:Al)v值(r2 = 0.09, plot not shown)成功。除相关性系数之外，重要的主成分的数目显示出了单个模型总体可靠性，总的来说，更少的主成分代表模型更加可靠。四个成功模型的重要主成分的数目为3（C:V）到7 (Λ8)（如图四）。现在还没有被大家所接受的统计预测误差的方法[Nadler and Coifman,2005; Zhang and Garcia-Munoz, 2009]，